Kang, Dong Woo;Choi, Soo Cheol;Kang, Jeong Eun;Park, Ji Sun;Lee, In Ah
인간식물환경학회지
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제24권1호
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pp.53-62
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2021
Background and objective: Dermatitis is a chronic disease accompanied by such symptoms as itching and dry skin. The environment and diet can aggravate dermatitis, so attention to skin care is essential. Colocasia esculenta is used in various manners and for different purposes, including with regard to inflammation, aging, and the digestive system. The anti-inflammatory effect of Colocasia esculenta water extract was confirmed using RAW 264.7 macrophages with regard to male ICR mice. Methods: In the case of the ICR mice, 5% 12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) was used to cause inflammation for 7 days, and 100 μL of Colocasia esculenta water extract and panthenol were administered orally for 10 days. In addition, RT-PCR, NO, ELISA was conducted. Results: As a result of reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) using RAW 264.7 macrophages stimulated with lipopolysaccharide (LPS), it was found that Colocasia esculenta water extract reduced the expression of inflammatory cytokines. As a result of hematoxylin and eosin (H&E) staining using mouse ear tissue, Colocasia esculenta water extract reduced ear thickness and showed an effect of suppressing ear edema. In addition, compared to the TPA-treated group, the Colocasia esculenta extract-treated group had reduced nitric oxide (NO) production by 18.23 μM and IL-13 production decreased by 136.55 pg/ml. Conclusion: Colocasia esculenta water extract has been shown to be effective in lowering inflammatory cytokine production. These results suggest that Colocasia esculenta water extracts can be used as natural products to treat dermatitis.
Kyeong Ah Jo;Kyeong Jin Kim;Soo-yeon Park;Jin-Young Jeon;Ji Eun Hwang;Ji Yeon Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권4호
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pp.493-499
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2023
In this study we evaluated the immune-enhancing effects of β-glucan, the main component of Euglena gracilis (Euglena), and Euglena on inflammatory factor expression in RAW264.7 macrophages and ICR mice with cyclophosphamide-induced immunosuppression. Macrophages were treated with β-glucan or Euglena for 48 h. The β-glucan and Euglena groups exhibited higher levels of inducible nitric oxide synthase, nitric oxide, and tumor necrosis factor (TNF)-α than the control (vehicle alone) group. Animals were fed saline and β-glucan (400 mg/kg body weight (B.W.)) or Euglena (400 or 800 mg/kg B.W.) for 19 days, and on days 17-19, cyclophosphamide (CCP, 80 mg/kg B.W.) was administered to induce immunosuppression in the ICR mouse model. CCP reduced the body weight, spleen index, and cytokine expression of the mice. To measure cytokine and receptor expression, splenocytes were treated with concanavalin A (ConA) or lipopolysaccharide (LPS) as a mitogen for 24 h. In vivo, ConA stimulation significantly upregulated the expression of interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-10, IL-12 receptor β1, IL-1β, and IL-2 in splenocytes from the β-glucan- or Euglena-treated groups compared with those in the splenocytes from the CCP-treated group; LPS stimulation increased the levels of the cytokines TNF-α, IL-1β, and IL-6 in splenocytes from the β-glucan- or Euglena- treated groups compared with those from the CCP-treated group, but most of these differences were not significant. These results demonstrate the effect of Euglena in ameliorating macrophages and immunosuppression in CCP-treated mice. Thus, Euglena has the potential to enhance macrophage- and splenocyte- mediated immune-stimulating responses.
본 연구는 긴볼레기말 추출물의 항고지혈증 효과를 조사하기 위해 ICR 생쥐에 Triton WR-1339(TX) 복강주사로 인위적인 고지혈증을 유발시킨 후 긴볼레기말 추출물(30mg/kg)를 복강주사하여 시간의 경과에 따른 간세포내에서의 지방 축적 변화를 조직화학적으로 관찰하였다. TX 주사후 그물구조의 세포질을 가진 간세포가 간엽 전체에서 관찰되었고, 일부 간소엽에서는 간세포 손상으로 인한 간세포판 소실이 나타났다. 또한 간세포내 지방축적도 증가하여 전체 간소엽의 간세포에서 지방의 과출현을 확인 할 수 있었고, 지방의 크기도 대조군에 비해 증가된 것으로 관찰되었다. 그러나 긴볼레기말 추출물 주사군에서는 그물구조의 세포질을 가진 간세포의 수가 TX 주사군에 비해 감소되었고, 대부분의 간소엽에서 정상적인 간세포판의 배열을 확인할 수 있었다. 간세포내의 지방 축적과 크기도 감소된 경향으로 관찰되었다. 이상의 결과로 볼 때 해조류 긴볼레기말 추출물은 고지혈증이 유발된 생쥐 간세포 내에서의 과도한 지방축적을 감소시키는 항고지혈증 효과을 하는 것으로 사료된다.
