Objectives : The purpose of this study was to investigate antiaging and antioxidant effects on cultured human skin fibroblast with supercritical fluid extracts of Dendropanax morbifera, Corni fructus and Lycii Fructus. Methods : Supercritical fluid extraction (SFE) technique was applied to extract from three medicinal plants including stem of Dendropanax morbifera, Corni fructus and Lycii Fructus. Antioxidant activity of extract was evaluated by two different assays as 2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging and super oxide dismutase (SOD) like activities. These extracts were tested for cell viability on HS68 skin fibroblast by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay. We investigated the effects of Ultraviolet-B irradiation on cytotoxicity, type 1 collagen, elastin level and oxidative damage in cultured human skin fibroblast (HS68). Recently, many studies have reported that elastin is also involved in inhibiting or repairing wrinkle formation, although collagen is a major factor in the skin wrinkle formation. Results : The extracts obtained dose-dependently increased the scavenging activity on DPPH radical scavenging activity and SOD like activity. The supercritical fluid extracts of complex herbal medicine showed low cytotoxicity as more than 100% cell viability in 100ppm/ml concentration. HS68 fibroblasts were survived 70% at $120mJ/cm^2$ UVB irradiation and treated tumor necrosis factor (TNF)-alpha. The levels of aging factors and cytotoxicity were decreased by supercritical fluid extract of complex herbal medicine. Conclusions : These results suggest that supercritical fluid extracts may have value as the potential antioxidant and antiaging medicinal plant.
가잠과 천잠 및 작잠의 실크 단백질 분획물로부터 피부섬유아세포에 대한 증식 효과를 알아본 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 가잠 및 천${\cdot}$작잠 단백질로부터 다양한 분자량대의 실크 단백질을 순수 분리 분획화 하여 사람 피부세포(human skin fibroblast; CCD-986sk)에 기계적 상처를 준 후 처리한 결과, 평균분자량(Mw)이 300-500 및 950-1500 분획군이 세포 증식에 뛰어난 효과가 있음을 확인${\cdot}$선발하였다. 2. 가잠의 경우 평균 분자량 590(BM-1), 1400(BM-2)에서, 천잠은 340(AY-1), 940(AY-2), 작잠에서는 300(AP-1), 1440(AP-2)에서 $10\;{\mu}g/ml$의 농도로 처리했을 경우 피부섬유 아세포의 증식이 무처리구에 비하여 40% 이상의 증식 효과를 갖았다. 또한 유효 농도 범위에서 대식세포인 RAW 264.7 세포에 대해서는 세포독성을 지니지 않았다. 3. 아미노산 조성에 있어 저분자량 AY-1 분획의 전아미노산 및 유리아미노산은 Tyr 함량이 매우 높게(25-48 g/100g)나타났으며, 작잠의 저분자 분획인 AP-1에서는 Lys 함량이 높게(5.2 g/100g) 나타남을 확인하였다. 4. 동일한 실크 단백질일 경우 저분자량 분획물에서 피부 세포 증식에 좀 더 효과적이였다.
${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA) is an endogenous metabolite formed in the mitochondria from succinyl-CoA and glycine, and plays a key role in the living body as an intermediate of the compound in the porphyrin biosynthesis pathway. ALA has been commonly used in photodynamic therapy for several years, because ALA is of interest as a biodegradable mediator, a growth regulator, and an effective agent used in dermatology. Here, we determined which ALA derivatives were the most effective for the inhibition of the cell proliferation and growth of human fibroblast. As a result, we found that the treatment of ALA derivatives including ALA, ALAP (ALA phosphate salt), MAL (Methyl 5-aminolevulinate hydrochloride salt), PBGL (phophobilinogen lactam) and PBGH (phophobilinogen-HCl) could attenuate cell proliferation of human fibroblast cells. Among them, PBGH was the most effective derivative. In addition, PBGH treatment could induce mitochondrial membrane depolarization, leading to cell death of human fibroblast. These results suggest that mitochondrial membrane depolarization induced by ALA and PBGH treatment might be responsible for inhibition of cell proliferation and death. Taken together, our results propose the possibility that PBGH can be used as one of the effective drugs in human skin disease, psoriasis.
