Interleukin-2 plays a significant role in T cell proliferation. Here, we report the role of IL-2 in angiogenesis. IL-2 increased the ROS level and phosphorylation of Akt in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). IL-2 increased angiogenesis in an animal model and tube formation in HUVECs. The effect of IL-2 on angiogenesis and tube formation was mediated by ROS and Akt. This is the first report that IL-2 promotes angiogenesis.
Jeongshin-tang (JST) is a Korean herbal prescription, which has been successfully applied for the various neuronal diseases. However, it's effect remains unknown in experimental models. To investigate the biological effect of JST in Alzheimer's disease (AD) in vitro model, we analized the production of interleukin (IL)-6 and IL-8, and expression of cyclooxygenase (COX)-2 in IL-1β plus β-amyloid [25-35] fragment (A)-stimulated human astrocytoma cell line U373MG. JST alone had no effect on the cell viability. The production of IL-6 and IL-8 was significantly inhibited by pretreatment with JST (1mg/㎖) on IL-1β plus A-stimulated U373MG cells. Maximal inhibition rate of IL-6 and IL-8 production by JST was about 41.22% (P<0.01) and 34.45% (P<0.05), respectively. The expression level of COX-2 protein was up-regulated by IL-1β plus A but the increased level of COX-2 was inhibited by pretreatment with JST (1 mg/㎖). These data indicate that JST has a regulatory effect on cytokine production and COX-2 expression, which might explain it's beneficial effect in the treatment of AD.
Enterokinase에 의한 G3-IL-2 가수분해 반응에 있어서의 urea 는 글루카곤과 IL-2를 분리하고자 하는 데에 펼요한 절단 부위 가 잘 노출되도록 도움을 주는 역할을 하는데 1.0 M이상의 높 은 농도에서 오히려 원하는 단백질의 변성에 영향을 미침을 알 수 있었다, 그리고 효소 반응 시에 효소의 활성에 도움을 주는 첨가제는 반응 후에 침전이 생기고, IL-2의 회수율에는 오히려 나쁜 영향을 주었다. 그리고 반응시간에 따른 반응의 효과는 24 시간 이후에는 효소에 의한 가수분해 반응이 진행되지 않음이 관찰되었다. 가수분해 반응 후의 순수한 IL-2의 회수율은 약 1 5 5~35% 정도였고, 반응 조건에 따라 수융은 차이가 있었다. IL-2는 시간이 지남에 따라 분자 상호 간의 응집에 의해 oligomer의 형태가 되어 본래의 크기보다 더 커져 RP-HPLC에서 더 빨리 용리되는 결과를 얻을 수 있었다.
Interleukin-2 (IL-2) is a vital cytokine secreted by activated T lymphocytes, and plays an important role in the regulation of cellular functions and immunity of animals. In this study, the recombinant duck IL-2 (rduIL-2) was secretory expressed in Pichia pastoris (P. pastoris). The recombinant P. pastoris strain was cultured in shake flasks and then scaled up in a 5.0-l bioreactor. The result showed that the maximal fresh-cell-weight of 594.1 g/l and the maximal $OD_{600}$ of 408 were achieved in the bioreactor. The rduIL-2 was purified by two steps of purification procedures, and approximately 311 mg of rduIL-2/L fermentation supernatant was obtained. SDS-PAGE showed that the purified rduIL-2 constituted a homogeneous band of ~16 kDa or ~14 kDa corresponding to the glycosylated or non-glycosylated duIL-2 protein in size, respectively. The bioactivity of rduIL-2 was determined by lymphocyte proliferation assay. The result indicated that the rduIL-2 greatly promoted the proliferation of ConA-stimulated lymphocytes in vitro. The P. pastoris expression system described here could provide promising, inexpensive, and large-scale production of the rduIL-2, which lays the foundation for development of novel immunoadjuvants to enhance both the immunity of ducks against various infectious pathogens and vaccine efficacy.
