This study was designed to investigated the effects of cadmium(Cd) feeding on the humoral immune responses such as PFC-responses and production of immunoglobulins in BALB/c mice. The results obtained were summarized as follows; 1. Total PFCs of direct IgM antibody response were significantly decreased in all Cd-fed goups, whereas total PFCs of IgG antibody response were slightly increased. 2. In secondary immunization, total HA titers were increased in all Cd groups as compared with control, especially in 100ppmm group and also IgG titers were slightly increased except for 50ppm group. 3. The levels of $IgG_1$ were increased to 5.5% 18.7%, 17.4% and 7.2% in 25, 50, 100 and 200ppm groups as compared with control, respectively. And also the levels of IgE were increased to 5.7%, 7.3%, 8.7% and 0.4% in those of Cd groups, in order. Conclusively, concentrations of $IgG_1$, and IgE were increased in all Cd groups. Based on the results of this study and previous report, it was shown that Cd might affect humoral immune responses by modifying the distribution and function of cells playing in the cellular immune response.
Immunoblotting and competitive indirect enzyme-liked immunosorbent assay(Ci-ELISA) was used for detection of ${\beta}$-lactoglobulin(BLG) in dairy products, such as milk, dried milk and fermented milk. In immunoblotting, human IgE weakly recognized proteins of fermented milk, but still responded to dried milk even though become weak. Rabbit polyclonal antibody to BLG, used as a model of antigen, and milk allergic patients' IgE was used in the ELISA. Reactivities of Abs were the highest in market milk. BLG in fermented milk was detected in a low content. This result indicates the fermented milk have the lowest BLG content and could be used as hypo-allergenic food for milk-allergic individual.
Hepatitis A (HA) is an acute infectious disease of the liver caused by the Hepatitis A virus (HAV). In acute HA, the presence of anti-HAV IgM is detectable and about 3 weeks after exposure, its titre increases over 4 to 6 weeks. Anti-HAV IgG is detectable within a few days of the onset of symptoms. IgG antibodies continue to last for years after infection and provide lifelong immunity to the host. This study was performed to investigate the current seroprevalence of anti-HAV antibodies in Jeonbuk province, South Korea. A total of 591 (male 322, female 269) serum samples were collected in July 2011 to June 2012. We tested the antibodies of anti-HAV IgG and IgM using a Modular E170 (Roche Diagnostics, Germany), and analysed the serum alanine aminotransferase (ALT) levels by HITACH 7600-100 (HITACH, Japan). The overall seroprevalence of anti-HAV IgG was 84.6% (500/591), and the rate of females (85.9%) was higher than males (83.5%). According to the decade of age, seroprevalence of anti-HAV IgG were as follows; 68.8% (11/16) in the under 10 years old category, 100% (19/19) in the 10~19 category, 96% (48/50) in the 20~29 category, 83.6% (56/67) in the 30~39 category, 84.3% (123/146) in the 40~49 category, 83.3% (135/162) in the 50~59 category, 83.1% (54/65) in the 60~69 category, 78.1% (32/41) in the 70~79 category, and 88% (22/25) in the over 80 category. Total seroprevalence of anti-HAV IgM was 3.4% (20/591), and according to gender, the seroprevalence of male (3.1%) was very similar to that of female (3.7%). Through this study, we know that the seroprevalence of anti-HAV antibody in north-west Jeonbuk province, South Korea, was high. Only children under the age of 10 remain susceptible to HAV infection. Vaccination against HAV is not needed at the present time for the people of Jeonbuk province, South Korea, but a vaccination should be recommended and the improvement in sanitary conditions and personal hygiene should be highlighted.
Non-biting midges are known to contain potent inhalant allergens. IgE antibody responses to the crude extract of Chironomus kiiensis adults, a dominant chironomid species in Korea, were examined. With the IgE-ELISA or passive cutaneous anaphylaxis reactions, increased levels of chironomid-specific IgE were detected in the skin test positived human sera, or immunized BALB/c mouse sera with the crude extract adsorbed to alum. IgE-immunoblot analysis showed mafor IgE-reacting protein band patterns, which reacted with more than 50% of the skin test positive human sera, at 110, 80, 46, 40, 37, 34 and 31 kDa. The reactive band patterns were larely similar between skin test positive humans and immune BALB/c mice. However, the bands of 55, 31, 27, 26, 24 and 23 kDa were found only in sensitized humans, but not in immunized mice.
