This study investigated purification and milk-clotting activity of the enzymes produced by Bacillus subtilis var, natto and Rhizopus oligosporus compared with that of commercial rennet. The clotting time, viscosity, tension and microstructure of the curd and electrophoretic patterns of milk proteins were determined. The milk-clotting activity/proteolytic activity ratios (MCA/PA ratio) of B. subtilis, R. oligosporus and commercial rennet were also compared. The results revealed that the curd formed by the commercial rennet had the highest viscosity and curd tension and the shortest clotting time among the three enzymes. However, curd produced by Rhizopus enzymes was ranked as second. From the MCA/PA ratio and electrophoretogram analyses it could be concluded that the enzyme produced by B. subtilis had the highest proteolytic activity, while the commercial rennet had the highest milk-clotting activity. Observations of microstructures of SEM showed that the three-dimensional network for curd formed by commercial rennet was denser, firmer and more smooth. The milk-clotting activity, specific activity, purification ratio and recovery of the purified enzymes produced by both the tested organisms were also determined with ion exchange chromatography and gel filtration.
Chitinase (EC 3.2.1.14) from culture fluid of Bacillus licheniformis KFB-C14 was purified 66-folds to homogenity in overall yield of 21% by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Toyopearl, Butyl-Toyopearl and TSK-Gel HW-55F column chromatography. The enzyme protein had a molecular weight of about 86,000 and was composed of one subunit. The enzyme was significantly stable not only at high temperature but also on treatment with organic solvents and protein denaturants such as SDS, urea and guanidine-HC1. The optimum temperature and pH for reaction was 60$\circ $C and 6.0, respectively. The enzyme activity was inhibited by only Mn$^{2+}$ ion, but not inhibited by EDTA, N- ethylmaleimide and pCMB. The enzyme had high activity with colloidal chitin (V$_{max}$: 421) and commercial chitin (V$_{max}$: 480), but not with typical substrates of exo type chitinase. The thermostable chitinase had an useful reactivity for producing functional chitooligosaccharide, showing the production of (GlcNAc)$_{1}, (GlcNAc)$_{3}$, and (GlcNAc)$_{2}$ as major product.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.24
no.4
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pp.636-641
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1995
Proteolytic activities were compared using three species involving in squid jeotkal fermentation and showing positive reaction upon casein test : Pseudomonas D2, Flavovacterium odoratum and Acinetobacter calcoaceticus. Pseudomonas D2 produced highest activity of protease at 72h when incubated in our own modified medium(polypeptone, 0.5% ; tryptone, 0.5% ; NaCl, 3% ; pH, 7.5). Thus, this specie was selected for the further study. The growth pattern was coincided with the production of protease. Thus purification of protease was proceeded by ethanol precipitation, sephadex G-100 gel filtration, and DEAE sepharose ion exchange chromatography. The purified protease showed highest activity at pH 7.0 and 5$0^{\circ}C$. The enzyme was very stable over the wide ragnes of the temperature ; even with one hour heat treatment at 7$0^{\circ}C$, the enzyme showed substantial amount of the activity toward casein. In addition, the enzyme was stable over the wide range of pH. Molecular weight of the protease was determined to be 17.4 kD by SDS-PAGE.
Journal of the Korean institute of surface engineering
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v.29
no.6
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pp.788-796
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1996
$TiO_2$ films prepared by RF magnetron sputtering, electron beam evaporation, ion assisted deposition (IAD) and sol-gel method are prepared on c-Si substrate and vitreous silica substrate respectively. From the transmission spectra of $TiO_2$ films on vitreous silica substrate in the spectral region from 190 nm to 900 nm, k($\lambda$) of $TiO_2$ is obtained. Using k($\lambda$) in the interband transition region the coefficients of the quantum mechanical dispersion relation of an amorphous $TiO_2$ and hence n($\lambda$) including the optically opaque region of above fundamental transition energy are obtained. The spectroscopic ellipsometry spectra of $TiO_2$ films in the spectral region of 1.5-5.0eV are model analyzed to get the film packing density variation versus i) substrate material, ii) film thickness and iii) film growth technique. The complex refractive index change of these $TiO_2$ films versus water condensation is also studied. Film micro-structures by SE modelling results are compared with those by atomic force microscopy images and X-ray diffraction data.
A novel antimicrbial peptide , named HFS-I, was isolated and characterized from the skin of the hagfish, Eptatretus bugeri. The decapeptide with a molecular mass of 1279.5 Da was purified to homogeneity using a gel-filtration column, ion-exchange and C18 reverse-phase high performance liquid chromatograpy . The complete amino acid sequence of HFS-I, which was determined by a combination of an automated amino acid sequencing and FAB-MS, was F-P-W-W-L-S-G-K-Y-P-NH2. Comparison of the amino acid sequence with those of other known antimicrobial peptides revealed that HFS-I was a novel antimicrobial peptide. HFS-I showed a weak antimicrobial activity in vitro aganinst a broad spectrum of microorganism without hemolytic acitivity.
