Intra and interspecfic fusants were produced by the protoplast fusion of auxotrophic mutants from Trichoderma koningii ATCC 26113 and Trichoderma reesei QM 9414. It was found that 0.6M $MgSO_4\;and\;0.6M\;NH_4Cl$ was the best osmotic stabilizer for the preparation of protoplasts from the mycelium of T. koningii and T. reesei respectively. However, $MgSO_4$ was the most suitable one for the regeneration of the protoplasts from both species. The intraspecific protoplast fusion frequencies between the auxotrophic mutants from T. reesei were $1.8{\times}10^{-2}\;to\;5.1{\times}10^{-1}$. Interspecific protoplast fusion frequencies between the auxotrophic mutants from T. koningii and T. reesei were $3.6{\times}10^{-3}$\;to\;8.4{\times}10^{-2}. Interspecific complementing fusants, however, were not alwats produced. Fusants obtained from interspecific potoplast fusion were spontaneously segregated into various strains including parental types, non-parental auxotrophic hybrids, and prototrophic hybrids on complete plate. Interspecific hybrids revealed to have partially enhanced celluloytic activities.
In order to develop the protoplast fusion method of the strains of Fusarium, the interspecific protoplast fusion was attempted between Fusarium poae and F. sporotrichioides. Various auxotrophic mutants were isolated by the treatment of N-Methyl-N'-Nitro-N-Nitrosoguanidine. The optimal conditions for the formation and regeneration of protoplasts were examined and the characteristics of a fusant were studied. As a results, protoplasts were readily obtained from 18 hours cultured mycelia by the treatment of driselase for 3 hours and 0.6 M KCl as a best osmotic stabilizer at pH 6.0 for the formation of protoplast. Sucrose was the most suitable for the regeneration. Polyetylene glycol (M.W. 8,000) in $CaCl_{2}$-glycine solution was used to induce the protoplast fusion. The interspecific fusion frequency between protoplasts among the auxotrophic mutants of the two strains ranged from $2.7*10^{-2}$ to $5.7*10^{-3}$ . DNA content and cellulase activity were rather increased in the interspecific fusant. The lag phase of growth curve was slightly elongated in the fusant.
Interspecific hybrids between the ASpergillus spp., A. awamori, A. usamii and A. oryzae, were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from an auxotrophic mutant strain were transferred into the protoplasts of a recipient strain of different species. The frequency of interspecific hybrid formation by nuclear transfer was $2*10^{-5}$$-7*10^{-4}$ In contrast, no interspecific hybrid was isolated by protoplast fusion. Among the hybrids tested, 10 strains showed increased activity of some or all components of cellulases, xylanases and amylase up to more than two times. Isozyme pattern of the hybrids were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis and isoelectric focusing followed by activity staining, which showed that some of the hybrids have isozyme patterns unidentical to either of the two parents. By measuring the DNA contents and the sizes ofthe conidia, the karyotypes of the hybrids were estimated to be aneuploid near to haploid, diploid or triploid. It was concluded that the unclear transfer technique is much more efficient in the formation of interspecific hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of Aspergillus strains.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.18
no.1
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pp.41-48
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2009
The large bumblebee, Bombus terrestris, indigenous to Europe and used extensively for high-value crop pollination, has been artificially introduced in several parts of the world. Here we show the interspecific hybridization between bumblebee species, B. terrestris and B. ignitus, under laboratory conditions. The mating and oviposition percentages of the interspecific hybridization of a B. terrestris queen with a B. ignitus male were higher than those of the intraspecific mating of B. ignitus. Furthermore, the competitive copulation experiment indicated that the mating of B. ignitus males with B. terrestris queens was 1.8-fold more frequent than with B. ignitus queens. The interspecific hybridization of a B. ignitus queen with a B. terrestris male produced either B. ignitus workers or the B. ignitus male phenotype, and the hybridization of a B. terrestris queen with a B. ignitus male produced B. terrestris males. Genetic tests using a portion of the mitochondrial COI gene for the parent and hybrid phenotypes indicated that mitochondrial DNA in the interspecific hybridization was maternally inherited. Our results indicated that interspecific hybridization occurred between B. ignitus and B. terrestris, which suggests that the hybridization will have a negative impact of competition and genetic pollution of native bumblebees.
Palynological characters such as pollen grain polar axis length (PL), pollen equatorial diameter (ED), colpus length, colpus width, and P/E ratio of six species of Quercus subgenus Lepidobalanus Endl. from Korea were studied. A significant interspecific variation, unequal distances between the species, and various degree of intraspecific variations were found. The taxonomic value of the pollen morphology parameters measured was found to vary according to species. These results suggest a possible relationship between parameters measured and ploidy level of the Quercus species studied.
