• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제24권1호
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• pp.101-109
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• 1997

This study was carried to determine the possibility of finding motile spermatozoa and fertilization, pregnancy rate after testicular sperm extraction(TESE) with ICSI in obstructive and non-obstructive azoospermic patients. In 154 cases(132 patients), obstructive azoospermia was 77 cases and non-obstructive azoospermia was 77 cases. In obstructive azoospermia, patients generally showed normal spermatogenesis and included vas agenesis(n=8), multiple vas obstruction(n=7), epididymal obstruction (n=54). Total of 982 retrieved oocytes were obtained and 84.4% were injected. The fertilization rates with 2 PN and cleavage rate were 72.5% and 62.3%, respectively. 30 pregnancies(38.9%) were achieved and the ongoing pregnancies were 22 cases (28.6%). In non-obstructive azoospermia, patients showed hypospermatogenesis(n=49), maturation arrest(n=4), Sertoli cell only syndrome (n=24). The various stages of spermatogenic cell could be retrieved by TESE and could be reached normal fertilization and embryo development with ICSI. Total of 1072 retrieved oocytes obtained and 80.2% were injected. The fertilization rates with 2 PN and cleavage rate were 52.8% and 68.9%, respectively. 22 pregnancies(30.1%) were achieved and the ongoing pregnancies were 19 cases(26.0%). Conclusively, the combination of TESE with ICSI using testicular spermatozoa can achieve normal fertilization and pregnancy rate and effective method in obstructive and non-obstructive azoospermic patients.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제25권3호
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• pp.331-340
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• 1998

본 연구에서는 돼지 난자내에 돼지정자, 여러 가지 처리된 정자두부 (1% Triton, 0.1% Trypsin, 100mM NaOH)및 이종정자 (소, 쥐, 사람)를 미세 주입한 후 난 활성과 웅성 전핵형성, 전핵의 이동 및 배발달을 관찰하였다. 전자현미경으로 관찰한 결과 Triton X-100을 처리하였을 때 첨체가 제거되었으나 핵 주변 물질은 제거되지 않았고 Trypsin 또는 NaOH를 처리 할 경우 핵주변 물질 (perinuclear material)이 제거됨을 볼 수 있었다. 돼지 난자는 정자, 정자두부 및 Triton X-100을 처리한 정자두부의 주입을 통해 난 활성이 유도되었으며 쥐, 소, 사람의 정자를 주입하였을 때 난 활성이 유도되고 정상적인 전핵형성이 이루어졌다. 그러나 정자꼬리나 Trypsin 또는 NaOH에 의해 정자 핵주변 물질(perinuclear material)이 제거된 정자두부를 주입하였을때는 난 활성은 야기되지 않았다. 유사분열 및 2-세포기까지 정상적인 수정은 동종의 정자 및 정자두부를 주입한 난자에서 관찰할 수 있었으나 이 종정자를 주입한 난자에서는 관찰되지 않았다. 또한 상실배 및 배 반포까지 정상적인 수정은 동종의 정자 및 정자두부를 주입한 난자에서 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 돼지에서 정자 및 정자두부의 미세주입에 의해 수정이 이루어지는 것을 시사하며 수정시 정자유래의 난할성인자는 정자 핵주변 물질(porinuclear material)에 존재하며 종특이적이지 않다는 것을 보여주는 것이다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권3호
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• pp.207-215
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• 2003

