TRH (Thvrotropin-Releasing Hormone) known to regulate the transcription of the TSH (Thyroid-Stimulating Hormones gene in pituitary cells, but little is understood about the mechanism(sl involved. re present study was attempted to elucidate the role of Ca2+ movement through the voltage-gated channels in the regulation of TSH gene transcription. The c-fos is one of immediate early genes and used as model system for the investigation of signaling pathwavs involved in various stimuli. The changes of c-fos mRNA levels were determined after treatment of various agents using Northern and slot hybridization analysis. The c-fos mRNA was rapidly and transiently induced by TRH (about 3-fold) in GH3 cells and this induction was repressed by calcium chelating agent (EGTA), calcium channel blocker (verapamil) anti protein kinase C inhibitor (aminoacridine). The abilities of forskolin (adenvlate cvclase activators, PMA (protein kinase C activator), and A23187 (calcium ionophore) to affect c-ios gene transcription, either alone or in combination with TRH were tested in the same cells. All of them significantly increased the level of c-fos mRUA. However, no additive relationship was observed in all combined treatments except forskolin. These results suggest that TRH action on the c-fos gene activation is mediated by calcium influx as well as through protein kinase C.
Park, Chung-Gyu;Han, Tae-Hee;Kim, Dae-Joong;Kim, Jin-Hee;Hwang, Eung-Soo;Choi, Sung-Bae;Cha, Chang-Yong
The Journal of Korean Society of Virology
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v.28
no.3
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pp.267-274
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1998
Human cytomegalovirus (HCMV) has the ability to activate the expression of many viral and cellular genes. Among various viral proteins, the immediate early proteins (IE1-72kDa, IE2-86kDa) have been known to be potent transactivators. The product of c-jun proto-oncogene is important in cell activation and differentiation. Here, we tried to find out if the IE could activate the c-jun promoter and also tried to identify the responsible sequence elements in the c-jun activation by IE1-72kDa. We found HCMV IE expression transactivated the c-jun promoter in human embryonal lung fibroblasts (HEL). The activation fold by IE1-72kDa, IE2-86kDa and IE2-55kDa was 23, 35, and 5, respectively. When the expression of each IE was combined, it showed synergism. Expression of (IE1-72kDa + IE2-86kDa) and (IE1-72kDa + IE2-86kDa + IE2-55kDa) resulted in 131 and 162 fold increase, respectively. The c-jun promoter region between -117 and -59 contains binding sites for the transcription factors Spl, CAAT, AP-l like (ATF/CREB), and MEF2. Transient expression assays were performed using various reporter plasmids containing the c-jun promoter-regulatory region linked to the luciferase gene and a plasmid expressing HCMV IE1 gene. Deletional and point mutational analysis showed that the sequence between -225 to -160 and the CTF binding site were involved in the up-regulation of c-jun promoter.
Background : Poststernotomy mediastinitis is a rare, but life-threatening complication, thus early diagnosis and proper management is essential for poststernotomy mediastinitis. The main treatment for mediastinitis is aggressive debridement. Several options exist for reconstruction of defects after debridement. The efficacy of immediate debridement and reconstruction with a pectoralis major muscle flap designed for the defect immediately after the diagnosis of poststernotomy mediastinitis is demonstrated. Methods : Between September 2009 and June 2011, 6 patients were referred to the Department of Plastic and Reconstructive Surgery and the Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery of Ajou University Hospital for poststernotomy mediastinitis. All of the patients underwent extensive debridement and reconstruction with pectoralis major muscle flaps, advanced based on the pedicle of the thoracoacromial artery as soon as possible following diagnosis. A retrospective review of the 6 cases was performed to evaluate infection control, postoperative morbidity, and mortality. Results : All patients had complete wound closures and reduced severity of infections based on the erythrocyte sedimentation rate and C-reactive protein levels and a reduction in poststernal fluid collection on computed tomography an average of 6 days postoperatively. A lack of growth of organisms in the wound culture was demonstrated after 3 weeks. There were no major wound morbidities, such as hematomas, but one minor complication required a skin graft caused by skin flap necrosis. No patient expired after definitive surgery. Conclusions : Immediate debridement and reconstruction using a pectoralis major muscle flap is a safe technique for managing infections associated with poststernotomy mediastinitis, and is associated with minimal morbidity and mortality.