Interspecific hybrid seedlings by artificial crossing of Genus Quercus (Q. serrata, Q. dentata, Q. mongolica var. crispula, Q. aliena) were planted at nursery in Tottori University. Seedlings of hybrids by natural crossing(Q. fabri and $Q.{\times}mccormickii$) were selected and planted at Hiruzen district in Tottori University. Artificial interspecific hybrid $F_1$ and natural hybrid $F_1$ bloomed when they were 4 years old and 3 years old, respectively. The pollen fertility and seed viability were investigated from the bloomed individuals in 2001. The germination percentages of the pollens of artificial interspecific hybrid were more than 84% except one individual, and the extension of pollen tubes was normal. The normal seed percentages of artificial interspecific hybrid were more than 90% similar to parents. Germination percentages of normal seed of natural crossing family were more than 64%, respectively, and selfed offsprings of Q. fabri, and $Q.{\times}mccormickii$ hade high reproductive ability.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.23
no.1
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pp.167-174
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2011
The large bumblebee $Bombus$$terrestris$, indigenous to Europe and adjacent areas and used extensively for high-value crop pollination, has been artificially introduced to several parts of the world. Here we show the occurrence of interspecific hybridization between the bumblebee species $B.$$hypocrita$$sapporoensia$ and $B.$$terrestris$ under laboratory conditions. The mating and oviposition percentages resulting from the interspecific hybridization of a $B.$$terrestris$ queen with a $B.$$h.$$sapporoensis$ male were higher than those resulting from the intraspecific mating of $B.$$h.$$sapporoensis$. Furthermore, a competitive copulation experiment indicated that the mating of $B.$$h.$$sapporoensis$ males with $B.$$terrestris$ queens was 1.2-fold more frequent than the mating of these males with $B.$$h.$$sapporoensis$ queens. The interspecific hybridization of a $B.$$terrestris$ queen with a $B.$$h.$$sapporoensis$ male produced either $B.$$terrestris$ workers or the $B.$$terrestris$ male phenotype, and the hybridization of a $B.$$h.$$sapporoensis$ queen with a $B.$$terrestris$ male produced $B.$$h.$$sapporoensis$ males. Our results indicated that interspecific hybridization occurred between $B.$$h.$$sapporoensis$ and $B.$$terrestris$. These results suggest that such hybridization will have a negative competitive impact and will cause genetic contamination of native bumblebees.
Intraspecific and interspecific protoplast fusions in/between C. thermocellum and C. thermohydrosulfuricum were studied. Protoplast fusions were well induced in 30-40% PEG solution, however, their fusion frequencies were low level of 1.2*10$^{-7}$ for intraspecific fusion of C. thermocellum, $6.7*10^{-7}$ for C. thermohydrosulfuricum, and 4.2*10$^{-7}$ for interspecific fusion between above two Clostridia, respectively. Most fusants were unstable and segregated after 3 subcultures. Relatively stable intraspecific C. thermocellum fusant FTT17, intraspecific C. thermohydrosulfurecum fusant FSS22 and interspecific fusant FTS3, which were stable after several subcultures, were selected and properties of fusants were further investigated, Phenotypes of the fusants were similar with wild types mostly in cellular morphology, carbon source assimilation and enzyme activities. However they were differed in assimilation of pyruvic acid and sorbitol as carbon source. The DNA contents of fusants were slightly increased compared with wild types. Ethanol production by intraspecific and/or interspecific fusants was not increased, however, acetic acid production as byproduct was decreased or not detected, which indicates that industrial thermophilic anaerobes can be improved by means of protoplast fusion of two strains.
Genetic improvement of the cultivated soybean [Glycine max (L.) Merr] may be possible through hybridization with its wild progenitor, G. soja Sieb. & Zucc. Interspecific cross between G. max (Hwangkeumkong) and G. soja (IT.182932) was made in the summer of 1997. In F$_2$ the percentage of plant height, nodes per plant, and pods per plant were high but gradually reduced from F$_2$ to F$_4$. In contrast pod length, seeds per pod, and 100-seeds weight were increased gradually through generations advanced. Wild variation as evident in F$_2$ in plant height, number of branches, pods per plant, and 100-seeds weight. Twenty six percent of the F$_2$, 44 % of the F$_3$ and 60% of the F$_4$ segregants showed more G. max traits. The combination of useful traits from both species is possible through interspecific hybridization. The characters that could be transferred from wild species to cultivated species are more pod number, better capacity, and resistance to disease and insects. The interspecific derivatives offer scope for selection for high grain yield. Therefore, introducing genes from G. soja to G. max could be contribute to greater genetic diversity of future cultivars. And semicultivated soybean had some desired characteristics including tolerance to adverse environments and multi-seed characters. It means the infusing of semicultivated germplasm to the cultivated soybean could increase number of seeds and pods per plant significantly, and consequently could enhance selecting potential on yield.
The effects of simulated acid rain on the growth and interspecific competition of Echinochloa crus-galli and Digitaria sanguinalis were studied. Changes of growth in height and dry weight were examined and competition between the two species was investigated using the experimental model proposed by de Wit (1960). The experiments were carried out in the greenhouse, and test plants were germinated and grown for 4 weeks and then sprayed with simulated acid rain of pH 5.6, 4.2 and 2.8 for another 8 weeks. In de Wit replacement experiments, the variation of density and the treatment of simulated acid rain showed little effect on the interspecific competition between E. Crus-galli and D.sanguinalis. The ratio diagram, another method to reveal the interrelations between two competing species, always showed the predominance of E. crus-galli in competition, regardless of density and pH. The interspecific competition of the two species, represented by relative yield total (RYT), revealed that intraspecific competition was stronger than interspecific competition in both species.The treatment of simulated acid rain showed little effect on the growth of E. Crus-galli and D. sanguinalis. Height growth of both species did not differ from that of control (pH 5.6), but root/shoot ratio increased with the decrease in pH of simulated acid rain. Growth of tatal dry weight of E. crus-galli and D. sanguinalis was not influenced by the change of pH, except that D.sanguinalis showed a decrease in the total dry weight at pH 2.8 along with a visible sign of white spots on leaves. Physical environmental conditions can exert an effect on the interrelationships between the two species, but this experiment did not show the reversion of competition, and showed that E.crus-gilli was competitively dominant under any environmental conditions given in this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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