• 제목/요약/키워드: Immobilized media

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Recombinant Expression, Isotope Labeling and Purification of the Vitamin D Receptor Binding Peptide

  • Chae, Young-Kee;Singarapu, Kiran;Westler, W. Milo;Markley, John L.
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제32권12호
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    • pp.4337-4340
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    • 2011
  • The vitamin D receptor binding peptide, VDRBP, was overexpressed as a fused form with the ubiquitin molecule in Rosetta(DE3)pLysS, a protein production strain of Escherichia coli harboring an induction controller plasmid. The fusion protein was bound to the immobilized metal ions, and the denaturation and renaturation of the fusion protein were performed as a part of the purification procedure. After the elution of the fusion protein, the peptide hormone was released from its fusion partner by using yeast ubiquitin hydrolase (YUH), and subsequently purified by reverse phase chromatography. The purity of the resulting peptide fragment was checked by MALDI-TOF mass and NMR spectroscopy. The final yields of the target peptide were around 5 and 2 mg per liter of LB and minimal media, respectively. The recombinant expression and purification of this peptide will enable structural and functional studies using multidimensional NMR spectroscopy and X-ray crystallography.

간접 포기식 유동상의 이상적 설계에 관한 연구 (A Study on the Optimal Design in the Indirect Aerated Fluidized Bed)

  • 안송엽;김환홍;권희태
    • 한국환경과학회지
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    • 제8권1호
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    • pp.95-100
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    • 1999
  • Process intensification without any increase in bed requires the exploitation of fluid mechanical phenomena as the basis for elegant solutions to the process engineering problems which result from the need to retain and control the immobilized biomass, and for biomass recovery. The fluidized bed biological reactor provides a solution to these needs. The wastewater treatment characteristics of the fluidized bed was filled with sand media. Indirect aeration were studied experimentally. The researcher was filled with sand particle size(0.60~0.42mm) in three reactors with different section area(A)/height(H), in the state BOD loading 4.5kg-$BOD_5/m^3$ㆍd, and under the fixed state of hydraulic retention time for around 32 minutes.

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서로 다른 공극률의 망상형 폴리우레탄들이 충전된 바이오필터에서 톨루엔 제거 특성 (Removal Characteristics of Toluene in Biofilters Packed with Reticulated-PU-Foams of Different Porosities)

  • 명성운;남윤수;이용우;최호석
    • KSBB Journal
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    • 제18권6호
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    • pp.448-454
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    • 2003
  • 세 가지 다른 공극률을 가진 담체를 충전한 바이오필터에서 기상의 톨루엔 제거실험을 수행하였다. 유입 유량과 유입 농도의 변화에 따른 바이오필터의 제거성능을 조사하고 공극률에 따른 영향을 알아보았다. 15일 동안 수행된 실험을 통해 빠른 환경변화에 대한 각 바이오필터의 동특성을 파악할 수 있었다. 바이오필터 설계에 중요한 변수인 제거량은 BF2 (25 PPI)가 115g/㎥h로 가장 큰 값은 나타내었다. 이는 제거량과 밀접한 관련이 있는 미생물 균체량이 초기 고정화 단계에서 각 바이오필터가 공극의 크기별로 각각 다른 부착 특성을 가져서 그 양과 수분 함량에 영향을 주었기 때문이다. 과도한 바이오매스의 축적은 바이오필터 성능을 저하시키는 요인임을 확인할 수 있었고 초기에 담체의 공극률이 장기적인 바이오필터 운전에 있어서 일정한 공기 흐름을 주기 위해서 매우 중요한 변수로 작용함을 알 수 있었다. 마지막으로 폴리우레탄 폼 담체는 균일하고 충분한 공극을 제공하므로 미생물의 흡탈착이 유리하고 충분한 미생물 서식공간을 제공함으로써 많은 미생물을 담지할 수 있어 단일 담체로 상업적 적용 가능성을 가지고 있다고 사료된다.

Calcium Carbonate Buffer System을 이용한 Bifidobacterium longum의 배양 효율 증대에 관한 연구 (Enhancement of Cultivation Efficiency of Bifidobacterium longum Using Calcium Carbonate Buffer System)