Objective: To compare the pregnancy outcomes after in vitro fertilization with intracytoplasmic sperm injection (IVF-ICSI) between obstrucvtive and non-obstrucvtive azoospermia. Methods: From January 1994 to December 2002, 524 patients with obstructive azoospermia (886 cycles) and 163 patients with non-obstructive azoospermia (277 cycles) were included in this study. Microsurgical epididymal sperm aspiration (MESA) or testicular sperm extraction (TESE) in obstructive azoospermia and TESE in non-obstructive azoospermia were perfomed to retrieve sperm, which was used for ICSI and then fertilized embryos were transferred. The results of ICSI - fertlization rate (FR), clinical pregnancy rate (CPR), clinical abortion rate (CAR) and delivery rate (DR) - were statistically analysed in obstructive versus non-obstructive azoospermia. Results: There were no differences in the number of retrieved oocytes, injected oocytes for ICSI and oocyte maturation rate. FR was significantly higher in obstructive than non-obstructive azoospermia (71.7% vs. 61.1%, p<0.001). There was no difference in CPR per embryo transfer cycle. After pregnancy was established, however, CAR was significantly higher in non-obstructive than obstructive azoospermia (25.6% vs. 12.5%, p=0.004). DR per clinical pregnancy cycle was significantly higher in obstructive than non-obstructive azoospermia (78.0% vs. 64.4%, p=0.012). In the karyotype ananlysis of abortus, abnormal karyotypes were found in 75.0% (6/8) of obstructive and 55.6% (5/9) of non-obstructive azoospermia. Conclusion: Our data show significantly higher FR in obstructive than non-obstructive azoospermia. Though there was no differrence in CPR, CAR was significantly higher in non-obstructive than obstructive azoospermia. The abortion may be related to the abnormal karyotype of embryo, but further investigations are necessary to elucidate the cause of clinical abortion in azoospermia.

• 대한생식의학회:학술대회논문집
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• 대한불임학회 1999년도 제37차 춘계 학술대회
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• pp.45-52
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• 1999

포유동물의 수정은 정자가 난자내로 침입함으로써 시작되는데 이때 정자는 부계의 유전물질 이외에도 다양한 후성적 요소들 (epigenetic factors), 즉 난활성 인자, 중심체, 부계 유래의 mitochondria 및 부계 특이 삽입 유전자 등을 난자에 전달해 준다. 하지만 수정 및 초기 배발달동안 정자에 의해 전달된 후성적 요소들의 역할과 기능적 발현 및 억제 기전에 관해서는 명확히 알려져 있지 않다. 수정보조기법인 ICSI 및 ROSI의 개발은 남성불임치료에 혁신적인 기술로 자리잡고 있을 뿐만 아니라 포유동물의 수정과정을 이해 하는데 많은 도움을 주고 있다. 본 연구실에서는 최근 몇 년간 돼지난자에 정자, 다양한 정자 구성 요소들, 정낭세포, 및 이종의 정자 등을 미세주입하여 수정을 유도한 후 핵질 및 세포질의 변화과정과 배 발달과정을 살펴 봄으로써, 수정시 정자에 의해 전달되는 후성적 요소들의 기능과 발현 기작을 규명하고자 하였다. 이러한 연구의 결과들은 체외수정, ICSI, ROSI 등의 임상치료기술의 개선에 기초자료로 활용될 수 있으리라 생각한다.

• 대한생식의학회:학술대회논문집
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• 대한생식의학회 2007년도 제53차 추계학술대회 초록집
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• pp.141-141
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• 2007

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제35권4호
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• pp.293-301
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• 2008