In the present study, effects of interleukin-2 (IL-2), a differentiator and proliferator of T-cells, on nuclear maturation and sperm penetration of bovine oocytes was examined in a serum-free or serum-containing medium. Basic medium was used TCM-199 supplemented with 2.2g / ι sodium bicarbonate, 100 i.u. /rnl penicillin. 100$\mu$g /ml streptomycin, 0.25$\mu$g/ml Fungizone, this medium treated with FCS and IL-2. In experiment 1, we examined the effect of the addition of 0, 1, 5, 10 or 15nM /ml IL-2 to tissue culture medium (TCM-199) on nuclear maturation of oocytes Development of oocytes to the Metaphase II (M II) stage (%) was significantly (P<0.05) higher at 1, 5,10 and 15 nM /ml IL-2(54.2, 73.5, 80.0 and 69.6%, respectively) than at 0 nM /ml IL-2(35.7%). In experiment 2, we examined the effect of the addition of l0nM /ml IL-2 or 5% FCS in oocyte maturation. Nuclear maturation rates were significantly(P<0.05) higher l0nM /ml IL-2(80%) than non-treatment(35.7%) and 5% FCS(63.6%) treatment. On the other hand, there were no significant difference in the proportion of oocytes developed to the 2-cell stage after addition of IL-2 and/or FCS. These results suggest that IL-2 supports nuclear maturation of bovine immature oocytes in vitro. Serum-free maturation system using IL-2 might be useful for evaluation of various factors on oocyte maturation.
연구배경 : Cytokine은 주요한 염증 매개 물질로서 질환에 따라 다른 양상을 보일 수 있어, 흉수를 일으키는 다양한 원인 질환의 감별에 이용되어 왔다. 이 중에서 악성 흉수, 결핵성 흉수, 부폐렴 삼출액 및 농흉에서 INF-${\gamma}$, IL-2R, IL-6, IL-1를 동사에 측정하여 비교한 연구는 많지 않아 본 연구를 시행하게 되었다. 방법 : 흉수를 주소로 내원한 환자 중에서 흉수 천자로 삼출액이 확인된 환자들을 대상으로 흉수를 채취하여, ELISA kit를 이용하여 INF-${\gamma}$, IL-2R, IL-6, IL-10 농도를 측정하였다. 결과 : 악성 흉수, 결핵성 흉수, 부폐렴 삼출액 및 농흉에서 흉수 내의 cytokine의 순서대로, INF-${\gamma}$는 $16.7{\pm}50$, $295.5{\pm}585.5$, $10.0{\pm}0$ pg/ml, IL-2R은 $3247.4{\pm}1713.3$, $7423.5{\pm}3752.8$, $3790.2{\pm}3201.1$ pg/ml, IL-6는 $600{\pm}12.8$, $556.4{\pm}161.7$, $514.4{\pm}224.8$ pg/ml, IL-10은 $28.2{\pm}55.5$, $11.3{\pm}11.7$, $98.4{\pm}141.7$ pg/ml로 각각 측정되어, 결핵성 흉수가 다른 원인의 흉수에 비해 IL-2R 농도가 의 있게 높았으며, IFN-${\gamma}$ 농도도 높은 경향을 나타내었으며, 부폐렴 삼출액에서는 IL-10농도가 다른 원인의 흉수에 비해 의미있게 높았다. 결론 : 결론적으로 흉수 내의 IL-2R농도 측정은 결핵성 흉수와 다른 원인의 흉수를 감별하는데 어느 정도 도움이 될 것으로 사료되며, IL-10 측정은 부폐렴 삼출액과 다른 원인의 흉수를 감별하는데 어느 정도 도움을 줄 것으로 생각된다.
Objective: To observe the influence of propofol, isoflurane and enflurance on interleukin-8 (IL-8) and IL-10 levels in cancer patients. Methods: Ninety cancer patients with selective operation from March 2011 to May 2014 were randomly divided into group A (34 cases), group B (28 cases) and group C (28 cases). Intramuscular injections of scopine hydrochloride and phenobarbital sodium were routinely conducted to 3 groups. After general anesthesia was induced, tracheal intubations were given. During the maintenance of anesthesia, 0.5~1.0 mg/kg propofol was intravenously injected to group A discontinuously, while continuous suctions of isoflurane and enflurance were subsequently performed to group B and C correspondingly. Clinical outcomes, postoperative complications as well as serum IL-8 and IL-10 levels before operation (T0), at the time of skin incision (T1), 3 h after the beginning of the operation (T2) and 24 h (T3) and 72 h (T4) after the operation were observed among 3 groups. Results: Operations in all groups were successfully completed. The rates of surgery associated complications were 8.82% (3/34), 7.14% (2/28) and 7.14% (2/28) in group A, B and C, respectively, and there were no significant differences (P>0.05). Serum IL-8 and IL-10 levels increased gradually from the beginning of the operation and reached the peak at T3, and were evidently higher at each time point than at T0 (P<0.01). At T1, serum IL-8 and IL-10 levels had no significant differences among 3 groups (P>0.05), but the differences were significant at T2, T3 and T4 (P<0.05). Moreover, correlation analysis suggested that serum IL-8 level was in positive relation with IL-10 level (r=0.952, P<0.01). Conclusions: Propofol, which is better in inhibiting serum IL-8 secretion and improving IL-10 secretion than isoflurane and enflurance, can be regarded as a preferable anesthetic agent in inhibiting traumatic inflammatory responses.
