This study was conducted to investigate the effects of preincubation time, concentration and exposure time of sperm on in vitro fertilization of porcine follicular oocytes rnatured in in vitro. The results obtained are as follows ; 1. Effect of preincuhation time for porcine sperm capacitation on in vitro fertilization in medium with heparin was investigated. Normal fertilization rate was highest in 15 min(26.4%). However, there were no significant differences among preincuhation times of 5~90 min, 2. Normal fertilization rates of sperm concentrations were 17.0~26.5%, and normal fertilization rate from l$\times$ l05cell /ml concentration was also higher than those of other sperm concentration. 3. Normal fertilization rates of sperm exposure time of 4, 8, 12, 16 and 20 hours were 6.1, 20.8, 27.8, 25.0 and 26.7%, respectively. Normal fertilization rate from sperm exposure time of 12 hours was also higher than that of other sperm exposure times.
Objectives: To report the efficacy of traditional Korean medicine to an infertile patient who repeatedly failed in vitro fertilization. Methods: The patient was diagnosed with adenomyosis and failed in vitro fertilization 9 times. Her dysmenorrhea and physical symptoms were improved through traditional Korean medicine and she was pregnant with the 10th attempt of in vitro fertilization. She had bleeding during pregnancy due to adenomyosis and took herbal medicines to maintain stable condition. Results: During the treatment period, the uterine thickness due to adenomyosis was reduced and her dysmenorrhea was improved. She was pregnant by in vitro fertilization and gave birth to a healthy child by Caesarean section. Conclusions: This case report shows that traditional Korean medical treatments work to improve the success rate of in vitro fertilization.
The in-vitro fertilization in human clinic and animal reproduction is a very important technique but the rate of success is still low. When the in-vitro fertilization and culture of gametes or embryos were done under the condition which Hema hydrogel chamber were implanted into the peritoneal cavity of mouse, the in-vitro fertilization and development of embryos could be significantly improved and the cell-block under in-vitro culture could be overcome. Also, the Rema hydrogel chamber was very useful for the protection of isolated blastomeres. It is concluded that the polymerized Hema (pHema) hydrogel chamber may be effectively used in the fields of embryo transfer and in vitro fertilization.
In vitro embryo production (IVP) is affected by various factors during in vitro maturation, fertilization, and development. In this experiment, the effect of ovary type, quality of follicular oocyte, medium used for fertilization, presence of hormone in medium, sperm concentration on in vitro maturation and fertilization were examined for effective IVP. In vitro maturation was carried out using TCM-199 supplemented with 15% FCS and hormones in 5% $CO_2$ incubator for 24h. In vitro fertilization was performed with frozen-thawed sperm in modified mTALP medium containing 0.3% BSA, $10{\mu}g/ml$ heparin, and 5mM/ml caffeine for 24h. The fertilized embryos were co-cultured on monolayer of cumulus cells in TCM-199. When oocytes were collected from functionally active and inactive ovaries, maturation rate was 76.9 and 7.7%, respectively. When oocytes were classified morphologically to good and poor grades, maturation rate was 75 and 58.8%, respectively. FSH + LH + $E_2$ (86.4%) showed higher maturation rate than control (53.0%) and FSH (73%). The fertilization rate was 28.2, 100 and 91.7% in $1.6{\times}10^5$, $5.0{\times}10^5$ and $10.0{\times}10^5$ sperm concentration per ml. When oocytes were fertilized in mTALP and BO media, fertilization and cleavage rates of oocytes in mTALP were higher (84.3 and 56.9%) than those (67.4 and 23.3%) in BO medium. In this experiment, in vitro maturation, fertilization and development of oocytes were affected by type of ovary, grade of oocyte, hormones, sperm concentration and fertilization medium.
These studies were conducted to investigate the effects of culture temperature and time on the in vitro maturation and semen type and media on the in vitro fertilization of bovine follicular oocytes, and to asses in vitro fertilization rate of oocytes cultured by extraffollicular method following fertilization in vitro, or transfer into the pseudopregnant rabbit oviduct or uterus. The bovine oocytes recovered from follicles were cultrued for 18 hrs or 72hrs at 38$^{\circ}C$ with 5% CO2 in moist air. Flesh-diluted(2 folds) and frozen-thawed semen in 0.5ml straw from a fertile bull were used. In order to obtain capacitation of spermatozoa were treated with bovine follicular fluids(BFF) and Inophore A(IA). The results obtained were summarized as follows: 1. The oocytes were classified as "A, B, C, D and Degenerative" depending morphological integrity and those were 62.0%, 12.0%, 17.2%, 5.9% and 3.0% of the total oocytes harvested, respectively. 2. The oocytes matured to metaphase II were significantly increased between 24-48hrs of incubation and at 37-39$^{\circ}C$ with 5% CO2 in moist air. 3. The in vitro fertilization rate following transferred into rabbit oviduct or uterus with bull semen and in vitro matured oocytes were higher ligation than non-ligation of oviduct or uterus. 4. The in vitro fertilization rate of oocytes matured in vitro were higher neat than frozen semen and treatment of IA than BFF on the capacitation of spermatozoa. 5. The effects of semen types and media on in vitro fertilization of oocytes matured in vitro were higher fertilization rate of neat than friozen semen, and media was not significant.