Objectives : It has been recently shown that Piperis Longi Fructus (PLF) is involved in the reduction of eosinophil recruitment and production of Th2 cytokines in vivo. However, the main therapeutic mechanisms of PLF remains a matter of considerable debate. To investigate the therapeutic mechanisms of PLF, we examined the influence of PLF on regulatory T cells number, IgE, histamine production in vivo and Th1/Th2 cytokine balance in vitro. Methods : All mice were immunized on two different days (21 days and 7 days before inhalational exposure) by i.p. injections of 0.2 $m\ell$ alum-precipitated Ag containing 100 ${\mu}g$ of OVA bound to 4 mg of aluminum hydroxide in PBS. Seven days after the second sensitization, mice were exposed to aerosolized ovalbumin for 30 min/day on 3 days/week for 12 weeks(at a flow rate of 250 L/min, 2.5% ovalbumin in normal saline) and PLF (150 mg/kg) were orally administered 3 times a week for 8 weeks. Splenocytes from C57BL/6 mice at 8 weeks of age were stimulated with anti-CD3 (1 mg/ml) plus anti-CD28 (1 mg/ml) antibody for 48hrs. IL-4 and IFN-$\gamma$ in the culture supernatants were measured by ELISA Results : The suppressive effects of PLF on asthma model were demonstrated by the increase the number of regulatory T cells and by reducing IgE, histamine production in vivo and modulation of Th1/Th2 cytokine balance. Conclusions : These results indicate that PLF has a deep inhibitory effects on asthma model mice by increase the number of regulatory T cells, and by reducing IgE, histamine production.
A monoclonal antibody(MAb), KCT-23ER, with specificity for E-rosetted T cells of Korean native cattle was prepared by cell hybridization of myeloma P3/NS-1/1-Ag-4-1 and spleen cells from BALB/c mice hyperimmunized with E-rosetted lymphocytes. The isotype of KCT-23ER to T lymphocytes was mouse $IgG_{2b}$. KCT-23ER was reacted with 53.6% to peripheral blood lymphocytes and with 67.8% to nylon wool nonadherent blood lymphocytes. And it was reacted with 72.2%, 59.2% and 35.3% to thymocytes, prescapular lymph node cells and splenocytes, respectively. Immunocytological reactive rates to E-rosetted and non-E-rosetted cells were 72.5% and 22.4%, respectively. These results indicated that KCT-23ER reacted to E-rosetted cells was one of the MAb for investigate of $CD_2$ receptor positive cell subset in the Korean native cattle.
The detection of carbamate (carbofuran, carbaryl, benfracarb, thiodicarb, and methomil) and organophosphate (diazinon, cadusafos, ethoprofos, parathion-methyl, and chlorpyrifos) pesticide residues with very low detection limits was carried out using surface plasmon resonance (SPR) based equipment. The capacity to develop a portable SPR biosensor for food safety was also investigated. The applied ligand for the immunoassays was polyclonal goat anti-rabbit immunoglobulin (IgG) peroxidase conjugate. Concentration tests using direct binding assays showed the possibility of quantitative analysis. For ligand fishing to find a proper antibody to respond to each pesticide, acetylcholinesterase (AChE), and glutathione-S-transferase (GST) were tested. The reproducibility and precision of SPR measurements were evaluated. With this approach, the limit of detection for pesticide residues was 1 ng/mL and analysis took less than 11 min. Thus, it was demonstrated that detecting multi-class pesticide residues using SPR and IgG antibodies provides enough sensitivity and speed for use in portable SPR biosensors.
