• 제목/요약/키워드: Immunodiffusion

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Immunoblotting 에 의한 Aspergillus fumigatus 균주(菌株)의 항원분석(抗原分析)과 이 균(菌)에 감염(感染)된 환자의 항체반응(抗體反應)에 관한 연구 (Analysis of Culture Filtrate Antigens of Aspergillus fumigatus Strains and of Antibody Responce in Patients with Aspergillosis by Immunoblotting)

  • 김상재;김신옥;홍영표
    • 한국균학회지
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    • 제17권2호
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    • pp.66-75
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    • 1989
  • 임상가검물(臨床可檢物)로부터 분리(分離)된 Aspergillus fumigatus 균주(菌株)의 항원조성(抗原造成)과 이균에 감염(感染)된 환자의 항체반응(抗體反應)의 다양성을 Immunoblotting으로 관찰하였다. SDS-PAGE와 immunoblots상에 나타난 결과를 보면 비교분석된 배양려액항원(培養慮液抗原)의 조성에 있어서 균주간(菌株間)에 정성(定性) 및 정량적(定量的) 차이가 있음을 알수 있었다. 혈청학적(血淸學的) 반응력(反應力)과 특이성(特異性)이 비교적 높은 항원성분(抗原成分)을 동정(同定)하기 위해 그러한 항원들이 비교적 많이 함유된 AFG7을 선택하였다. 전기영동(電氣泳動)으로 분리하여 nitrocellulose paper로 전이흡착(轉移吸着)시켜 A. fumigatus나 기타 진균항원(眞菌抗原)에 양성침강항체(陽性沈降抗體)(면역확산시험(免疫擴散試驗)에서)를 가진 혈청과 반응시킨 결과 적어도 36개의 항원성분이 검출되었다. 그러나 혈청학적 진단가치가 있는 항원성분은 4개 정도에 불과했다. 특이성과 반응력이 가장 높아 표준항원(標準抗原)에 반드시 함유되어야 할 것으로 보는 항원성분은 분자량(分子量)이 82 KD 정도되는 항원이었고 그 외에 11 KD, 26 KD, 30 KD 및 31 KD 등도 우수한 항원성분으로서 앞으로 더 연구검토되어야 할 것으로 본다. 반응력이 큰 항원이면 Coomassie청(靑)에는 흐리게 염색되어도 immunoblots상에는 짙게 염색되는데 비해 반응력이 약한 항원은 그와 반대현상을 나타내어 immunoblotting 분석법이 항원의 반응력과 특이성 관찰에 매우 유용함을 알 수 있다. 많은 항원성분이 균종특이(菌種特異) 항원결정기(抗原決定基)와 함께 광범한 균군(菌群)에 분포하는 항원결정기(抗原決定基)도 가지고 있었다.

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국내분리 Aujeszky's disease virus의 실험적 감염 자돈에 대한 바이러스학적 연구 (Experimental infection of piglets with a field isolate of Aujeszky's disease virus in Korea: Pathogenecity, excretion, distribution and immunogenicity of virus)

  • 박정우;전무형;안수환
    • 대한수의학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.177-186
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    • 1990
  • To investigate the etiology, pathogenicity and virological properties of NYJ-1-87 strain of Aujeszky's disease virus (ADV) that was isolated from the diseased piglet in Korea, the virus at $10^{6.0}TCID_{50}/0.1ml$ was inoculated intranasally and subcutaneously into 30 to 35 days-old piglets. Results obtained through the experiments were summarized as follows. 1. Ten of the infected piglets were clinically observed for 15 days. On the 2nd day post-inoculation(pi), the signs of pyrexia, anorexia and convulsion were noted. On the 4th to 7th days pi, nervous signs of incoordination and intermittent spasm were shown in the most of piglets, and one out of 5 piglets infected intranasally was died with severe nervous signs at the 7th day pi. The signs became relieved on the 8th day pi and all of remainder were completely recovered on the 13th to 14th days pi. 2. In hematological study, prominent decrease in the number of total leukocyte and lymphocyte was shown in the ADV-infected piglets on the 6th day pi. On the 8th day pi, the cell numbers were slightly increased and returned to normal level on the 10th day pi. 3. Viral excretion of the ADV-inoculated piglets was examined by swabbing of nasal and oral cavities, and rectal feces. During the periods of the 3rd to 11th days pi, the virus was excreted intermittently from nasal and oral cavities, and rectal feces. The nasal excretions were shown the highest virus concentration of $10^{5.2}TCID_{50}/0.1ml$ at the 5th day pi. 4. Recovery of the inoculated virus from various organs of the piglets that were died or experimentally slaughtered was attempted, and the virus was isolated from the tissues of brain and tonsil by the cultured cell-inoculation method. The highest recovery rate was noted in the tonsil. By indirect immunofluorescence antibody assay using ADV-monoclonal antibody, the viral antigens were detected in tissues of spleen and liver as well as brain and tonsil on the 7th to 9th days pi. The virus was not isolated from blood and the tissues of lung and kidney throughout the experiments. 5. Titers of virus neutralizing antibody in the piglets experimentally infected with ADV became increased after the 6th to 9th days pi in both of intranasal and subcutaneous inoculation showing the highest titers of 64 to 128 on the 29th day pi. When the antibody levels were measured by radial immunodiffusion enzyme assay, the reactive diameter was enlarged to be positive after the 4th to 6th days pi in both of intranasal and subcutaneous inoculation showing the largest diameter of 13 to 14mm on the 29th day pi.

