The genetic effects of restraint stress challenge on HPA axis and the therapeutic effect of Boshimgeonbi-Tang on the stress were studied with cDNA microarray analyses on hypothalamus using an immobilization-stress mouse as stress model. Male CD-1 mice were restrained in a tightly fitted and ventilated vinyl holder for 2hours once a day, and this challenge was repeated for seven consecutive days. The body weights of the immobilization-stress mice were diminished about 25 percent degree as compared to normal ones. Seven days later, total RNA was extracted from the organs of the mouse, body-labeled with CyDye/sup TM/ fluorescence dyes (Amersham Bioscience Co., NJ), and then hybridized to cDNA microarray chip. Scanning and analyzing the array slides were carried out using GenePix 4000 series scanner and GenePix Pro/sup TM/ analyzing program, respectively. The expression profiles of 109 genes out of 6000 genes on the chip were significantly modulated in hypothalamus by the immobilization stress. Energy metabolism-, lipid metabolism-, apoptosis- and signal transduction-related genes were transcriptionally activated whereas DNA repair-, protein biosynthesis-, and structure integrity-related genes were down-regulated in hypothalamus. The 58 genes were up-regulated by the mRNA expression folds of 1.5 to 7.9. and the 51 genes were down-regulated by 1.5 - 3.5 fold. The 20 genes among them were selected to confirm the expression profiles by RT-PCR. The mRNA expression levels of Tnfrsf1a (apoptosis), Calm2 (cell cycle), Bag3 (apoptosis), Hspe1 (protein folding), Aatk (apoptosis), Dffa (apoptosis), Itgb1 (cell adhesion), Vcam1 (cell adhesion), Fkbp5 (protein folding), BDNF (neuron survival) were restored to the normal one by the treatment of Boshimgeonbi-Tang.
The genetic effects of restraint stress challenge on HPA axis and the therapeutic effect of Boshimgeonbi-tang on the stress were studied with cDNA microarray analyses, RT-PCR on hypothalamus using an immobilization-stress mice as an animal model. Male CD-1 mice were restrained in a tightly fitted and ventilated vinyl holder for 2hrs once a day, and this challenge was repeated for seven· consecutive days. In the change of body weight it showed that the Boshimgeonbi-tang is effected recovery on weight loss caused by the immobilization-stress. Seven days later, total RNA was extracted from the organs of the mouse, body-labeled with $CyDye^{TM}$ fluorescence dyes and then hybridized to CDNA microarray chip. Scanning and analyzing the array slides were carried out using GenePix4000 series scanner and GenePix $Pro^{TM}$ analyzing program, respectively. The expression profiles of 109 genes out of 6000 genes on the chip were significantly modulated in hypothalamus by the immobilization stress. Energy metabolism-, lipid metabolism-, apoptosis-, stress protein, transcriptional factor, and signal transduction-related genes were transcriptionally activated whereas DNA repair-, protein biosysthesis-, and structure integrity-related genes were down-regulated in hypothalamus. The 58 genes were up-regulated by the mRNA expression folds of 1.5 to 7.9. and the 51 genes were down-regulated by 1.5 - 5.5 fold. The 11 genes among them were selected to confirm the expression profiles by RT-PCR. The mRNA expression levels of Tnfrsf1a (apoptosis), Calm2 (cell cycle), Bag3 (apoptosis), Ogg1 (DNA repair), Aatk (apoptosis), Dffa (apoptosis), Fkbp5 (protein folding) were restored to the normal one by the treatment of Boshimgeonbi-tang.
This study aimed to investigate the effects of Chaihushugansan and Chaihuyigantang on the change of monoamine-contents in the hypothalamus of mice induced by the immobilization stress. Each formula(1.0g/kg) was injected intragastrically to mice 1 hour prior to the immobilzation stress(15 minutes) before measuring the change of monoamine-contents level in mice hypothalamus. The results were as follows: 1. DA content at control group showed significant change. CHSGS group and CHYGT group showed significant decrease.(P<0.05) 2. NE content of the control group was increased than normal group. NE content of the CHYGT group was shown a significant decrease than control group.(P<0.05) 3. DOPAC contents didn't show significant changes at any groups. 4. 5-HT contents didn't show significant changes at any groups. 5. 5-HIAA contents at CHSGS group and CHYGT group showed signifiant changes.(P<0.05, 0.01) These data revealed that chaihushugansan and chaihuyigantang might have the anti-stress effect through the control of DA and NE contents in the hypothalamus.