Activation of D1-like dopamine receptors by psychostimulants, such as amphetamine, upregulates the expression of immediate early gene and opioid peptide gene in the striatum. The genomic changes are regulated by phosphorylated transcription factors via complicated intracellular events. To evaluate temporal expression of the transcription factors by dopaminergic stimulation, the D1-like dopamine agonist, amphetamine or SKF82958, was systematically delivered. As intracellular markers in response to the agonist, phosphorylated cAMP response element-binding protein (pCREB), Fos-related antigens (FRA) and FosB immunoreactivity (IR) was compared at 20 and 120 min time points in the selected areas of the striatum. Semi-quantitative immunocytochemistry showed that amphetamine (5 mg/kg, i.p.) significantly increased pCREB-IR at 20 min, sustained up to 60 min and decreased at 120 min after the infusion. Like amphetamine, the full D1 agonist, SKF82958 (0.5 mg/kg, s.c.), also increased pCREB-IR at 20 min, but not at 120 min after the infusion in the dorsal striatum (caudoputaman, CPu) and shell of ventral striatum (nucleus accumbens, NAc). In contrast, FRA- and FosB-IR induced by SKF82958 was significantly increased at 120 min, but not at 20 min after the administration. These data indicate that SKF82958 mimics induction of CREB phosphorylation by amphetamine and differentially regulates temporal induction of pCREB, and FRA and FosB expression in the striatum.
This study is to examine the effect of swimming exercise on the expression of c-fos, c-jun protein in rat hippocampus. 4-weeks aged rats and 16-weeks aged rats were used in experimental materials. All of two groups were classified into control and swimming exercise group. Swimming exercise was practiced for an hour a day. The results were got as follows after practical application in 1 day, 3days, 7 days. The expression of c-fos, c-jun protein was increased in all of the two experimental groups significantly in 1 day, 3days, 7 days. It was increased gradually in order of after 1 day, 3days, 7 days. There seems to be the effect of swimming exercise increasing the expression of c-fos, c-jun protein in hippocampus. Therefore swimming exercise can improve cognitive function such as learning and memory and prevent through activating immediate - early gene by swimming exercise. And it seems to have the positive effect on growth and recovery of nerve.
Purpose : Intravenous immunoglobulin(IVIG) has been used as an immunomodulatory treatment for several immune-mediated diseases. The early effect of high-dose IVIG on biochemical profiles including lipids and proteins was evaluated in patients with Kawasaki disease(KD). Methods : Twelve children with KD(nine boys) were treated with IVIG of 2 g/kg over 12 hours. Serial sera were collected from the patients four times : before IVIG treatment and two hours, 24 hours and seven days after IVIG treatment. The samples were frozen at $-20^{\circ}C$ before biochemical analysis. Results : A significant decrease in albumin concentration was found two hours h and 24 hours after IVIG treatment, but this recovered to the pretreatment level after seven days. Total cholesterol and triglyceride increased slightly after seven day. A significant decrease in HDL-cholesterol and C-reactive protein was seen two hours and 24 hours after IVIG treatment. Conclusion : High-dose IVIG affects immediate changes in protein profiles and HDL-cholesterol in KD. Changes in HDL-cholesterol induced by IVIG may be the result of changes in systemic protein metabolism.
In order to express the FLP recombinase in B. mori cultured cell line, BmN-4, transient expression system using a heat shock protein gene (hsp70) promoter of Dorosophilla melnogaster was constructed. This vector was designated as pHsSV. Activity strength of the hsp70 promoter was compared with that of immediate early gene (IE-1) and polyhedrin gene of BmNPV employing the E. coli $\beta$-galactosidase gene as a reporter gene. The result showed that the pHs $\beta$-gal plasmid vector expressed the $\beta$-galactosidase at 2nd and 3rd day after the transfer of plasmid DNA into BmN-4 cells, which was similar to that of pIE1 $\beta$-gal vector, but different from that of a recombinant virus, vBm $\beta$-gal. For the construction of FLP recombinase transient expression vector, the FLP recombinase gene was cloned by polymerase chain reaction technique. To express the FLP recombinase, this gene was inserted into pHsSV plasmid vector, under the control of the hsp70 promotor, and tranfected in BmN-4 cells. The expressed FLP recombinase was estimated at 44kDa on a 12.5% SDS-PAGE.