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한국인 급성진행성 및 성인성 치주염의 원인균인 Bacteroides gingivalis에 대한 미생물 및 면역학적 연구 (Microbiological and Immunological Investigation on the Bacteroides gingivalis in Rapidly Progressive and Adult Periodontitis in Korean)

  • 정종평;이종흔;정현주
    • 대한미생물학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.309-321
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    • 1987
  • For the investigation of microbiological and immunological specificity of Bacteroides gingivalis, Bacteroides gingivalis were isolated, enumerated and characterized from 13 Korean rapidly progressive periodontitis and 7 healthy control by anaerobic culture technique. The total proportion of black-pigmented Bacteroides from Korean R.P.P. patients and healthy control were 8.78% and 0.92%, respectively, among total isolated black-pigmented Bacteroides. In antibiotic susceptibility test, Bacteroides gingivalis isolated from R.P.P. patients were sensitive to Ampicillin and Tetracycline, and resistant to Gentamicin and Erythromycin in disc diffusion method. In antibiotic broth dilution method, the minimum inhibitory concentration(MIC) to Bacteroides gingivalis was 2 unit/ml of Penicillin and $0.25{\sim}1{\mu}g/ml$ of Tetracycline, respectively. The concentration of serum IgG in rapidly progressive periodontitis patients were sigificantly higher than that of healthy control, and concentration of diluted gingival crevicular IgG has not any significant differences between two groups. Serum and gingival crevicular IgG antibody to Bacteroides gingivalis were significantly higher titer in rapidly progressive periodontitis patients to compare with healthy control. The lipopolysaccharide profiles of 2 Korean B. gingivalis in silver stained sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis were similar to type strains of B. gingivalis and typical LPS band were appeared around the 24-Kd molecular weight. Immunodiffusion test and immunoelectrophoresis of the L.P.S. extracted from 2 Korean B. gingivalis and 2 kinds of type strains of B. gingivalis showed that B. gingivalis Korean-1 was reacted identically to B. gingivalis ATCC 33277. In trypsin and ${\alpha}$-glucosidase activity test of 2 Korean B. gingivalis, both of them revealed positive trypsin and negative ${\alpha}$-glucosidase activity, respectively. These investigation suggested that B. gingivalis is important pathogenic plaque bacteria for the pathogenesis of periodontitis and further study is needed to purify and characterize of the species-specific antigens of this organisms to develop monoclonal antibody and potential diagnostic reagents.

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간척지토양(干拓地土壤)의 수도근권(水稻根圈)에서 협생질소고정(協生窒素固定)에 관(關)한 연구(硏究) -제(第) II 보(報). 혈청면역학적(血淸免疫學的) 방법(方法)에 의한 협생질소고정세균(協生窒素固定細菌)의 분리(分離) (Associated Nitrogen Fixation in the Rhizosphere of Rice in Saline and Reclaimed Saline Paddy Soil -II. Identification of associative heterotrophic nitrogen fixing bacteria in histosphere of grasses and rice)