$Ni_{0.2}V_2O_5$ aerogel (ARG) was synthesized via the sol gel method and has been studied with an emphasis on the characterization of its electrochemical properties. ARG appear to be amorphous layered material. Electron micrograph revealed that entangled fibrous textures has been grown to form anisotropic corrugated sheets. Several sites for the Li ion intercalation exist between the layers of ARG and average cell potential was 3.1 V vs $Li/Li^+$ Th charge transfer resistance increases 3 to 4 times as lithium composition increases, but the interphase resistance remains almost constant regardless of the lithium composition in thc ARG.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1998.11a
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pp.135-135
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1998
To find an antagonist of Pythium ultimum, the causal agent of damping-off, numerous actinomycete strains were screened for in vitro inhibiting mycelial growth of the target fungus and producing bioactive metabolites. A strain identified as Streptomyces sp. G60655 was isolated and used for further antagonistic efficacy. The degree of antagonism between the fungus and G60655 was affected by the medium used. Furthermore, the preinoculation of the antagonist was found to be necessary to exhibit the maximum efficacy of antagonsim against the fungus. From the culture broth, a bioactive metabolite was detected and purified by solvent extraction, silica gel chromatography and preparative HPLC. The FAB-MS spectrum of the active compound showed a molecular ion peak at m/z 1101 (M + H)$\^$+/, suggesting the molecular weight of 1100. The UV absorptions at 242 and 323 nm indicated the presence of aromatic functions. The structure of this compound was identified as echinomycin, a depsipeptide antibiotic by spectroscopic studies including various NMR measurements. Echinomycin was inactive against several soil born fungi, but inhibited the mycelial growth of P. ultimum and its related oomycetous fungi.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.141-141
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1993
말징버섯 Calvatia craniformis의 culture broth 40 liter를 여과하여 얻은 균사채를 열수 추출하여 진한 갈색 건조분말(Fr. A) 13.1g을 분리하였다. Fr. A에 대하여 DEAE-cellulose ion chromatography를 시행하여 중성분획인 흰색 분말 (Fr. B) 2.50g을, 산성분획인 갈색 분말 (Fr. C) 3.50g을 각각 분리하였다. Fr. B 500mg에 대하여 Sepharose CL-4B gel filtration chromatography를 시행하여 흰색분말 Fr. D(Calvatan) 350mg을 분리하였다. Calvatan 350mg에 대하여 Con A-Sepharose 4B affinity chromatography를 적용하여 미흡착 분획인 Fr. F($\alpha$-form)와 흡착 분획인 Fr. E ($\beta$-form)로 정제하였다. 항암작용의 기전을 구명하고자 마우스에 대하여 면역학적 실험을 시행하였다. macrophage의 활성에 대한 영향을 조사하였던 바, 투여군의 활성화된 macrophage에 의해 유리되는 superoxide anion의 양은 대조군에 비해 1.4배 증가하였고 Calvatan 투여군의 용혈반 형성세포(PFC)는 대조군에 비해 3.1배 증가하였다. 화학 분석에 의해, Calvatan은 다당체 87.2%, 단백질 1.8% 및 hexosamine 1.3%로 구성되어 있었다. 따라서 항암성 분획들은 protein-bound polysaccharide임을 알 수 있었다. 또한 각 분획의 다당체를 구성하고 있는 단당류는 glucose, galactose, mannose 및 xylose 였으며 단백질 부분은 16종의 아미노산으로 구성되어 있었다. IR 스펙트럼은 3300-3400 $cm^{-1}$에서 0-H stretching frequency, 2900 $cm^{-1}$ 에서 C-H stretching frequency, 1630 $cm^{-1}$ 에서 C-0 stretching frequency. 1000-1100 $cm^{-1}$에서 C-H 및 C-0 bending frequency를 나타내는 다당체의 전형적인 특성을 보여주었다.을 보여주었다.
The presence of polyphosphate phosphohydrolase (PPPH) and tripolyphosphate phosphohydrolase (TPPH) in Chlorella ellipsoidea were confirmed from the cell-free extract of the algal cells and three forms of PPPH were isolated, purified, and measured Km-Vmax value and inhibitory effect by metal ions, respectively. PPPH was most active at pH7.2, whereas TPPH at pH 7.6. Both enzymes exhibited their maximum activity at $37^{\circ}C$. For the manifestation of catalytic activity, divalent, divalent metal ions are needed, and the best activator for both enzymes was $Co^{++}\;ions\;(10^{-3}M)$. These enzymes were inhibited by $Hg^{++}\;ions\;(10^{-3}M)$ considerably. PPPH from Chlorella ellipsoidea was purified by ammonium sulfate fractionation, ion-exchange chromatography on DEAE-Sephadex A-25, and gel filtration on Sephadex G-100, and some properties of the three different fraction with PPPH activity $(PPPH_1,\;PPPH_2,\;and\;PPPH_3)$ were found, i.e, PPPH has multiple form. The Km values of $PPPH_1,\;PPPH_2,\;and\;PPPH_3$ obstained were $6.25{\times}10^{-4}M,\;10^{-4}M-4/M,\;and\;3.33{times}10^{-4}M$ and Vmax were 3.33 mM/min, 3.33 mM/min, and 2.67 mM/min, respectively. It was shown that the types of inhibition of $Hg^{++} on the activities of three forms of PPPH were competitive inhibition.
Transactions of the Korean Society of Automotive Engineers
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v.16
no.5
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pp.60-67
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2008
The catalytic filter of Cu-ZSM5/alumina beads was considered to reduce NOx in the urea SCR system. Catalytic support of porous alumina beads with mean pore size $130{\mu}m$ and porosity $75{\sim}83%$ were prepared using foaming and gel-casting method. The Cu-ZSM5 catalysts were coated on the supporting alumina beads using $Cu(NO_3)_2$ by ion exchange method. After a washcoating process was applied to coat 10w% Cu-ZSM5 on porous alumina bead, coating layer was estimated $20{\mu}m$ in thickness. The characterization and the feasibility as a catalytic supports were investigated. And the NOx conversion test in Cu-ZSM5/Alumina Beads filter system was conducted by using Urea as reductants under laboratory test. The NOx conversion was increased as size and porosity of beads and observed more than 95% excellent NOx conversion above $300^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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