Antioxidant properties have been proposed as a mechanism for the putative anti-inflammatory effects of phenolic compounds. To reveal the relationship between antioxidant activity and anti-inflammatory effects of various antioxidants, we measured 1, 1-diphenyl-2-picryhydrazyl(DPPH)-reducing activity and examined the inhibitory effects on LPS-induced inflammation-related gene expression in the BV2 microglial cell line. Lipopolysaccharide(LPS)(0.2 ${\mu}g/ml$) was used with or without antioxidants to treat cells, and the regulation of iNOS and cytokine gene expression was monitored using an RNase protection assay(RPA). Although, all tested antioxidants had similar DPPH-reducing activity and inhibited nitrite production, but the curcuminoid antioxidants(ferulic acid, caffeic acid, and curcumin) inhibited LPS-induced gene expression(iNOS, $TNF-\alpha,\;IL-1{\beta}$, IL-6, and IL-1 Ra) in a concentration-dependent manner. Other tested antioxidants did not exhibit the same effects; N-acetylcysteine(NAC) only began to suppress $IL-1{\beta}$ gene expression just below the concentration at which cytotoxicity occurred. Moreover, the antioxidant potency of curcuminoids appeared to have no correlation with anti-inflammatory potency. Only curcumin could inhibit LPS-induced microglial activation at a micromolar level. These data suggest that curcumin may be a safe antioxidant possessing anti-inflammatory activity.
Purpose: Curcumin is known to exert numerous biological effects including anti-inflammatory activity. In this study, we investigated the effects of curcumin on the production of interleukin-6 (IL-6) by murine macrophage-like RAW 264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide (LPS) from Prevotella intermedia, a major cause of inflammatory periodontal disease, and sought to determine the underlying mechanisms of action. Methods: LPS was prepared from lyophilized P. intermedia ATCC 25611 cells by the standard hot phenol-water method. Culture supernatants were collected and assayed for IL-6. We used real-time polymerase chain reaction to detect IL-6 mRNA expression. $I{\kappa}B-{\alpha}$ degradation, nuclear translocation of NF-${\kappa}B$ subunits, and STAT1 phosphorylation were characterized via immunoblotting. DNA-binding of NF-${\kappa}B$ was also analyzed. Results: Curcumin strongly suppressed the production of IL-6 at both gene transcription and translation levels in P. intermedia LPS-activated RAW 264.7 cells. Curcumin did not inhibit the degradation of $I{\kappa}B-{\alpha}$ induced by P. intermedia LPS. Curcumin blocked NF-${\kappa}B$ signaling through the inhibition of nuclear translocation of NF-${\kappa}B$ p50 subunit. Curcumin also attenuated DNA binding activity of p50 and p65 subunits and suppressed STAT1 phosphorylation. Conclusions: Although further study is required to explore the detailed mechanism of action, curcumin may contribute to blockade of the host-destructive processes mediated by IL-6 and appears to have potential therapeutic values in the treatment of inflammatory periodontal disease.
야생종 토마토의 자가불화합성에 관여하는 S RNase유전자의 조직특이적 발현 양상을 조사하기 위하여 $\textrm{S}_{11}$ 및 $\textrm{S}_{12}$ allele에 속하는 RNase 유전자의 Promoter영역에 대한 염기 서열을 비교 분석한 결과, 전사개시점에서 상류측으로 350-500bp사이에서 양쪽 allele의 Promoter간에 상동성을 나타내는 3부분과 direct repeat sequence를 발견하였다. Promoter영역에서 이러한 부분이 S RNase 유전자가 화주특이적으로 발현하는데 영향을 줄 것으로 예상하고, 이들 영역을 중심으로 6종류의 deletion fragment를 만들어 GUS 유전자에 연결하여, 토마토의 생식조직에 microprojectile bombardment를 수행하였다. 그 결과 토마토 자가불화합성에 관여하는 S RNase 유전자의 promoter는 TATA box를 포함한 127 bP만으로도 화주조직 특이적 발현을 조절할 수 있었다. 또한 S RNase 유전자의 promoter영역내에는 토마토 화변, 자방과 심피조직들에서 negative 혹은 positive로 유전자의 발현을 유도하는 부분이 발견되었다.
Background: Gastric cancer as one of the most important diseases affecting health in all worldwide. Current studies have confirmed associations of cytokine gene polymorphisms with the risk of gastric cancer development. The current research aimed to assess the association of IL-1B+3954 genotypes with the risk of gastric cancer in the Iranian population. Materials and Methods: This case-control study covered 49 gastric cancer patients compared to 53 cancer free individuals as a control group. Genomic-DNA extraction was carried out from bioptic samples of patients and peripheral blood of healthy volunteers. Polymorphism of IL-1B +3954 genotypes were analysed with a polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Results: The frequencies of IL-1B +3954 A1A1, A1A2 and A2A2 genotypes in healthy individuals were 26.4, 66 and 7.6 %, respectively. However, in gastric cancer patients, A1A1, A1A2 and A2A2 with 4.1, 51 and 44.9% were observed (p<0.05). Conclusions: The findings of our results show a positive association between the IL-1B+3954 genotype distribution and the risk of gastric cancer disease in the Iranian population.