  • 이상규;서장선;고재영
    • 한국토양비료학회지
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    • 제20권2호
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    • pp.193-197
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    • 1987
  • 우리나라 서남해(西南海) 간사지(干瀉地) 및 간척답토양(干拓沓土壤)에서 자생(自生)하는 벼과(科)(5종(種)), 석죽과(科)(2종(種)), 질경이과(科)(2종(種))식물(植物) 및 수도(水稻)(2품종(品種))의 뿌리에서 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 분리동정(分離同定) 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 수답(水沓) 및 자생식물(自生植物)뿌리에서 24종(種)의 질소고정능(窒素固定能)이 높은 협생질소고정균(協生窒素固定菌)을 분리(分離)하였으며 분리(分離)된 세균(細菌)은 8종(種)의 Azospirillum 속(屬), 11종(種)의 Pseudomonas 속(屬), 2종(種)의 Agrobacterium 속(屬) 그리고 2종(種)의 Klebsiella 속(屬)의 세균(細菌)으로서 대체(大體)로 Azospirillum 속(屬)과 Pseudomonas 속(屬)의 세균(細菌)이 많았다. 2. 각종식물별(各種植物別) 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 종류(種類)는 수도(水稻)와 큰 개미자리 뿌리에서 Azospirillum 속(屬), Pseudomonas 속(屬), Agrobacterium 속(屬) 그리고 Klebsiella 속(屬)의 세균(細菌)이 갯쇠보리, 창질경이, 털질경이, 각시미꾸리광이, 및 물억새 뿌리에서 Pseudomonas 속(屬), 그리고 갯잔디에서 Azospirillum 속(屬)의 세균(細菌)이 각각(各各) 분리(分離)되었는데 그중 수도(水稻)와 큰개미자리가 타식물(他植物)뿌리보다 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 종류(種類)가 많았다. 3. 간척지토양수도(干拓地土壤水稻) 및 식물(植物)뿌리에서 분리(分離)된 세균(細菌)의 혈청면역학적동정결과(血淸免疫學的同定結果) 이들 협생질소고정균(協生窒素固定菌은 Azospirillum lipoferum, Pseudomonas sp, Agrobacterium radiobader, 및 Klebsiella planticola 였다.

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개의 비장에서 분리한 페리틴의 특성 (Characterization of Ferritin Isolated from Dog Spleen)

  • 박재학;전도연;김영호
    • 생명과학회지
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    • 제15권3호
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    • pp.439-446
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    • 2005
  • 페리틴은 생체 내 주요 철 저장 단백질로서 포유류에서 세균류에 이르기까지 다양한 생명체에 존재한다. 페리틴 분자는 $18\~22 kDa$의 단량체 24개가 결합된 약 240 kDa분자량을 지닌 거대분자이다. 본 연구에서는 개의 비장에서부터 열처리, 염석, 컬럼 크로마토그래피, 그리고 한외여과 등의 방법으로 페리틴을 정제한 후, 그 전기영동상의 특성 및 면역화학적 특성을 말, 소, 돼지 등의 비장 유래 페리틴과 비교 분석하였다. 이러한 정제방법에 의해 개의 비장으로부터 페리틴의 양은 비장 1g당 약$84{\mu}g$이었다. 정제된 개 페리틴의 철 함량은 $22.7\%$로서 함께 비교 검토한 다른 동물 유래의 페리틴에 비해 가장 높게 나타났다. 개 페리틴의 비변성 겔에서의 이동상은 소페리틴과 유사하였고, 변성 겔에서는 돼지 및 말의 페리틴과 유사하였다. SDS-PACE상에서 나타난 개 페리틴 subunit의 분자량은 19.5kDa이였으며 이때 SDS-PACE상의 ferritin subunit은 철과 결합하지 않는 것으로 확인되었다. 개 페리틴의 면역화학적 특성을 다른 동물유래의 페리틴과 비교하고자, 개의 페리틴에 대한 다클론 항체를 쥐에서 생산하였다. 생산된 항-페리틴 항체를 이용하여 Ouchterlony doulbe immunodiffusion방법으로 개, 소, 말, 돼지 페리틴들을 항원으로 항원-항체반응을 조사한 결과, 항-개 페리틴 항체가 소, 말, 돼지의 페리틴과도 항원-항체반응을 일으킬 수 있는 것으로 나타났다. 이는 개, 소, 말, 돼지 페리틴들이 항원적 동일성을 지니고 있음을 시사한다. 항-개 페리틴 항체를 이용하여 타 동물 유래의 페리틴에 대한 Western blot analysis를 시도한 결과, 항-개 페리틴 항체가 개 페리틴 및 돼지 폐리틴에는 강하게 반응하였으나 말과 소 유래의 페리틴에 대해서는 비교적 약하게 반응하여, 개의 페리틴이 면역화학적으로 돼지 페리틴과 가장 유사한 것으로 나타났다. 이상의 결과들은 개의 페리틴에 대한 생화학적 및 면역학적 특성을 제시한다.