• 한국동물학회지
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• 제38권2호
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• pp.294-298
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• 1995

The genetic polymorphism of Protease inhibitor (Pl) in Korean population was investigated by using isoelectric focusing (IEF) in an ultra-narrow pH range,4.2-4.9, and immunoblottins. Three common alleles (Pl * Ml, Pl*2, Pl * M3) were observed and the frequencies for the alleles were Pl * M1=0.7843, Pl * M2=0.1613, Pl * M3=0.0323. In addition to the three common alleles, rare alleles (Pl *5, Pl * Z, Pl* H were detected at low-level frequency. Two unknovlm variants, which were not reported on previous studies in Korean population, were also found.

• Tribology and Lubricants
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• 제16권1호
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• pp.22-26
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• 2000

In this paper, the fuction of Zinc-dialkyldithiophosphate (ZnDTP) as an oxidation ingibitor of mineral oils was investigated and compared with 2,6-Di-tert-Butyl-4-Methylphenol (DBMP). Oxidation tests were conducted using an oxygen absorption apparatus. ZnDTP showedanti-oxidation property, and length of induction period prolonged by increasing ZnDTP concentration. The anti-oxidation property of ZnDTP was simmilar to that with DBMP. The amount of hydroperoxide decomposition ability with ZnDTP was much greater than that with DBMP, But the rate constant of radical scavenging with ZnDTP was less than that with DBMP. The anti-oxidation property of ZnDTP seems to by both synergy effect of hydroperoxide decomposition ability and radical scavenging ability.

• Journal of Microbiology
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• 제33권2호
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• pp.103-108
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• 1995

Streptomyces fradiae protease inhibitor (SFI) was purified effectively by preparative isoelectric focusing and hydroxyapatite chromatography. The molecular weight of SFI was estimated to be 1.7 kDa by SDS-PAGE and 1.8 kDa by molecular sieving HPLC. One hundred and sixty amino acid residues were determined from which molecular weight of SFI was calculated to be 17.054 Da and carbohydrate residue was not detected. SFI was calculated to be 17,064 Da and carbohydrate residue was not detected. SFI was a monomeric protein with two reactive sits, of which isoelectric point was pH 4.1. N-terminal amino acid sequence of SFI had homology with SSI (Streptomyces subsilisin inhibitor) and other protease inhibitors produced by Streptomyces.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.316.2-316.2
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• 2002

Manassantin B classified into dineolignans have been isolated from Saururus chinensis Manassantin B was found to induce apoptosis in human promyelocytic leukaemia HL -60 cells with characteristic apoptotic features like increase of nucleosomalladder. apoptotic body ormation. flipping of membrane phosphatidylserine. Manassantin B induced FAS and FAS ligand expression, and activated caspase 8 which cleaved bid to tbid in cytosol. The release of cytochrome c to sytosol was accompanied with decrease of bcl-2 protein and incresase of tbid and bax protein in mitochondria. Released xytochrome c activated caspase 9 and-3. but these effects were completely attenuated by the treatment of broad caspses ingibitor. Z-VAD fmk. These results indicate that manassatin B induce apoptosis through upregulation of FAS. caspase family and mitochondria-related proteins.

• 한국동물학회지
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• 제33권1호
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• pp.119-125
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• 1990

Trypsin을 비롯한 여러 serine protease를 저해하는 단백질을 계골격근으로부터 여러 chromatography 방법을 이용하여 순수하게 분리하였다. 이 저해제의 분자량은 젤 여과법을 이용하여 측정한 결과 66,000 달톤이었으며 sodium dodecyl sulfate 존지하에서 전기영동하였을 때 66,000과 64,000 달톤의 두 단백질로서 나타났다. 이 중 64,000 달톤의 단백질은 순수분리과정 혹은 생체 내에서 일어난 부분 절제현상에 기인한 66,000 달톤 단백질의 부산물인 것으로 사료된다. 이 저해제는 약 7.4의 등전점을 가진 당 단백질임을 알 수 있었으며, 다량의 cysteine잔기를 포함하고 있다.

• 미생물학회지
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• 제30권5호
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• pp.410-414
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• 1992

난분해계 물질을 분해할 수 있는 균주 개발에 유용한 클로닝백터를 개발하기 위하여, Pseudomonas putida 로부터 유래한 R 플라스미드 pKU10 을 HindIII 로부터 부분소화하여 약 8.5 kb 의 새로운 플라스미드 pKU11 을 조립하고, 여러 숙주세포에서의 안정성 및 catechol 2, 3-dioxygenase 유전자의 클로닝 을 통해 난분해계 유전자클로닝 백터로의 유용성을 조사하였다. pKU11 은 높은 농도의 ampicilin 과 tetracyclin 에 대해서 내성을 나타내었고, P. putida TN1307 에 도입되었을 때 수세대 동안 안정되게 발현되었지만, Pseudomonas 이외의 숙주세포로서 E. coli 와 Achromobacter gr. D. V. 에 도입되었을 낮은 형질전환빈도와 불안정성을 나타내었다. pKU11 의 copy 수는 8 개로 조사되었고, pKU11 에 xylene 분해에 관련된 catechol 2, 3-dioxygenase 유전자를 클로닝 하였을 때 P. putida TN 1307 에서 잘 발현하였다. 따라서 pkU11 은 난 분해계 유전자를 클로닝하는에 Pseudomonas 에서 유용한 벡터로서 쓰일 수 있을 것으로 사료된다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제40권4호
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• pp.352-356
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• 1997