The purpose of the present study was to produce and characterize a monoclonal antibody against human ${\beta}_2$-adrenergic receptor. Male BALB/c mice were immunized with glutathione S-transferase (GST) fusion protein of the C-terminal portion of the human ${\beta}_2$-adrenergic receptor which was expressed in E.Coli. The immunized splenocytes were fused with myeloma SP2/0-Agl4 cells. The resulting hybridomas were screened for the production of a monoclonal antibody which can recognize human ${\beta}_2$-adrenergic receptor, and then subcloned by limiting dilution. The resulting monoclonal antibody was named as mAb$\beta$CO2. The mono-clonal antibody $\beta$CO2 was determined as IgM subtype and then purified by anti-mouse IgM-agarose affinity chromatography. The results of ELISA, Western blot, and immunocytochemistry showed that mAb$\beta$CO2 recognized human ${\beta}_2$-adrenergic receptor in the ${\beta}_2$-adrenergic receptor-GST fusion protein and human spider-moid carcinoma cell line A431 with highly specific immunoreactivity, The monoclonal antibody $\beta$CO2 may provide useful tools for the study of the $\beta$-adrenergic receptor of human and other species including rats.
Enteric colibacillosis has economically become an important disease of young animals as a result of increasing intensification of farrowing management. The objective of this experiment is to isolate fimbrial antigen from enterotoxigenic E. coli F41, to develop specific polyclonal IgY which can effectively neutralize or reduce the proliferation of pathogens in feed or living animal system, and to apply IgY technologies to animal industry. The results obtained were as follows: The molecular weight of the purified F41 antigen was 29,500 dalton on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels. Fimbrial antigen was confirmed by the western blot method. It was observed that after immunization the level of serum antibody titer of laying hen was shown in two weeks and gradually increased. The antibody titer in egg yolk appeared two weeks after it was shown in serum antibody. The titers of egg yolk antibody were gradually increased to the maximum level of 320,000 (antigen 50${\mu}g$/$m\ell$), 450,000 (antigen 200${\mu}g$/$m\ell$), and 320,000 (antigen 600${\mu}g$/$m\ell$). According to the results of specificity test by ELISA, the anti-F41 antibodies from chicken serum and egg yolk reacted only with ETEC F41 antigen. There was no cross reaction with other ETEC strains (K88, K99, and 987P). In vitro condition, as a result of antigen binding ability of yolk antibodies, bacterial concentration was rapidly decreased to $10^5$ CFU/$m\ell$ from $10^9$ CFU/$m\ell$ when 2${\sim}$4 mg/$m\ell$ of freeze dried WSF (water soluble fraction) was added.
Kim, Yoon-Hwan;Kim, Tae Hyeong;Kang, Min Soo;Ahn, Jin-Ok;Choi, Jung Hoon;Chung, Jin-Young
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.4
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pp.59.1-59.12
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2020
Background: Atopic dermatitis (AD) is a common chronic inflammatory skin disease. To understand AD, there have been many trials establishing AD animal models. Although various trials to establish AD animal models have been existed, even the mechanisms of AD in animal models are not enough clarified. Objectives: This study assessed AD characteristics induced in Nishiki-nezumi Cinnamon/Nagoya (Nc/Nga) mice following trinitrochlorobenzene (TNCB) treatment for different periods and house dust mite (HDM) treatment to compare each model's immunological patterns, especially with cytokine antibody array tool. Methods: In this study, we exposed Nc/Nga mice to TNCB or HDM extract to induce AD. Nc/Nga mice were divided into 4 groups: control, TNCB 2 weeks-treated, TNCB 8 weeks-treated, and HDM-treated groups. After AD induction, all mice were evaluated by serum immunoglobulin E (IgE) concentration and serum cytokine antibody assays, scoring of skin lesions, scoring of scratching frequency, and histological analysis. Results: The results showed significant differences between groups in serum IgE concentration, skin lesion scores, and scratching frequency. The analysis results for serum cytokine antibody arrays showed that in the TNCB 8 weeks- and HDM-treated groups, but not in the TNCB 2 weeks-treated group, expressions of genes related to the immune response were enriched. Among the histological results, the skin lesions in the HDM-treated group were most similar to those of AD. Conclusions: We confirmed that immunological pattern of AD mice was markedly different between HDM and TNCB treated groups. In addition, the immunological pattern was quietly different dependent on TNCB treated duration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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