In vitro and in vivo studies have reported the induction of matrix metaloproteinase (MMP)-1 in the fibroblasts by ultraviolet (UV) A irradiation. We constructed the skin equivalent model using HaCaT cells as keratinocytes and human neonatal dennal fibroblasts as fibroblasts in the present study. The induction of MMP-l in the fibroblasts was confirmed immunohistochemically 6 hours after UVA irradiation using this model. This model was simply composed of human keratinocytes and fibroblasts. To our knowledge, there have been a few papers concerning the skin equivalent model in the field of photobiology. The effect of UVA exposure to fibroblasts through keratinocytes was examined using this model. The cross-talk can be examined between keratinocytes and fibroblasts. This model can be a useful tool in the field of photobiology.
Kim, Dong-Hwan;Cho, Hyeon;Kang, Kyung-Koo;Ahn, Byoung-Ok;Kang, Soo-Hyung;Kim, Won-Bae
Biomolecules & Therapeutics
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제7권1호
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pp.14-21
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1999
The immunogenicity of the recombinant human basic fibroblast growth factor (rh-bFGF) was investigated by tests for active systemic anaphylaxis (ASA), passive cutaneous anaphylaxis (PCA), passive hemagglutination (PHA) and guinea pig maximization test (GPMT) in mice or guinea pigs. Guinea pigs were sensitized with rh-bFGF ($100-1000\;\mu\textrm{g}/kg$) or rh-bFGF-CFA mixture ($1000\;\mu\textrm{g}/kg$). All animals sensitized with rh-bFGF alone or mixture with CFA showed symptoms of anaphylactic shock. IgE antibodies to rh-bFGF were detected in sera obtained from rh-bFGF and rh-bFGF-Alum ($1000\;\mu\textrm{g}/kg$) sensitized mice, indicating that rh-bFGF has immunogenicity eliciting potential. IgG and/or IgM antibodies to rh-bFGF were also detected in all the sera obtained from sensitized mice by PHA. In the GPMT for delayed type skin reaction, no skin reaction was observed in sensitized guinea pigs after intradermal injection and dermal application of 0.01% rh- bFGF. However, these positive reactions were consistent with the results of another rh-bFGF, showing that rh- bFGF is a heterogenous protein to rodents. Considering the fact that rh-bFGF is a genuine human protein of which structure is identical to the endogenous human bFGF, it is thought that rh-bFGF is rarely associated with immunological problems in clinical use.
Background: Ginseng has been used as a traditional medicine and functional cosmetic ingredients for many years. Recent studies have focused on the potential biological effects of the ginseng berry and its ingredients. (+)-Syringaresinol (SYR) is enriched in ginseng berry and its beneficial effects on the skin have been recently reported. However, little is known about the its effects on the wound healing process of skin. Methods: Here, we evaluated the skin wound healing effect of (+)-SYR using the human fibroblast Hs68 cell and ex vivo pig and human skin tissue model. Scratch wound test and hydrogen peroxide (HPO) induce chemical wound model were employed. Results: (+)-SYR promoted the migration and proliferation of Hs68 cells without significant cytotoxicity at the tested concentrations. Especially, in ex vivo pig and human skin tissue, HPO-induced chemical wound was recovered almost completely by (+)-SYR. In line with the finding in Hs68, the protein expression levels of TGF-β and PCNA, a proliferation marker were increased, demonstrating the beneficial effects of (+)-SYR on skin wound repair. Conclusion: Collectively, we demonstrated that (+)-SYR from ginseng berry, can enhance the wound healing effect by accelerating cell proliferation and skin regeneration, suggesting the potential utility of (+)-SYR for skin wound repair.