Objectives : Recently, the new therapeutic tool, that is herbal acupuncture, has been developed and applied to various diseases including the cerebrovascular accident. The main characteristics of herbal acupuncture are a combination of acupuncture and herbal medicine. It was not well known the therapeutic effect and the mechanism of herbal acupuncture on transient forebrain ischemic injury, although it has been used frequently in clinics. The objective was to determine the effect of folium artemisiae argyi (艾葉) herbal acupuncture on the trasient forebrain ischemic injured rat. Methods : In this study, the effects of folium artemisiae argyi (艾葉) herbal acupuncture on the $LR_3$ named Taechung, on neuroprotection after the transient forebrain ischemia were investigated in Sprague-Dawely rats. Expressions of cFos, FosB and BDNF protein in the hippocampus and cortex were observed at 2 hrs and 48 hrs after transient forebrain ischemia by immunohistochemistry and ELISA technique. Results : Expression of cFos protein was increased slightly in the hippocampus and cortex at 2 hrs after transient forebrain ischemia, but FosB protein was increased highly comparing to cFos protein. However, pretreatment with folium artemisiae argyi' herbal acupuncture on $LR_3$ significantly increased expression of cFos protein and significantly decreased expression of FosB protein compared to control group. These features were observed in the retrosplenial granular cortex as well as the hippocampus. Also, pretreatment with folium artemisiae argyi' herbal acupuncture on $LR_3$ significantly increased the expression of BDNF protein in the hippocampus ($263.26{\pm}44.56{\;}pg/ml$ extracted by water, $275.35{\pm}51.47{\;}pg/ml$ extracted by moxa tar)and the cortex ($102.33{\pm}13.65{\;}pg/ml$ extracted by water, $109.54{\pm}9.37{\;}pg/ml$ extracted by moxa tar) compared to the hippocampus ($134.07{\pm}2.96{\;}pg/ml$) and the cortex ($61.16{\pm}4.11{\;}pg/ml$) in control group at 48 hrs after transient forebrain ischemia. Conclusions : These results suggest that pretreatment with folium artemisiae argyi' herbal acupuncture on $LR_3$ has neuroprotective effect on transient forebrain ischemia and the herbal acupunture on $LR_3$ may be related to antioxidative function of folium artemisiae argyi.
Kim Jae-Hyo;Lee Kwan-Hyung;An Young-Nam;Kim Yong-Deuk;Kim Kyung-Sik;Sohn In-Chul
Korean Journal of Acupuncture
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v.20
no.3
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pp.61-80
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2003
Objectives : Acupuncture and herbal medicine have been used to prevent and treat the cerebrovascular accident, such as a stroke, and many studies of acupuncture and moxibustion concerning to the stroke have been undertaken in the human and various animals. Recently, the new therapeutic tool, that is herbal acupuncture, has been developed since the 1950' and applied to various diseases including the cerebrovascular accident. The main characteristics of herbal acupuncture are a combination of acupuncture and herbal medicine. It was not well known the therapeutic effect and the mechanism of herbal acupuncture on transient forebrain ischemic injury, although it has been used frequently in clinics. Methods : In this study, effects of folium Artemisiae Argyi and moxa tar' herbal acupuncture on the $GV_{20}$, named Baek-Hue, on neuroprotection after the transient forebrain ischemia were investigated in Sprague-Dawely rats. Expressions of cFos, FosB and BDNF protein in the hippocampus and cortex were observed at 2 hrs and 48 hrs after transient forebrain ischemia by immunohis- tochemistry and ELISA technique. Results : Expression of cFos protein was increased slightly in the hippocampus and cortex at 2 hrs after transient forebrain ischemia, but FosB protein was increased highly comparing to cFos protein. However, pretreatment with folium Artemisiae Argyi or moxa tar' herbal acupuncture on $GV_{20}$ significantly increased expression of cFos protein and significantly decreased expression of FosB protein compared to control group, respectively. These features were observed in the motor cortex and retrosplenial granular cortex as well as the hippocampus. Also, pretreatment with folium Artemisiae Argyi and moxa tar' herbal acupuncture on$GV_{20}$ significantly increased the expression of BDNF protein in the hippocampus and the cortex compared to control group at 48 hrs after transient forebrain ischemia, respectively. Conclusions : These results suggest that pretreatment with folium Artemisiae Argyi or moxa tar' herbal acupuncture on $GV_{20}$ has neuroprotective effect on transient forebrain ischemia and theherbal acupuncture on $GV_{20}$ may be related to antioxidative function.
Background: In addition to its use as a health food, ginseng is used in cosmetics and shampoo because of its extensive health benefits. The ginsenoside, Rh2, is a component of ginseng that inhibits tumor cell proliferation and differentiation, promotes insulin secretion, improves insulin sensitivity, and shows antioxidant effects. Methods: The effects of Rh2 on cell survival, extracellular matrix (ECM) protein expression, and cell differentiation were examined. The antioxidant effects of Rh2 in UV-irradiated normal human dermal fibroblast (NHDF) cells were also examined. The effects of Rh2 on mitochondrial function, morphology, and mitophagy were investigated in UV-irradiated NHDF cells. Results: Rh2 treatment promoted the proliferation of NHDF cells. Additionally, Rh2 increased the expression levels of ECM proteins and growth-associated immediate-early genes in ultraviolet (UV)-irradiated NHDF cells. Rh2 also affected antioxidant protein expression and increased total antioxidant capacity. Furthermore, treatment with Rh2 ameliorated the changes in mitochondrial morphology, induced the recovery of mitochondrial function, and inhibited the initiation of mitophagy in UV-irradiated NHDF cells. Conclusion: Rh2 inhibits mitophagy and reinstates mitochondrial ATP production and membrane potential in NHDF cells damaged by UV exposure, leading to the recovery of ECM, cell proliferation, and antioxidant capacity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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