  • 이기용;황인범;허태련
    • 한국식품과학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.126-132
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    • 1997
  • 낮은 pH 환경에서 생장이 억제되는 혐기성 유산균인 bifidobacteria의 배양효율 증대를 위한 완충제로서 alginate로 고정화된 평균 지름 2.5 mm의 $CaCO_3$ 비드를 제조하였다. 고정화된 $CaCO_3$ 비드의 완충 효과를 조사하기 위하여 초산, 유산 및 초산과 유산을 3:2 몰농도 비율로 혼합한 산용액을 이용하여 pH 4.0으로 조정된 m-TPY 배지에 첨가되는 $CaCO_3$ 비드의 양을 달리하여 20분간 반응시킨 결과 첨가되는 $CaCO_3$ 비드의 양에 따라 다양한 pH 상승 효과가 나타남을 관찰하였고, 배양액에 첨가되는 $CaCO_3$ 비드의 양을 달리하여 bifidobacteria의 배양 특성을 조사한 결과 배양액에 첨가되는 $CaCO_3$ 비드의 양이 증가할수록 배양액내 완충능력과 균증식도가 크게 증가하였다. 또한, $CaCO_3$ 비드가 30%로 도입된 배양액에 포도당 농도를 0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0%, 2.5% 그리고 5.0%로 각각 첨가하여 당농도에 따른 bifidobacteria의 배양 특성을 조사한 결과 배양액내 당농도가 증가함에 따라 배양액내 균증식도와 대수기의 지속 시간이 크게 증가되었다. 따라서 bifidobacteria의 배양효율 증대를 위하여 완충제로서 고정화된 $CaCO_3$ 비드의 이용은 매우 효과적인 것으로 생각되었다.

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Bacillus sp. A8-8에 의한 수질 중의 암모니아 및 아질산성 질소 제거 (Removal of Ammonia and Nitrite in Water by Bacillus sp. A8-8)

  • 이용석;유주순;정수열;최용락
    • 생명과학회지
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    • 제13권1호
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    • pp.47-53
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    • 2003
  • 본 연구는 폐수 중의 질소 제거를 위한 생물학적 처리용 미생물 개발을 위한 목적으로 유류 분해 능력이 뛰어난 균 주인 Bacillus sp. A8-8을 사용하여 수질 중의 질소 산화능을 조사하였다. 사용한 균주는 0.5% 포도당이 포함된 초기 pH가 7.0인 암모니아성 질소 및 아질산성 질소 함유 배지에서 12시간 배양 후 각각 약 95.5%와 85%의 암모니아성 질소와 아질산성 질소의 감소율을 나타내었다. 산업 폐수 및 생활 하수에 분리 균 주를 이용한 결과, 수질 속의 암모니아성 질소가 단시간에 크게 감소시키는 효과를 확인하였다. 균 주를 고정시킨 담체의 질소 산화 효과를 시험하고자 Bacillus sp. A8-8을 고정시킨 세라믹 담체를 이용한 결과, 배양 1일 후에는 암모니아성 질소가 전부 제거되었다.

Optimization of Culture Medium for Novel Cell-Associated Tannase Production from Bacillus massiliensis Using Response Surface Methodology

  • Belur, Prasanna D.;Goud, Rakesh;Goudar, Dinesh C.
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권2호
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    • pp.199-206
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    • 2012
  • Naturally immobilized tannase (tannin acyl hydrolase, E.C. 3.1.1.20) has many advantages, as it avoids the expensive and laborious operation of isolation, purification, and immobilization, plus it is highly stable in adverse pH and temperature. However, in the case of cell-associated enzymes, since the enzyme is associated with the biomass, separation of the pure biomass is necessary. However, tannic acid, a known inducer of tannase, forms insoluble complexes with media proteins, making it difficult to separate pure biomass. Therefore, this study optimizes the production of cell-associated tannase using a "protein-tannin complex" free media. An exploratory study was first conducted in shake-flasks to select the inducer, carbon source, and nitrogen sources. As a result it was found that gallic acid induces tannase synthesis, a tryptose broth gives higher biomass, and lactose supplementation is beneficial. The medium was then optimized using response surface methodology based on the full factorial central composite design in a 3 l bioreactor. A $2^3$ factorial design augmented by 7 axial points (${\alpha}$ = 1.682) and 2 replicates at the center point was implemented in 17 experiments. A mathematical model was also developed to show the effect of each medium component and their interactions on the production of cell-associated tannase. The validity of the proposed model was verified, and the optimized medium was shown to produce maximum cell-associated tannase activity of 9.65 U/l, which is 93.8% higher than the activity in the basal medium, after 12 h at pH 5.0, $30^{\circ}C$. The optimum medium consists of 38 g/l lactose, 50 g/l tryptose, and 2.8 g/l gallic acid.