목 적: 비폐쇄성 무정자증 환자에서 고환의 조직병리학적 진단에 따라 고환조직내 정자채취술 (Testicular sperm extraction, TESE) 후 난자세포질내 정자주입술 (Intracytoplsmic sperm injection, ICSI)의 체외수정시술 결과를 알아보고자 하였다. 연구방법: 비폐쇄성 무정자증으로 고환조직내 정자채취술 후 난자세포질내 정자주입술을 이용하여 배아 이식을 시행한 122주기를 분석하였다. 고환의 조직병리학적 진단에 따라 Germ-cell aplasia (GA, 40주기), Maturation arrest (MA, 32주기) and severe hypospermatogenesis (S-HS, 50주기)로 구분하여 체외수정시술 결과를 비교하였으며, 이들 결과를 난자세포질내 정자주입술을 이용한 폐쇄성 무정자증 환자의 체외수정시술 결과와 비교하였다. 결 과: 고환조직내 정자채취술 후 난자세포질내 정자주입술시 수정율은 각각 58.1% in GA, 42.2% in MA and 48.0% in S-HS로 조직병리학적 진단에 따른 차이는 없었으며, 폐쇄성 무정자증 환자의 72.9%에 비해 유의하게 낮은 수정율을 보였다 (p<0.001). 고환조직내 정자채취술시 채취된 정자 (spermatozoa, 94주기)로 난자세포질내 정자주입술을 시행한 주기의 배아 이식 후 임신율은 각각 22.6% in GA, 29.4% in MA와 26.1% in S-HS이었으며, 출생률은 각각 16.1%, 29.4%와 19.6%로 조직병리학적 진단에 따른 차이는 없었다. 정자세포 (spermatid, 16주기)를 사용하여 난자세포질내 정자주입술을 시행한 주기의 임신율은 각각 0.0% (0/3 주기), 9.1% (1/11주기)와 0.0% (0/2주기)이었으며, 출생률은 각각 0.0%이었다. 정모세포 (spermatocyte, 12주기)를 사용한 주기의 임신율은 각각 0.0% (0/6주기), 0.0% (0/4주기)와 0.0% (0/2주기)이었으며, 출생률도 각각 0.0%이었다. 결 론: 비폐쇄성 무정자증환자의 배아이식을 시행한 주기에서 고환의 조직병리학적 진단에 따른 난자세포질내 정자주입술시 수정율은 차이가 없었으며, 폐쇄성 무정자증 환자에 비해 유의하게 낮은 수정율을 보였다. 비폐쇄성 무정자증환자에서 고환조직내 정자채취술시 정자를 채취하여 난자세포질내 정자주입술을 시행한 주기의 체외수정시술 결과는 고환의 조직병리학적 진단에 따라 차이를 보이지 않는다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제30권2호
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• pp.185-188
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• 2003

Objective: To report tow cases of successful pregnancies following long term cryopreserved spermatozoa prior to bone marrow transplantation (BMT) for chronic myelogenous leukemia (CML) and severe aplastic anemia (SAA). Materials and Methods: Case report. Results: With the first case, after cryopreservation of semen from 25 year-old man with CML prior to BMT, his wife is being pregnant by intracytoplasmic sperm injection (ICSI) using thawed spermatozoa. With the second case, 28 year-old man with SAA became father by ICSI using banked spermatozoa before BMT. Conclusion: These cases support that men with malignancy have the chance of fathering their own genetic children. It is important therefore, to increase the awareness of clinicians especially oncologists and patients themselves to the new developments in preserving fertility for cancer patients.

• 한국가축번식학회지
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• 제24권2호
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• pp.143-154
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• 2000

본 연구는 생식보조기법을 시행한 불임환자로부터 얻은 난자를 일반적인 수정법과 세포질내 정자직접주입법으로 수정을 유도한 다음 정상수정에 실패한 난자에 대한 미세소관과 염색체의 형태학적 차이를 laser scanning confocal microscope를 이용하여 비교분석하고자 실시하였다. 일반적 수정법 혹은 세포질내 정자직접주입법 실시 후 18시간째에 해부현미경 하에서 난자를 관찰하였을 때 전핵형성에 실패한 미수정란, 한 개의 전핵 또는 3개이상의 전핵의 형성이 관찰된 이상수정란으로 구분하여 연구를 실시하였다. 미세소관의 관찰을 위해서 (-tubulin antibody를 반응시킨 후 형광물질이 부착된 2차항체와 반응시킨 후 관찰하였으며 염색체의 관찰을 위해서는 propidium iodide로 염색한 다음 confocal microscope 하에서 관찰하였다. 연구결과 대부분의 난자는 수정과정중에 있었으나 일부의 난자에서는 특정단계에서 정지되어 있는 것이 관찰되었다. 즉, 감수분열 중기에서 정자의 침입이 이루어지지 않은 경우, 정자의 침입은 이루어졌으나 sperm aster 형성이 불완전한 경우, 웅성 및 자성전핵의 형성에 실패한 경우 및 전핵의 위치가 불완전한 경우 등이 관찰되었고 이들 난자의 경우 높은 비율로 미세소관과 염색체의 이상이 관찰되었다. 이상의 연구결과로 미루어 볼 때 생식보조기법의 시술과정에서 채취되는 난자의 수정실패의 원인은 세포골격기관 특히 미세소관의 이상과 염색체의 이상에 기인되는 것으로 사료되면 이러한 세포골격 구성물질의 이상에 대해서는 추후에 세포조직학적 또는 분자생물학적 분석이 필요하다고 하겠다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제42권4호
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• pp.143-148
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• 2015