To elucidate the preventive effect of oriental medicine Gami-Ondamtang(GO) on stress, we investigated the physiological change of rats which were applied immobilization stress. For immobilization stress, rats were placed in restrainer for 12 hours a day for 3 days. During application of stress, body weight of rats was measured. After sacrifice, 8 organs were taken for measurement of organ weight. Brain was sectioned into 4 parts that are Frontal Cortex, Corpus Striatum, Hypothalamus and Hippocampus. Each part was homogenated and its catecholamine and serotonin contents were measured with HPLC. In our study, stress mainly induced increase of concentration of neurotransmitters in brain without other significant physical change of rats. GO inhibited stress induced changes of neurotransmitter content in brain.
Berberine, a protoberberine isoquinoline alkaloid, showed inhibitory effects on dopamine content in PC12 cells $(53.8\%\;inhibition\;at\;20\;{\mu}M)$. Tyrosine hydroxylase, the rate-limiting enzyme in the catecholamine biosynthetic pathway, was inhibited at $20\;{\mu}M)$ of berberine by $21.8\%$ relative to control. Thus, we hypothesized that the inhibition of tyrosine hydroxylase by berberine might be partially contributed to the decrease in dopamine content in PC12 cells. Furthermore, we investigated the effects of berberine on catecholamine content of serum after immobilization and cold stress in mice. Adult male mice were either subjected to 30 min of restraint or to 2 hr of cold chamber at $4-6^{\circ}C$. Serum norepinephrine, 16.8 pmol/ml, in control mice was increased to 28.8 pmol/ml by immobilization and the stress-induced rise in serum norepinephrine was partially blocked by the treatment of berberine (10 mg/kg, i.p.) once a day for 6 days. Berberine (10 mg/kg/day for 3 days, i.p.) also inhibited the increase in serum norepinephrine by cold stress in mice. These results suggest that berberine may be developed as the promising antistress agent.
Objective : This study was conducted in order to find the effects of Gammaekdaejo-tang (Ganmaidazao-tang, GDT) by subjecting rats to immobilization stress, thereby inducing depression, anxiety and acquisition-retention defects. Method : Rats treated with normal saline, GDT 200mg/kg and GDT 400mg/kg were subjected to stress by immobilization. Afterwards, behavior changes were observed by elevated plus maze test, acquisition test and retention test in the Morris water maze. The results were obtained by immunohistochemically measuring stress hormone (corticosteroid) levels in the blood. Results and Conclusions : 1. The open arm test in the elevated plus maze showed that compared with the normal group, the time spent decreased in the control group and increased in the GDT 400mg/kg group. 2. The locomotor activity test in the elevated plus maze revealed that the control group showed significant activity decrease compared with the normal group but significant increase in the GDT 400mg/kg group. 3. The acquisition test in the Morris water maze showed that the acquisitive ability of the control group significantly deteriorated on the 3rd and 4th day compared with the normal group, but improved significantly in the GDT 200mg/kg and GDT 400mg/kg groups. 4. The retention test on the 7th day in the Morris water maze revealed that the retentive ability of the control group significantly deteriorated compared with the normal group, but the retentive ability of the GDT 400mg/kg group significantly improved. 5. The blood levels of corticosteroid in the control group increased significantly compared with the normal group but the levels of corticosterone in the blood of the GDT 400mg/kg group significantly decreased.
스트레스에 의해서 생체는 에너지 대사를 증가시키며, 에너지 대사의 증가는 높은 반응성의 ROS를 생성한다. ROS는 높은 반응성으로 인해 지질, 단백질 등을 과산화시켜 원래의 활성을 잃게 한다. 이런 ROS에 대해서 높은 소거능을 지닌 vitamin I의 투여는 스트레스로 인한 생체내 산화적 손상을 억제할 수 있을 것으로 생각된다. 이런 효능을 확인하기 위하여 실험용 흰 쥐에게 4주간의 noise 및 고정화 스트레스를 가한 결과, 스트레스를 가함으로서 체중증가량을 감소시켰으며, 스트레스 지표 물질인 5-HIAA와 혈청내 유리 지방산의 증가 및 뇌조직의 산화적 손상이 증가되어 정상적으로 스트레스가 가해졌음을 확인할 수 있었다. 또한, vitamin E 투여군의 경우 혈청내에서의 vitamin E 농도가 유의적으로 증가하여 정상적인 vitamin E의 투여도 이루어졌음을 확인하였다. Vitamin E의 투여는 스트레스로 인한 체중 증가량의 감소를 억제하였으며, 또한 뇌조직의 단백질 및 지질의 산화적 손상을 억제하는 효능을 보였으며, SOD의 활성 또한 증가시키는 효능을 나타냈다. 따라서, vitamin E 투여는 스트레스로 인하여 발생하는 뇌조직의 산화적 손상을 억제함으로서 스트레스에 대한 방어 효능이 일부 있는 것으로 생각된다.