식물배양세포계에서 유용 phytoalexin의 생산여부를 검토하기 위하여 페튜니아 배양세포주에 5종의 naphthoquinone류 화합물을 첨가하였을 때 유도되는 항미생물활성을 조사하였다. 처리한 naphthoquinone류 화합물 중 토양 방선균으로부터 페튜니아 세포생장억제물질로 분리한 2,5,7-trihydroxy-3-(5'-hydroxyhexyl)-1,4-naphthoquinone (3-OH NQ)이 48시간 이내에 90% 이상 효율적으로 배양세포내로 흡수되었다. 3-OH NQ를 처리한 페튜니아 캘러스 추출물은 Aspergillus candidus의 포자발아를 강하게 억제하였다$(MIC:\;32\;{\mu}g/ml)$. 3-OH NQ를 처리한 페튜니아 배양세포로부터 2종의 항미생물 활성물질 4,2',4',${\beta}$-tetrahydroxychalcone과 4',7-dihydroxyflavone을 분리하였다. 주로 유도되는 phytoalexin인 4,2',4',${\beta}$-tetrahydroxychalcone은 A. candidus의 포자발아를 강하게 억제하였다$(MIC:\;16\;{\mu}g/ml)$.

• 생명과학회지
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• 제7권3호
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• pp.228-233
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• 1997

Artemia franciscana의 cyst에서 protease를 정제하가 위해 세포를 파쇄하여 원심 분리한 후 상등액을 회수하였다. 그상등액에서 40-60% 황산암모늄을 첨가하여 침전시켜서 염을 제가한 후, Sphadex G-200 및 DEAE-Sephadex A-50 column chromatography를 하여 정제한 후 본 효소의 특성을 조사한바 그 특성은 아래와 같았다. 정제 과정을 거치는 동안, 비활성은 13.64배 증가하였고, 수율은 7%였다. 그리고 이효소는 pH 6에서는 안정하였으나, pH 8이상에서는 대부분의 활성이 실활 되었고, 최적 pH는 3.0이었다. 따라서 이 효소는 전형적인 산성 pro-tease로 판정되었다. 본 효소는 60$^{\circ}$C이상의 온도에서 대부분 실활 되었고, 최적 활성 반응 온도는 35$^{\circ}$C였다. 금속 이온의 영향을 알아본 결과, $Cu^{++}$, Z$Zn^{++}$, $Fe^{++}$가 효소의 활성을 저해하였고, 중금속 chelator인 EDTA는 반대로 효소 활성을 증가시켰다. 단백질분해효소에 특이적인저해제를 첨가하여 실험한 결과 thiol protease ingibitor인 antipain, chymostatin, leupeptin, E-64, iodoacetate등에 효과적으로 효소활성이 저해받으므로 본 효소는 acid thiol protease라 판정했다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제2권1호
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• pp.9-20
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• 1998

Phospholipase C (PLC)는 다양한 세포주에서 세포내 신호전달에 중요한 역할을 한다고 알려져 있으나, 생쥐 난자성숙 과정과 착성전 배아발생 과정에서 PLC의 역할과 발현은 아직 연구된 바 없다. 본 연구에서는 난자성숙과 착상전 배아발생 과정에서 생쥐의 PLC \beta 1과 \gamma 1의 유전자 발현을 조사하기 위하여 한 개의 난자 혹은 배아에서 추출된 total RNA를 사용하여 경쟁적 RT-PCR 방법으로 mRNA를 정량하였다. PLC \gamma 1의 유전자 발현을 조사하기 위하여 한 개의 난자 혹은 배아에서 추출된 total RNA를 사용하여 경쟁적 RT-PCR 방법으로 mRNA를 정량하였다. PLC \gamma 1의 유전자는 전혀 발현하지 않았다. 수정후 PLC \betta 1과 \gamma 1의 유전자 발현은 상실기 배아에서 증가하기 시작하여 포배기 배아에서는 현저히 증가하였다. 난자성숙과 착상전 배아발생 과정에서 protein kinase C(PKC) 신호전달체게에 의한 PLC의 역할을 조사하기 위하여 PKC의 억제제인 sphingosin, PKC의 촉진제인 $diC_{8}$, 그리고 PLC의 억제제인 U73122의 효과를 조사하였다. Spihingosine은 처리후 1시간 이내에 대조군에 비해 20% 정도의 난자성숙을 촉지하였으나 U73122는 유효한 효과를 보이지 않았다. U73122는 상실기 배아의 compaction을 억제하였으나 $diC_{8}$에 의하여 부분적으로 극복되었다. 이상의 결과는 PLC \beta 1과 \gamma 1 유전자가 생쥐의 착상전 발생단계에서 특이젖으로 발현하고 있으며, 난자성숙과 착상전 초기배아에서 PKC-PLC 신호전달체계가 관여하고 있으리라 사료된다.