Ionic Recognition with Quinone-Derivatized Calixarenes in Solution and at Self-Assembled Monlayers

  • Kim Hasuck;Kang Sun Kil;Chung Taek Dong
    • 전기화학회지
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    • 제3권2호
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    • pp.69-71
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    • 2000
  • 카르복시산과 이황하물 다리를 가지며 산화환원 활성이 있는 칼릭스[4]아렌을 합성하였고 그것이 은과 금 표면 위에 자발적으로 흡착하는 것을 관찰하였다. 칼릭스[4]아렌은 특이한 구조 때문에 수용액에서 알칼리 토금속이온에 선택적인 친화력을 보인다 한편 둥그런 이온 수용체를 전극 위에 고정시켰을 때 금속 이온을 포획하는 것을 전압전류법 및 분광학적인 연구를 통해 확인하였다. 아울러 EDTA와 같은 강한 킬레이트제를 이용하여 이온을 가역적으로 제거할 수 있음을 보였다.

양친매상 효소반응에 의한 알킬글루코시드의 합성연구 (A Study on Alkyl Glucoside Synthesis by Amphiphilic Phase Enzyme Reaction)

  • 허주형;임교빈김해성
    • KSBB Journal
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    • 제11권5호
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    • pp.511-517
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    • 1996
  • 본 연구에서는 친수성기질과 소수성기질을 함께 수용하는 수용성 상용용매를 사용하여 반응매질의 친수성과 소수성이 알킬글루코시드의 합성반응에 적 합하도록 조절된 양친매질을 개발하고 hydrophili C city control이 이루어진 효소반응기술을 이용하여 효소의 활성도와 안정성, 기질의 가용화, 얄킬글루코 시드의 수율과 농도의 관점에셔 가장 바람직한 양친 매상 효소반응공정 (amphiphilic phase enzyme re action process)을 제시하였으며, 핵실글루코시드, 옥틸글루코시드, 데실글루코시드 및 도데실글루코시 드를 합성한 결과 생생물 농도는 각각 18.2, 9.68, 7.27, 6.03g/L을 얻였다.

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Crystal Phase Changes of Zeolite in Immobilization of Waste LiCI Salt

  • KIM Jeong-Guk;LEE Jae-Hee;Lee Sung-Ho;KIM In-Tae;KIM Joon-Hyung;KIM Eung-Ho
    • 한국방사성폐기물학회:학술대회논문집
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    • 한국방사성폐기물학회 2005년도 Proceedings of The 6th korea-china joint workshop on nuclear waste management
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    • pp.176-181
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    • 2005
  • The electrolytic reduction process and the electrorefining process, which are being developed at the Korea Atomic Energy Research Institute (KAERI), are to generate molten waste salts such as LiCI salt and LiCI-KCI eutectic salt, respectively. Our goal in waste salt management is to minimize a total waste generation and fabricate a very low­leaching waste form such as a ceramic waste form. Zeolite has been known to one of the most desirable media to immobilize waste salt, which is water soluble and easily radiolyzed. Zeolite can be also used to the removal of fission products from the spent waste salt. Molten LiCI salt is mixed with zeolite A at $650^{\circ}C$ to form a salt-loaded zeolite, and then thermally treated in above $900^{\circ}C$ to become an immobilized product with crystal phase of $Li_{8}Cl_{2}$-Sodalite. In this work, a crystal phase changes of immobilization medium, zeolite, during immobilization of molten LiCI salt using zeolite A is introduced.

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Biochemical Application of IgG Fc-Binding Peptide: From Biochip to Targeted Nano Carrier

  • Chung, Sang J.
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2013년도 제44회 동계 정기학술대회 초록집
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    • pp.110-111
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    • 2013
  • FcBP consisting of 13 amino acids specifically binds to Immunoglobulin G Fc domain. Initially, we utilized this peptide for preparation of antibody chip as a PEG composite for enhanced solubility. After then, the peptide conjugate was immobilized on agarose resin, resulting in highly efficient affinity column for antibody purification. The efficiency was comparable to commercial Protein A column. Recently, this peptide was conjugated with cell penetrating peptide (CPP) on a backbone of GFP, affording antibody transducer, which carries antibody into live cells by simple mixing of antibody and the transducer in cell culture media. Antibody transduction into cells was monitored by live cell imaging. More recently, the FcBP was fused to ferritin cage, which consists of 24 ferritin protein molecules. The FcBP-ferritin cage showed greatly increased binding affinity to human IgG. Its binding was analyzed by QCM and SPR analysis. Finally, it was selectively delivered by Herceptin to SKBR3, a breast cancer cell, over MCF10A, non-tumorigenic cells (Fig. 1). Fig. 1. Fluorescent microscopic images of SKBR3 breast cancer cells (A~C) and MCF10A breast cells (D~F) treated with Cy3-trastuzumab/fFcBP-Pf_Fn complexes. Trastuzumab and FcBP-Pf_Fn, which were labeled with Cy3 (Cy3-trastuzumab) and fluorescein (fFcBP-Pf_Fn), respectively, selectively targeted SKBR3 over MCF10A.

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