Objective: The aim of the current study was to determine the predictive value of anti-$M{\ddot{u}}llerian$ hormone (AMH) levels for pregnancy outcomes in patients over 40 years of age who underwent in vitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer (IVF/ICSI-ET) cycles. Methods: We retrospectively analyzed the medical records of 188 women aged 40 to 44 years who underwent IVF/ICSI-fresh ET cycles due to unexplained infertility in the fertility center of CHA Gangnam Medical Center. Patients were divided into group A, with AMH levels <1.0 ng/mL (n=97), and group B, with AMH levels ${\geq}1.0ng/mL$ (n=91). We compared the clinical pregnancy rate (CPR) in the two groups and performed logistic regression analysis to identify factors that had a significant effect on the CPR. Results: The CPR was significantly lower in group A than group B (7.2% vs. 24.2%, p<0.001). In multivariate logistic regression analysis, AMH levels were the only factor that had a significant impact on the CPR (odds ratio, 1.510; 95% confidence interval, 1.172-1.947). The area under the receiver operating characteristic curve for AMH levels as a predictor of the CPR was 0.721. When the cut-off level of AMH was set at 1.90 ng/ mL, the CPR was 6.731-fold higher in the group with AMH levels ${\geq}1.90ng/mL$ than in the group with AMH levels <1.90 ng/mL (p<0.001). Conclusion: Our study showed that AMH levels were predictive of clinical pregnancy in infertility patients over 40 years of age. Further prospective studies should be conducted to validate the predictive capability of AMH levels for the outcome of clinical pregnancy.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제44권1호
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• pp.33-39
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• 2017

Objective: The aim of this study was to assess the changes of follicular fluid (FF) and serum levels of cerebellin precursor protein 1 (cbln1) and betatrophin in patients with polycystic ovary syndrome (PCOS) undergoing in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection (IVF/ICSI) with a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist protocol. Methods: Twenty infertile women with PCOS and 20 control women diagnosed as poor responders undergoing ovarian stimulation with a GnRH antagonist were included. Blood samples were obtained during ovum pick-up. Follicular fluid from a dominant follicle was collected from the subjects. Using enzyme-linked immunosorbent assays, FF and serum levels of cbln1 and betatrophin were measured in both groups of participants. Metabolic and hormonal parameters were also determined and correlated with each other. Results: Both groups of women had similar serum and FF betatrophin levels ($55.0{\pm}8.9ng/mL$ vs. $53.1{\pm}10.3ng/mL$, p=0.11). The serum and FF betatrophin levels of poor responders were found to be similar ($49.9{\pm}5.9ng/mL$ vs. $48.9{\pm}10.7ng/mL$, p=0.22). Conversely, the FF cbln1 levels of PCOS women were found to be significantly higher than the serum cbln1 levels ($589.1{\pm}147.6ng/L$ vs. $531.7{\pm}74.3ng/L$, p<0.02). The FF cbln1 levels of control participants without PCOS were significantly higher than their serum cbln1 levels ($599.3{\pm}211.5ng/L$ vs. $525.3{\pm}87.0ng/L$, p=0.01). Positive correlations were detected among body mass index, insulin resistance, serum insulin, total testosterone, and betatrophin levels in the PCOS group. Conclusion: Follicular fluid betatrophin and cbln1 concentrations may play a pivotal role on follicular growth in PCOS subjects undergoing IVF/ICSI with an antagonist protocol.