The partitioning of recombinant human interleukin-2(rhII-2) in PEG 8000-dextran 38800 aqueous two-phase system has been investigated using three different sources of rhIL-2. In the case of pure rhIL-2, the solubility in a PEG-dextran two-phase system was low and most of rhIL-2 was partitioned into the bottom phase. For the recovery of rhIL-2 from insoluble protein aggregates, the inclusion bodies of recombinant E. coli were solubilized by the treatment with sodium dodecyl sulfate (SDS). The addition of SDS significantly enhanced not only the solubility of rhIL-2 but also the partitioning of rhIL-2 to the top phase. When the ratio of SDS to rhIL-2 was 2.0, the partition coefficient(K) and the recovery yield(Y) at the top phase were 4.5 and 88%, respectively, at pH 6.8. In order to reduce the recovery steps further, SDS was directly added to the intact recombinant E. coli cells and then partitioned into the PEG/dextran aqueous two-phase system. The observed partition coefficient ($K{\cong{3.0$) and recovery yield ($Y{\geq}80%$ )of this method were comparable to the rhIL-2 recovery from insoluble protein aggregates. The results obtained in this work indicate that PEG-dextran two-phase partitioning might provide a simple way for the recovery and partial purification of recombinant proteins which are produced as inclusion bodies.
각질형성세포주인 HaCaT세포에서 Lipopolysaccharide (LPS)로 유도하는 염증반응에는 tumor neurosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-1${\alpha}$ (IL-1${\alpha}$), interleukin-6 (IL-6), 및 interleukin-8 (IL-8)와 같은 염증 유발 사이토카인(pro-inflammatory cytokines)이 증가되고, 또한 염증반응을 매개하는 inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2) 및 prostaglandins E2 (PGE2)도 증가된다. 본 연구에서는 이렇게 유도된 염증 반응에서 효과적으로 염증 관련인자를 조절할 수 있는 천연물을 발굴하고자 하였다. 그 결과, 마가목, 쐐기풀, 죽여 및 오배자 혼합 추출물이 IL-1${\alpha}$, TNF-${\alpha}$, IL-6 및 IL-8의 발현을 억제하고 COX-2, iNOS 및 PGE2의 발현도 억제함을 확인하였다. 아울러 IQ chamber$^{(R)}$을 이용하여 피부에 첩포할 때 sodium lauryl sulfate (SLS)로 유발한 피부자극에서 이들 혼합물이 효과적으로 그 자극을 억제함을 확인하였다. 따라서 본 연구 결과로부터 마가목, 쐐기풀, 죽여 및 오배자의 혼합물이 피부자극완화용 화장품 소재로서 민감성 피부 등을 위한 제품에 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.
Recombinant inteileukin-2 (IL-2) is a potent inductive stimulus for nitric oxide synthesis (NO.) and has been demonstrated as an antineoplastic agent in mice and human. But it is not let clear whether NO. can contribute to IL-2-induced therapeutic responses. Therefore, the current experiment was undertaken to clarify the effect of IL-2 on antitumor response against subcutaneous Meth-A tumor in mice. At the beginning of each experiment, normal BALB/c mice were injected subcuta-neously with $5{\times}10^6 Meth-A$ tumor cells. Some mice were implanted with osmotic minipumps con- taining 225 $\mu$l of 3.38 M $N^{\gamma}$ -monomethyl-L-arginine (MLA. an NOS inhibitor). Beginning on day 7, experimental groups were treated with a f-day course of IL-2 (50,000 lU,75,000 nJ,100,0007, 50,000 IU+MLA, 75,000 IU+MLA, 100,000 IU+MLA intraperitoneal injection every 12 hours for 5 days). The result of this experiment revealed that Meth-A tumor grew progressively in control mice. Intraperitoneal IL-2 treatment decreased tumor growth and prolonged survival. compared with con-trol mice. But no significant differences among 50.000 lU.75.000 lU and 100,000 lU of 7-2 treat-ment were observed. MLA administration prevented partially the decrease tumor growth and prolong survival of IL-2 treated mice compared with mice receiving IL-2 alone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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