국가종합목록은 한 국가내 모든 도서관의 서지 및 소재정보를 제공하여 도서관간 자료의 공동활용을 가능하게 하는 정보하부구조로 최근 여러 나라에서는 정보검색 표준인 Z39.50 프로토콜을 응용한 국가종합목록 프로젝트가 진행되고 있다. 국내의 경우 공공, 대학, 전문도서관 등 관종별 종합목록데이터베이스 구축이 각기 진행되고 있으며 이러한 국내 현실여건에서는 이미 개별적으로 구축된 종합목록 데이터베이스들을 통합하는 방식보다는 Z39.50 프로토콜을 이용한 분산 검색으로 논리적 가상 국가종합목록을 구축하는 것이 바람직하다. 따라서, 물리적 통합 형태인 중앙화 방식과 Z39.50 프로토콜을 통한 분산화 방식이 혼합된 하이브리드 방식을 국가종합목록 구축 방안으로 제안하고 구체적으로 국가종합목록 구축의 노드가 되는 국가서지기관과 종합목록 운영기관의 역할과 협력방안을 제안한다.
본 논문은 시스톨릭 어레이와 덧셈기 트리를 조합한 하이브리드 구조를 갖는 MPEG-4 인코더용 전역 탐색 블록 정합 움직임 추정 회로를 제안한다. 제안된 회로는 적은 수의 클럭 싸이클로 움직임 추정을 할 수 있도록 시스톨릭 어레이를 활용하고, 필요한 회로 자원을 줄이기 위해서 덧셈기 트리를 활용한다. 1/2화소 움직임 추정을 위한 보간 회로는 6개의 덧셈기, 4개의 뺄셈기, 10개의 레지스터로 구성하였으며, 자원 공유 및 효율적인 스케줄링 기법을 통하여 성능을 향상시켰다. 정수화소 및 1/2 화소를 위한 움직임 추정 회로를 Verilog HDL을 사용하여 RTL에서 설계하였다. 130nm 표준 셀 라이브러리를 사용하여 합성한 논리 수준 회로는 218,257 게이트로 구성되었으며, D1($720{\times}480$) 이미지를 초당 94장 처리할 수 있다.
선행연구에서 본 연구자는 IEX-1 단백질이 난소 암세포에서 세포사멸(apoptosis)을 유도하는 기능을 수행함을 확인하였으나, 세포사멸과 세포생존의 여러 단계에서 어떠한 신호전달 체계로 IEX-1이 작용하는지는 정확히 알지 못하고 있다. 따라서 IEX-1 단백질과 결합하는 새로운 단백질을 찾기 위해 yeast two-hybrid system을 이용하였다. 그 결과 IEX-1이 여러 다양한 인간 암 세포에서 세포사멸을 유도하는 CATHEPSIN B 단백질과 결합함을 밝혔다. 본 연구에서는 리소좀 프로테아제의 일원인 CATHEPSIN B 단백질과 IEX-1 단백질의 결합을 면역침강법과 western blot 분석으로 확인하였다. 그러므로 이 결과들을 통해서 IEX-1과 CATHEPSIN B는 세포 내에서 서로의 기능에 영향을 미칠 것으로 예상되며, 세포사멸을 유도하는 IEX-1 단백질이 lysosome-mediated apoptotic pathway에 관여할 가능성을 시사한다.
Ankyrins are a ubiquitously expressed family of intracellular adaptor proteins involved in targeting diverse proteins to specialized membrane domains in both the plasma membrane and the endoplasmic reticulum. Recently, the studies with C-terminus of ankyrins have identified that ankyrin-B is capable of interacting with Hsp40 and sAnkl is capable of interacting with obscurin and titin, but the function of C-terminal domain of ankyrin-G remains unknown. To identify proteins interacting C-terminus of ankyrin-G, we used the C-terminus of ankyrin-G as a bait for a yeast two-hybrid screen of brain cDNA library. Approximately 1.33$\times$l0$^6$ transformants were screened, of which 13 positive clones were obtained as determined by activation of HIS3, ADE2 and MELl reporter genes. Sequence analyses of these 13 plasmids revealed that cDNA inserts of 13 colonies showed highly homologous to 11 genes, including 5 known (i.e., Na$^+$/K$^+$ ATPase $\beta$1, SERBPl, UTF2, cytochrome C oxidase and collagen IV $\alpha$2) and 6 unknown genes. The evaluation of the proteins that emerge from these experiments provides a rational approach to investigate the those proteins significant in interaction with ankyrin-G.