This study was undertaken to optimize enucleation and reconstitution methods for the production of cloned mice by somatic cell nuclear transfer Outbred ICR mouse oocytes at the metapahse- II stage were retrieved from female mice superovulated by PMSG and hCG. In Experiment 1, oocytes were enucleated in medium supplemented with cytochalasin B (CCB) of 3 levels (0, 7.5 or 15 $\mu\textrm{g}$/mL), and higher rate of encleation was obtained at 7.5 and 15 $\mu\textrm{g}$/mL than at $\mu\textrm{g}$/mL. In Experiment 2, oocytes enucleated in 7.5 $\mu\textrm{g}$/mL CCB-containing medium were reconstituted with different types of somatic cell by following methods; 1) cumulus cells by direct cell injection, 2) cumulus cells by electric fusion (1.25 kV/cm, 2 pulses for each 70 $mutextrm{s}$) or 3) STO cells by the electrofusion. Electrofusion of STO cells with enucleated oocytes yielded the greatest (P<0.05) rate of reconstitution without lysis (76%) than any other combinations. Although significant decrease in the rate of somatic cell introduction was found, the electrofusion of cumulus cells yielded better rate of reconstitution than direct injection (0 vs. 18%). In Experiment 3, the duration of electric stimulation for the fusion was changed to either 50 $mutextrm{s}$ or 90 $mutextrm{s}$, but no significant improvement of reconstitution efficacy was obtained. In conclusion, this study showed that ICR mouse oocytes could be used for the production of reconstituted oocytes and a fusion method of 1.25 KV/cm with 2 pulses using 570 cell was the optimal.
Objective: To observe the capability of fertilization and embryo development including blastocyst formation of the oocytes in simple media after thawing of the cryopreserved cumulus-free mouse oocytes by vitrification method. Methods: Oocytes were collected from 5 to 6 weeks old ICR female mice, and were denuded from the cumulus cells by 0.1% hyaluronidase. Recovered mature oocytes in study group were cryopreserved by vitrification method using EM grid for $5{\sim}7$ days. In brief, oocytes were exposed in dPBS containing 1.5 M EG and 5.5 M EG+1 M sucrose for 2.5 minutes and 20 seconds each, and then executed vitrification by plunging in LN2 after loading on EM grid. Thawing treated by exposure of 1, 0.5, 0.25 and 0.125 M sucrose solution for 2.5 minutes each in order and used for experiments. Spermatozoa aspirated form the epididymis of 12 weeks old ICR male mice were used for insemination after capacitation. T6 media containing 0.4% BSA were used for fertilization and development. Results: Survival and fertilization rates after thawing were 76.9% and 79.6% respectively. Fertilization rate was lower (p<0.005) than that of control group (92.9%). There was no difference in embryo developmental rates from 2-cell to morula, however, the blastocyst formation rate and mean cell numbers of blastocysts in study group (63.3%, $58.9{\pm}9.2$) were lower compared with those of control group (76.1%, $63.5{\pm}8.9$). Conclusion: Vitrification is an effective method for mouse mature oocyte cryopreservation with high survival and fertilization rate after thawing. And in simple media, fertilization rates and embryo development of frozen-thawed mouse oocytes are satisfactory.
The effect of Bu-Zhong-Yi-Qi-Tang (BZYQT) on the changes of ultraviolet (UV) light B radiation-induced apoptotic sunburn cell (SBC) and epidermal ATPase-positive dendritic cell (DC) in SKH1- hr or ICR mouse were investigated. The mice were treated with UVB (200 mJ/$cm^2$) and were sacrificed 24 h later. BZYQT (50 mg/kg of body weight) or vehicle (saline) was given i.p. at 36 and 12 h before irradiation, and 30 min after irradiation or BZYQT cream (0.2%) or cream base (vehicle) was topically treated at 24 h and 15 min before irradiation, and immediately after irradiation. The skin of SKH1-hr mouse prepared from the back of untreated mice exhibited about 0.3 SBC/cm length of epidermis, and 24 h after UV irradiation, the applied areas show an increased number of SBCs. But the frequency of UVB-induced SBC formation was reduced by intraperitoneal injection of BZYQT extract (p < 0.01). The numbers of DC in normal ICR mouse were 628.00 ${\pm}$ 51.56 or 663.20 ${\pm}$ 62.58 per $mm^2$ of ear epidermis. By 1 day after UVB treatment, the number of ATPase-positive cells/$mm^2$ were decreased by 39.0% or 27.1% in i.p. or topical application group with vehicle. Treatment of BZYQT was associated with increase of 33.9% in i.p. group (p < 0.05) or 2.7% in topical application group in the number of ATPase positive cells compared with the irradiation control group. The results presented herein that BZYQT administration could reduce the extent of skin damages produced by UVB.