Successful techniques of in vitro fertilization(IVF) are valuable for studying the process of fertilization and for developing economical procedures for gene and nuclear transfer in farm animals. To date, bovine IVF system has been developed with oocytes in vitro or vitro, but the resulting zygotes exhibit limited embryonic development after in vitro culture. Even though in vitro matured oocytes achieved high fertilization and cleavage rates, these embryos appear extremly low rate of pregnancies when transferred to synchronized recipients. Development of early bovine embryos in vitro is generally arrested at the 8-to 16-cell stage. However, recent use of somatic cells such as trophoblastic vesicle, granulosa and oviduct epithelial cell for co-culture with early bovine embryos has proven effective for development of embryos, matured and fertilized in vitro, past the in vitro cell blocks. These factors clearly indicate the value of the co-culture system in promoting development of bovine oocytes matured and fertilized in vitro to morula or blastocyst stage in vitro. In addition, co-culture system may beome a tool for evaluation of viability of ova that have been manipulated by procedures such as splitting, microinjection and nuclear transfer.
These experiments were undertaken as a basic study to develop immunocontraceptive vaccine and to understand the role of zona pellucidae in early fertilization process by investigating the effect of monoclonal and polyclonal antibody to porcine zona pellucidae and polyclonal antibody to mouse zona pellucidae on the fertilization of porcine and mouse eggs in vitro. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. Treatment of porcine and mouse eggs with undiluted anti-zona serum produced intense precipitation layer on the poricne and mouse zonae, respectively, thus resulting in the total inhibition of sperm adherence on surface of zona. 2. In vitro fertilization of eggs pre-treated with 0.3∼10% of various antibodies was examined, and resulting in that 5 and 10% of rabbit polyclonal antibodies to porcine zona inhibited completely both in vitro fertilization and polyspermy of porcine eggs while monoclonal to porcine zona and rabbit polyclonal antibody to mouse zona did not inhibit in vitro fertilization but monoclonal antibody reduced the rate of polyspermy compared to that of control group. Almost the same results were obtained in the study on the effect of anti-zona serum on in vitro fertilization of mouse eggs.
This study was carried out to investigate on the improvement of fertilizing ability of in vitro matured oocytes from sperm density, motility and polyvinylpyrrolidine (PVP) concentration, by intracytoplasmic sperm injection(ICSI) into the bovine oocytes. 1. The in vitro fertilization and cleavage rates of oocytes from 1.0, 2.0, 3.0, 5.0 ($\times$106/ml) sperm concentration by IVF and ICSI of bovine oocytes were 45.0%~65.0%, 65.0%~90.0% and 10.0%~30.0%, 35.0%~70.0%, respectively. 2. The in vitro fertilization and cleavage rates of oocytes from 20, 40, 60, 80% of sperm motility by IVF and ICSI of bovine oocytes were 47.8%~75.0%, 78.3%~90.0% and 8.7%~25.0%, 34.8%~70.0%, respectively. 3. The in vitro fertilization and cleavage rates of oocytes from 0.01, 0.02, 0.03, 0.05% of PVP concentration by microinjection of single into the bovine oocytes were 72.7%, 90.9%, 83.3%, 76.9% and 45.5%, 72.7%, 58.3%, 61.5%, respectively and these values of 0.02% addition of PVP were higher than other concentrations of PVP. 4. The in vitro fertilization and developmental rates of oocytes by IVF and ICSI methods were 63.3%~64.6%, 26.7%~29.2% and 88.2%, 47.1%, respectively. This ICSI method was improved high fertilization rates of bovined oocytes.
Objective: The aim of this study was to compare the effects of conventional insemination (in vitro fertilization [IVF]) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) on the fertilization, developmental competence, implantation potential, and clinical pregnancy rate of embryos derived from in vitro matured oocytes of patients with polycystic ovary syndrome (PCOS). Methods: A prospective study was carried out among 38 PCOS patients who had undergone In vitro maturation (IVM) treatment. In total, 828 immature oocytes were collected from 42 cycles and randomly assigned for insemination by IVF (416 oocytes) or ICSI (412 oocytes). After fertilization, the embryos were cultured until the blastocyst stage and single embryos were transferred after endometrial preparation and under ultrasound guidance. Results: No significant differences were found in the maturation rate (78.1% vs. 72.6% for IVF and ICSI insemination, respectively; p= 0.076), fertilization rate (59.4% vs. 66.9% for IVF and ICSI insemination, respectively; p= 0.063), or the formation of good-quality blastocysts (40.9% vs. 46.5% for IVF and ICSI insemination, respectively; p= 0.314). Implantation and clinical pregnancy also did not show significant differences. Conclusion: There was a comparable yield of in vitro matured oocytes derived from PCOS patients in terms of fertilization, blastocyst formation, implantation rate, and clinical pregnancy between IVF and ICSI insemination. These findings provide valuable insights for choosing assisted reproductive treatment in women with PCOS, as IVM offers promising outcomes and is less invasive and less costly.
While the technique of In Vitro Fertilization and Embryo Transfer has been proven undoutedly, it is for from reaching a consensus on the legal implication. Legal authority regarding clinical therapeutic In Vitro Fertilization and Embryo Transfer is, for all practical purpose, nonexistant. In this paper, it is discussed existing regulation dealing with In Vitro Fertilization and Embryo Transfer and related areas i.e. the regulation related medical technologies, the use of donor sperm, donor eggs, surrogate uteri, multiple pregnancy, miscarriages, extra embryos, the technique of cryopreservation. The legality of embryo donation, the responsibility for embryo preservation or destruction and the legal status of the embryos are surveyed. Finally the various legal theories that may give rise to physician liability in connection with clinical In Vitro Fertilization are also reviewed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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