In order to evaluate on the effect of kaempferol on the cytotoxicity of oxygen tree radicals, XTT assay was performed to determine the cell viability after skin fibroblasts derived from human (Detroit 51) that were treated with various concentrations of hydrogen peroxide $(H_2O_2)$. And also, the effect of kaempferol on the cytotoxicity induced by H202 that was examined by cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) activity and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity in these cultures. $H_2O_2$ decreased cell viability in dose-dependent manner in these cultures and the $XTT_{90}\;and\;XTT_{50}$ values were determined at concentration of $35{\mu}M\;and\;90{\mu}M$ of $H_2O_2$ after skin fibroblasts derived from human were treated with $15{\sim}90{\mu}M$ of $H_2O_2$ for 6 hours, respectively. $H_2O_2$ was highly toxic on cultured skin fibroblasts derived from human by toxic criteria of Brenfreund and Puerner (1984). In the protective effect of kaempferol on $H_2O_2$-induced cytotoxicity, kaempferol increased DPPH radical scavenging activity and significantly decreased LDH activity. From these results, it is suggested that oxygen tree radical, $H_2O_2$, was highly toxic on cultured skin fibroblasts derived from human, and also kaempferol of flavonoid showed the protection on $H_2O_2$-induced cytotoxicity.
In order to evaluate on the cytotoxicity of methyl mercury (MM) and antioxidant effect of phenolic compound, poncirin against MM-induced cytotoxicity, XTT assay was performed to determine the cell viability after human skin fibroblasts (Detroit 51) were grown in the media containing various concentrations of methylmercuric chloride (MMC). And also, the antioxidant effect of poncirin on the cytotoxicity induced by MMC was examined by cell viability and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity in these cultures. MMC decreased cell viability in dose-dependent manner in these cultures and the midcytotoxicity value was determined at concentration of 30 ${\mu}M$ MMC after human skin fibroblasts were treated with $10\sim50{\mu}M$ MMC for 72 hours, respectively. MMC was highly toxic on cultured human skin fibroblasts by toxic criteria. MMC-mediated cytotoxicity was related with oxidative stress by the diminution of toxic effect according to the treatment of vitamin E. In the antioxidant effect of poncirin, it showed vitamin E-like DPPH radical scavenging activity at 90 ${\mu}g/ml$ poncirin and also, remarkably increased cell viability compared with MMC-treated group. From these results, it is suggested that MMC-mediated cytoxicity was highly toxic and was related with oxidative stress in cultured human skin fibroblasts, and also phenolic compound such as poncirin showed the protection on MMC-induced cytotoxicity by antioxidant effect in these cultures.
In vitro cell culture system has been proposed as a promising alternative model to in vivo skin irritation test. These studies were performed to screen the cytotoxicity effects of surfactants using normal human skin fibroblasts. Cell membrane integrity assessed by the leakage of lactate dehydrogenase (LDH) and mitochondrial integrity by MTT [3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromides reduction test were affected in a dose dependent manner. The irritation potential of surfactants to human skin patch test, and the changes of capillary permeability by rabbit intradermal safety test were assessed as in vivo methods. Our results suggest that LDH leakage assay and MTT reduction test using cultured human fibroblasts could be predictive for the irritancy of various surfactants in human, and LDH assay is superior correlated with in vivo test (r=0.886) to MTT test with in vivotest (r=0.757).
In this study. an efficacy study of Portulaca Extract (PE) and ${\beta}$ -glucan. candidates for cosmetic additives. was pedormed using artificial skin model (AS). The AS consists of collagen gel matrix populated by ATCC human skin fibroblast cell line that is overlaid with epidermal human skin keratinocyte cell line. Cytotoxicity and anti - inflammatory activity of PE and ${\beta}$ -glucan were assessed using monolayer and AS models by measuring cell viability and the secretion of interleukin -1 ${\alpha}$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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