마크로파지의 활성을 조사하기 위해 carbon clearance time을 조사한 결과 AEY 처리구가 control이나 CEY 처리구에 비해 짧았다. 특히 AEY 500$\mu\textrm{g}$ 처리에서 carbon clearance 시간이 5분으로 control에서 9.42분, CEY(250$\mu\textrm{g}$ 처리)에서 9.01분보다 유의성 있는 감소를 보였다. AEY 처리에 의해 응집소가와 용혈소가가 다소증가되었다. SRBC처리 1일째와 3일째에 250$\mu\textrm{g}$ 처리구를 비교해 보면, control, CEY, AEY의 응집소가는 각각 5.50, 5.63, 6.00 및 5.25, 5.38, 5.50로 용혈소가는 각각 4.75, 5.38, 5.50 및 4.25, 5.63, 5.63으로 AEY 처리구가 control, CEY 처리구에 비해 면역 활성이 있었지만 유의성은 없었다.
The effects of embryo number and incubation volume on the development of mouse embryos were evaluated. The growth rate of two-cell mouse embryos to attached blastocyst stage and the growth rate of blastocysts to early somite stage were assessed after culture in different incubation volumes and embryo densities. Embryos were collected from ICR female mice superovulated with pregnant mare serum gonadotropin and human chorionic gonadotropin and mated by ICR males. In experiment 1, groups of one, five, ten, twenty 2-cell embryos were cultured in 10-, 50-, 500-, 1000-${\mu}l$ drops of BWW media under mineral oil at $37^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_{2}$ and 95% air. As the incubation volume decreased, significantly (p<0.05) higher rates of embryos reached morular and blastocyst stage on day 3 and 4 culture, respectively. In experiment 2, groups of one, five, ten, twenty blastocysts were cultured in 1- and 2-ml volumes of CMRL 1066 media under same condition as in experiment 1. However the reverse was the result. Decreasing the number of embryos incubated per volume from 1 to 20 significantly (p<0.05) increased the number of blastocysts reaching the late egg cylinder (LEC) and early somite (ES) stage on day 6 and 8 culture, respectively, regardless of incubation volume. Blastocysts cultured in 2ml had higher (p<0.05) development rates to LEC and ES stage on day 6 and 8 culture, respectively, than embryos cultured in 1ml. Our results suggest that the effects of embryo number and incubation volume on the development of mouse embryos are stage specific and the shifting point was between hatching and EEC stage.
The effects of red ginseng (RG) on the changes of ultraviolet (UV) light B radiation-induced apoptotic sun-burn cell (SBC) and epidermal ATPase-positive dendritic cell (DC) in SKH 1-hr or ICR mouse were investigated. The mice were treated with UVB ($200mJ/cm^2$) and were sacrificed 24 hours later. RG (50 mg/kg of body weight) or vehicle (saline) was given i.p. at 36 and 12 hours before irradiation, and 30 minutes after irradiation. RG cream (0.2%) or cream base (vehicle) was also topically treated at 24 hours and 15 minutes before irradiation, and immediately after irradiation. The skin of SKH 1-hr mouse prepared from the back of untreated mice exhibited about 0.3 SBC/cm length of epidermis, and 24 hours after UV irradiation, the applied areas show an increased number of SBCs. But the frequency of UVB-induced SBC formation was significantly reduced by intraperitoneal injection of RG extract. The numbers of DC in normal ICR mouse were $628.00{\pm}51.56\;or\;663.20{\pm}62.58\;per\;mm^2$ of ear epidermis. By 1 day after UVB treatment, the number of ATPase-positive $cells/mm^2$ were decreased by 39.0% or 27.1% in i.p. or topical application group with vehicle. The frequency of UVB ($200mJ/cm^2$)-induced DC decrease was reduced by treatment of RG as 31.3% in i.p. group and 22.4% in topical application group compared with the irradiation control group. The results presented herein that RG administration could reduce the extent of skill damages produced by UVB.
본 연구는 DSS 유도 대장염 마우스 모델에서 MT열수 추출물의 항대장염 효능을 확인하고자 ICR 마우스에 5일 동안 3% DSS와 함께 MT추출물을 경구투여한 후 대장염의 임상적 증상 및 염증 지표들을 분석하였다. 그 결과 MT추출물의 투여는 DSS에 의해 유도된 마우스 대장염 증상의 지표들, 즉 체중 감소와 혈성 설사를 포함한 질병 활성도, 대장점막증식, 그리고 $TNF-{\alpha}$와 IL-6를 포함한 염증성 사이토카인량 증가를 개선시키는 것으로 나타났다. 또한 DSS에 의해 증가된 Cox-2, iNOS, p-Erk 등 염증 지표 단백질의 발현도 MT추출물 투여군에서 감소되었다. 이러한 결과들은 MT추출물이 항대장염 효능이 있음을 제시하며 향후 MT추출물에 포함되어 있는 생리활성물질의 효능과 관련기작이 규명된다면 상지를 물로 우려내어 섭취하는 상지차 형태의 대장염 예방 혹은 개선용 건강식품으로의 개발을 기대해 볼 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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