Objectives: Obesity is an important cause of insulin resistance that leads to obese type 2 diabetes. Recently it has been found that obesity is associated with adipose tissue accumulation which causes systemic inflammation. In this study, we investigated effects of Inula helenium on the inflammation in high fat diet-induced insulin resistance mouse. Methods: Insulin resistance was induced in C57BL/6 male mice (19~21 g) on a 60% fat diet. Mice were divided into 3 groups (n=6) of normal, control and Inula helenium. After 12 weeks, body weight, FBS, oral glucose tolerance test (OGTT), serum level of insulin, epididymal fat pad, liver weight and the gene expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-6, interleukin (IL)-10 and cluster of differentiation (CD) 68 were measured. Also, adipose tissue macrophage was analyzed by fluorescence activated cell sorting. Results: Inula helenium significantly reduces oral glucose tolerance levels, insulin serum level and adipose tissue macrophage. Also Inula helenium increased IL-10 gene expression and decreased CD68 gene expression. Conclusions: These results show that Inula helenium has anti-insulin resistance and anti-inflammatory effects on a high fat diet-induced insulin resistance mouse model.
Schwann cells play an important role in peripheral nerve regeneration. Upon nerve injury, Schwann cells are activated and produce various proinflammatory mediators including IL-6, LIF and MCP-1, which result in the recruitment of macrophages and phagocytosis of myelin debris. However, it is unclear how the nerve injury induces Schwann cell activation. Recently, it was reported that necrotic cells induce immune cell activation via toll-like receptors (TLRs). This suggests that the TLRs expressed on Schwann cells may recognize nerve damage by binding to the endogenous ligands secreted by the damaged nerve, thereby inducing Schwann cell activation. To explore the possibility, we stimulated iSC, a rat Schwann cell line, with damaged neuronal cell extracts (DNCE). The stimulation of iSC with DNCE induced the expression of various inflammatory mediators including IL-6, LIF, MCP-1 and iNOS. Studies on the signaling pathway indicate that $NF-{\kappa}B$, p38 and JNK activation are required for the DNCE-induced inflammatory gene expression. Furthermore, treatment of either anti-TLR3 neutralizing antibody or ribonuclease inhibited the DNCE-induced proinflammatory gene expression in iSC. In summary, these results suggest that damaged neuronal cells induce inflammatory Schwann cell activation via TLR3, which might be involved in the Wallerian degeneration after a peripheral nerve injury.
HOX genes are transcription factors that play important roles in body patterning and cell fate specification during normal development. In previous study, we found aberrant overexpression of HOXB5 in breast cancer tissues and cell lines, and demonstrated that HOXB5 is important in regulation of cell proliferation, tamoxifen resistance, and invasiveness through the epithelial-mesenchymal transition (EMT). Although the relationship between HOXB5 and phenotypic changes in MCF7 breast cancer cells has been studied, the molecular function of HOXB5 as a transcription factor remains unclear. IL-6 has been reported to be involved in not only inflammation but also cancer progression, which is characterized by the increase of growth speed and invasiveness of tumor cells. In this study, we selected Interleukin-6 (IL-6) as HOXB5 putative downstream target gene and discovered that HOXB5 transcriptionally up-regulated the expression of IL-6 in HOXB5 overexpressing MCF7 cells. The upstream region (~1.2 kb) of IL-6 promoter turned out to contain several putative HOX consensus binding sites. Chromatin immunoprecipitation assay confirmed that HOXB5 directly binds to the promoter region of IL-6 and positively regulated the expression of IL-6. These data all together, indicate that HOXB5 promotes IL-6 transcription by actively binding to the putative binding sites located in the upstream region of IL-6, which enable to increase its promoter activity in MCF7 breast cancer cells.
Objectives : This study was performed to evaluate the effect of Securinega suffructicosa Rehder (SS) on osteoclast differentiation and gene expression. Methods : The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7. The results were summarized as followes. Results : SS decreased the number of TRAP positive cell in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of RANK, TNF${\alpha}$, and IL-6 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of iNOS and COX-2 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of Cathepsin K in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. Conclusions : It is concluded that SS might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression.
연구배경 : IL-8은 강력한 화학주성인자로서 결핵감염 부위로 염증세포들을 동원함으로서 결핵균에 대한 숙주의 방어기전에 있어서 중요한 역할을 한다. IL-8의 유전자의 발현에 있어서 NF-${\kappa}B$가 중요한 역할을 한다. 저자들은 결핵 감염시 폐상피세포가 NF-${\kappa}B$ 의존성으로 IL-8을 분비하는지 알아보고자 하였다. 방 법 : 말초혈액단핵구에 결핵균을 감염시키고 24시간 배양 후 배양상층액(CoMTB)을 얻었다. 결핵균, CoMTB로 자극한 A549 세포주의 IL-8 분비 정도를 ELISA 방법으로 측정하였다. CoMTB로 자극한 A549 세포주의 IL-8 mRNA 의 발현 정도를 RT-PCR로, $I{\kappa}B{\alpha}$의 분해를 western blot 분석으로, NF-${\kappa}B$의 핵이동과 DNA 결합은 electrophoretic mobility shift assay(EMSA)를 이용하여, 그리고 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의 전사활성은 luciferase reporter gene assay를 이용하여 측정하였다. 결 과 : A549 세포주를 CoMTB로 24시간 자극하여 얻은 배양액의 IL-8 농도는 $46.8{\pm}4.8\;ng/ml$로 분비하여 결핵균으로 직접 자극하였을 때의 $6.8{\pm}2.9\;ng/ml$보다 높았다. CoMTB로 A549 세포주를 자극하였을 때 IL-8 mRNA의 발현이 증가하였고, $I{\kappa}B{\alpha}$의 분해가 일어났으며, NF-${\kappa}B$의 핵이동과 DNA 결합이 일어났으며, NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의 전사활성이 증가하였다. 결 론 : 결핵병변에서 폐상피세포는 결핵균을 탐식한 단핵식 세포와의 상호작용에 의해 NF-${\kappa}B$ 의존성으로 IL-8을 분비한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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