This study determined plasma glucose, free fatty acid(ffa), epinephrine, norepinephrine, creatine the phosphokinase(CPK), calcium (Ca), magnesium(Mg) and hydroxyproline, Ca and Mg in the heart muscle. Thirty six male Sprague Dawley rats average weighing 110g divided into two diet group : normal Mg group(0.05% Mg), Marginal Mg group(0.005% Mg). After the rats were on experimental diets for 2 weeks, rats for each group were randomly assigned to stress and no stress group and 30 minutes IMMB stress was administered to stress group every day for two weeks. The following were found : 1) Rats fed normal magnesium diet showed decreased plasma glucose and non signficant change in norepinephrine and CPK with IMMB stress, while magnesium deficient rats showed elevated plasma glucose, norepinephrine and CPK with stress. 2) Myocardial hydroxyproline and plasma epinephrine were not significantly different among groups. 3) In the rats fed adequate magnesium, stress increased plasma magnesium while rats on marginal magnesium diet did not show significant change with stress. 4) Plasma and myocardial calcium were increased in rats fed marginal Mg diet, but did not show any significant difference with stress.
단기 속박스트레스가 혈청 cortisol과 DHEAS 농도에 미치는 영향을 알아보고자 단기 속박스트레스 (IS)를 받은 BALB / c 숫컷 생쥐의 혈청 cortisol과 DHEAS 농도를 방사선면역측정 (RIA)을 이용하여 분석하였다. 그 결과 cortisol의 경우 30분 IS를 받은 그룹 (Ⅰ-30N)에서 대조군에 비해 유의적인 증가를 보였으며 (p<0.01), 120분 부과 (Ⅰ-120N) 시에도 대조군에 비해 유의적인 증가를 보였다. 가시오갈피 (SG) 처리군에서도 30분 IS를 받은 그룹 (Ⅰ-30T)에서 대조군에 비해 유의적 증가를 보였고 (p<0.01), 120분 부과(Ⅰ-120T) 시에도 대조군에 비해 유의적으로 증가하는 경향을 나타내었다. SG 처리군과 비처리군 모두에서 cortisol의 계속적인 증가를 관찰할 수 있었다. 30분 부과 그룹에서 SG 비처리군 (Ⅰ-30N)에 비해 SG 처리군 (Ⅰ-30T)에서 cortisol 농도의 유의적인 감소를 나타내었고, 120분 부과 그룹에서도 SG 비처리군 (Ⅰ-120 N)에 비해 SG 처리군 (Ⅰ-120T)에서 cortisol 농도의 유의적인 감소를 나타내었다. 이에 반해, DHEAS의 경우 30분 속박 (Ⅰ-30N)시 대조군에 비해 유의성 없는 감소 경향을 보였으나, 120분 속박 (Ⅰ-120N)시 대조군에 비해 유의적인 감소를 나타내었다 (p<0.01). SG 처리군에서도 30분 속박 (Ⅰ-30T) 시 대조군에 비해 유의성 없는 감소 경향을 보였으나, 120분 속박 (Ⅰ-120T)시 대조군에 비해 유의적인 감소를 나타내었다 (p<0.01). 그러나 30분, 120분 부과그룹 모두에서 SG 처리에 대한 유의적 차이는 없었다. 따라서 본 연구를 통하여 단기 속박이라는 국한된 스트레스에도 불구하고 DHEAS가 지속적으로 감소됨으로써 단기 속박스트레스가 혈청 cortisol과 DHEAS에 영향을 미치고 있음을 알 수 있었으며, 이를 통하여 DHEAS가 스트레스 관련 호르몬임을 확인할 수 있었다.
Both ethanol and water extracts of unossified velvet antler were found to exhibit a significant immuno-stimulating activity as measured by carbon clearance test in mice, a remarkable anti-fatigue effect in weight-loaded forced swimming performance in mice, a significant anti-stress effect on immobilization in rats. The antler extracts also showed a weak but significant anti-thrombotic activity. These findings are indicative of adaptogenic properties of antlers and their normalizing effects during stressful condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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