Mammalian polo-like kinase 1 (Plk1) acts at various stages in early and late mitosis. Plk1 localizes at the centrosome and maintains this position through mitosis. Thereafter Plk1 moves to the kinetochore and midbody region, important sites during chromosome separation and cytokinesis. The catalytic domain of Plk1 is in the N-terminus region, whereas the non-catalytic region in the C-terminus of Plk1 has a conserved motif, named the Polobox. This motif is critical for Plk localization. EGFP proteins fused with the N-terminus and C-terminus of Plk1 localize in the nucleus and centrosomes, respectively. The core sequences of the polo-box (50 amino acids) also localize in Plk1 target organelles. To screen for domain-specific target proteins of Plk1, we constructed an N-terminal domain and a tandem repeat polo-box motif, and used them as templates in a yeast two-hybrid screen. The HeLa cell cDNA library indicated several proteins including the centrosome/kinetochore components or regulators, to be characterized as positive clones. Through in vitro protein binding analyses, we confirmed an interaction between these proteins and Plk1. The data reported from this study indicate that the N- and C- termini of Plk1 may function through recruitment and/or activation of domain-specific target proteins in dividing cells. Additionally, tandem repeats of the conserved core motif of the polo-box are sufficient for targeting and may be useful as a centrosome/kinetochore-specific targeting peptide.
Taraxacum coreanum, known as the native Korean white dandelion, has been historically used in traditional medicine due to its various therapeutic properties. However, the specific benefits and mechanisms of white dandelion in alleviating particular symptoms or diseases remain uncertain due to the complexity of its phytochemical profile. In this study, we aimed to elucidate the phytochemical profiles of methanolic extracts of different parts of the white dandelion (flower, leaf, stem, and root) using hybrid ion-mobility Q-TOF MS. Using the trapped ion mobility-based PASEF technique, 3715 and 2114 molecular features with MS2 fragments were obtained in positive and negative ion modes, respectively, and then a total of 360 and 156 phytochemical compounds were annotated by matching with a reference spectral library in positive and negative ion modes, respectively. Subsequent feature-based molecular networking analysis revealed the phytochemical differences across the four different parts of the white dandelion. Our findings indicated that the methanolic extracts contained various bioactive compounds, including lipids, flavonoids, phenolic acids, and sesquiterpenes. In particular, lipids such as linoleic acids, lysophosphatidylcholines, and sesquiterpenoids were predominantly present in the leaf, while flavonoid glycosides and lysophosphoethanolamines were notably enriched in the flower. An assessment of the total phenolic content (TPC) and total flavonoid content (TFC) of the methanolic extracts revealed that the majority of phytochemicals were concentrated in the flower. Interestingly, despite the root extract displaying the lowest TPC and TFC values, it exhibited the highest radical scavenging rate when normalized to TPC and TFC, suggesting a potent antioxidant effect. These findings and further investigations into the biological activities and medicinal potential of the identified compounds, particularly those exclusive to specific plant parts, may contribute to the development of novel therapeutic agents derived from white dandelion.
RAD6 in yeast mediates postreplication DNA repair and is responsible for DNA-damage induced mutations. RAD6 encodes ubiquitin-conjugating enzyme that is well conserved among eukaryotic organisms. However, the molecular targets and consequences of their ubiquitination by Rad6 have remained elusive. In Aspergillus nidulans, a RAD6 homolog has been isolated and shown to be an allele of uvs). We screened a CDNA library to isolate UVSJ-interacting proteins by the yeast two-hybrid system. JIPA was identified as an interactor of UVSJ. Their interaction was confirmed in vitro by a GST-pull down assay. JIPA was also able to interact with mutant UVSJ proteins, UVSJl and the active site cysteine mutant UVSJ-C88A. The N- and the C-terminal regions of UVSJ required for the interaction with UVSH, a RAD18 homolog of yeast which physically interacts with Rad6, were not necessary for the JIPA and UVSJ interactions. About 1.4 kb jipA transcript was detected in Northern analysis and its amount was not significantly increased in response to DNA-damaging agents. A genomic DNA clone of the jipA gene was isolated from a chromosome I specific genomic library by PCR-sib selection. Sequence determination of genomic and cDNA of jipA revealed an ORF of 893 bp interrupted by 2 introns, encoding a putative polypeptide of 262 amino acids. JIPA has 33% amino acid sequence identity to TIP41 of Saccharomyces cerevisiae which negatively regulates the TOR signaling pathway.
LBH is a transcription factor as a candidate gene for CHD associated with partial trisomy 2p syndrome. To identify potential LBH-interacting partners, a yeast two-hybrid screen using LBH as a bait was performed with a human heart cDNA library. One of the clones identified encodes ${\alpha}B$-crystallin. Co-immunoprecipitation and GST pull-down assays showed that LBH interacts with ${\alpha}B$-crystallin, which is further confirmed by mammalian two-hybrid assays. Co-localization analysis showed that in COS-7 cells, ${\alpha}B$-crystallin that is cytoplasmic alone, accumulates partialy in the nucleus when co-transfected with LBH. Transient transfection assays indicated that overexpression of LBH or ${\alpha}B$-crystallin reduced the transcriptional activities of p53 and p21, respectively, Overexpression of both ${\alpha}B$-crystallin and LBH together resulted in a stronger repression of the transcriptional activities of p21 and p53. These results showed that the interaction of LBH and ${\alpha}B$-crystallin may inhibit synergistically the transcriptional regulation of p53 and p21.
본 연구는 온라인목록에서 효율적으로 RDA 자원유형 디스플레이 방안을 마련하기 위한 것이다. 연구방법으로는 문헌조사 및 RDA 자원유형 테스트 및 선호도 설문조사를 실시하였다. RDA 자원유형 디스플레이를 위한 방안으로 첫째, 기존 자원유형에서 RDA 자원유형으로 데이터 변환이 필요하며, 이를 위해 GMD 및 자체 자원유형코드를 사용하여 변환하되, 리더/06, 007, 008 태그의 정보를 사용하여 변환하는 방안을 제안하였다. 둘째, 한국의 목록규칙 환경에 맞게 RDA 자원유형 용어의 변경과 이를 33X 서브필드 ${\blacktriangledown}9$에 기술하고, 구체적인 자원유형을 표현하기 위해 34X 태그를 디스플레이하는 것을 제안하였다. 셋째, 내용유형, 수록매체유형을 각각 개별적으로 표현하는 방법과 통합하여 디스플레이하는 방식을 제시하였다. 넷째, 이용자 측면에서 자원유형 아이콘 개발을 위해 336, 338 태그의 정보를 바탕으로 리더/07 서지수준의 정보, 008/30-31 녹음자료의 내용, 34X의 정보를 활용할 것을 제안하였다. 본 연구에서 제시한 RDA 자원유형의 디스플레이 방안은 온라인목록에서 RDA 자원유형의 활용가능성을 증대시키고, 이용자에게 자원유형의 이해를 증대시킬 것이다.
In this study, a Korean native cattle strain (Hanwoo) evidencing high performance in terms of both meat quality and quantity was employed in the generation of 150,000 BAC clones with an average insert size of 140 kb, and corresponding to about a 6X coverage of bovine chromosomal DNA. The BAC clones were pooled in a mini-scale via three rounds of a pooling protocol, and the efficiency of this pooling protocol was evaluated by testing the accuracy of accessibility to the positive clones, via a PCR-based screening method. Two sets of primers designed from each of two known genes were tested, and each yielded 2 or 3 positive clones for each gene, thereby indicating that the BAC library pooling system was appropriate with regard to the accession of the target BAC clones. Analyses of $3.3{\times}10^6$ base pairs obtained from the 7,090 BAC end sequence (BES) showed that 34.88% of the DNA sequence harbored the repetition sequence. Analysis of the 7,090 BES to the $1^{st}$ and $2^{nd}$ generation radiation hybrid map of the cattle genome, using the COMPASS program designed for the construction of a cattle-human comparative mapping, resulted in the localization of a total of 1,374 clones proximal to 339 $1^{st}$ generation markers, and 1,721 clones proximal to 664 $2^{nd}$ generation markers. Collectively, the BAC library and pooling system of the BAC clones from the Korean cattle, coupled with the chromosome-localized BAC clones, will provide us with novel tools for the excavation of desired clones for genome mapping and sequencing, and will also furnish us with additional information regarding breed differences in cattle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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