A lectin was purified from Allomyrina dichotoma (ADL) by physiological saline extraction, ammonium sulfate fractionation, anion exchange column chromatography on DEAE Sephadex A-50 and gel filtration column chromatography on Sephadex G-200. Several biochemical properties of ADL were characterized as follows: ADL from gel filtration column chromatography showed single band on SDS-PAGE. ADL agglutinated the erythrocytes of rabbit and human A, B, O, AB. Agglutinability was relatively stable at basic pH, and was stable at temperature below $40^{\circ}C$. Agglutinability was not affected by metal ions and EDTA. This lectin was proved to be a glycoprotein which contains 0.47% of sugars. The molecular weight of ADL was estimated to be 97,000 dalton by SDS-PAGE. By amino acid analysis, ADL exhibited high amounts of aspartic acid. The lectin's immunomodulating effect was measured as cytokine production. The productions of 5 cytokines $(IL-1{\alpha},\;IL-2,\;IL-6,\;IFN{\gamma}\;and\;TNF{\alpha})$ from peripheral blood mononuclear cells were measured by ELISA. The lectin induced the highest secretion of IL-2 at 8 hr, $TNF{\alpha}$ at 4 hr, and $IFN{\gamma}$ at 24hr, respectively. These results suggest that ADL can elicit the production of detectable cytokines from PBMC.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.345-353
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1986
Authors studies on the isolation of non-sucrose fermentation Vibrio species such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus and V. damsela from sea water, shellfishes and various algae at Ulleung island in the east of Korea on summer in 1985. Authors carried out test for isolated strains to biochemical characteristics, halophilism, hemolysis and serological reaction. The results obtained were as follows: 1. Strains isolated from total specimens were 25 strains of V. parahaemolyticus, 2 strains of V. vulnificus and 1 strain of V. damsela, respectively. 2. Isolated frequency of Vibrio species from sea water and marine products was lower than on specimens in the southern sea of Korea from 1980 to 1985. 3. On hemolysis reaction on blood agar media using human and rabbit erythrocytes, 14 strains among 25 strains of V. parahaemolyticus isolated were positive, and V. vulnificus and V. damsela were positive, respectively. 4. The distributions of serotypes of V. parahaemolyticus isolated were from O1 group to O10 group, and from K 10 to K 69. The results of K serotypes were as follows ; serotype K 10 and K 33 were 2 strains, serotype K 59 and K 69 were 1 strain, respectively. And 2 strains of V. vulnificus isolated were not agglutinated by antiserum of V. vulnificus. Therefore, the probability is that 2 strains of V. vulnificus isolated were other serotypes distributed on sea weater and marine products of Ulleung island of Korea.
Kim, Jin-Kyoung;Lee, Ju-Un;Kim, Woong-Hee;Park, Yoon-Kyung;Hahm, Kyung-Soo;Kim, Yang-Mee
Journal of the Korean Magnetic Resonance Society
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v.13
no.1
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pp.27-34
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2009
HP (2-20), a 19-residue peptide derived from the N-terminus of Helicobacter pylori Ribosomal Protein L1, has antimicrobial activity but is not cytotoxic to human erythrocytes. Previously, we have synthesized several analogue peptides to investigate the effects of substitutions on the structure and antimicrobial activity. Substitution of $Gln^{16}$ and $Asp^{18}$ with Trp (Anal 3) caused a dramatic increase in bacterial and fungal lytic activities. In this study, analogue peptides were synthesized to investigate the effects of substitution of Gin and Asp with Phe (Anal 6) or Tyr (Anal 7) in HP (2-20) on its structure and antimicrobial activity. Substitution of Gin and Asp with hydrophobic aromatic residues at position 16 and 18 of HP (2-20) caused increase in antibiotic activity without hemolytic effect. Substitution of Gin and Asp with Trp and Try increased antibiotic activity of HP (220) twice more compared to substitution with Phe. The tertiary structures of Anal 6 and Anal 7 in SDS micelles has been investigated using NMR spectroscopy. The structures revealed that substitutions of the aromatic residues at C-terminus resulted in longer and well defined alpha-helix and improved their antibacterial activities
Water transport is mediated by two distinct pathways, diffusional and channel-mediated water transport. The first molecular water channel was identified from human erythrocytes in 1992. Genetically-related proteins from other mammalian tissues have subsequently been identified to transport water, and the group is referred to as th "Aquaporins". Aquaporin-4 (AQP4) is most abundant in the brain, which may be involved in CSF reabsorption and osmoregulation. However, ontogeny and regulatory mechanisms of AQP4 channels have not been reported. Northern blot analysis showed that AQP4 mRNA began to be expressed in the brain just before birth and that its expression gradually increased by PN7 and then decreased at adult level. AQP4 was expressed predominantly in the ependymal cells of ventricles in newborn rats. And then its expression decreased in ependymal cells and increased gradually in other regions including supraoptic and paraventricular nuclei. AQP4 is also expressed in the subfornical organ, in which the expression level is not changed after birth. Cryogenic brain injury did not affect expression of AQP4 mRNA, while ischemic brain injury decreased it. Osmotic water permeability of AQP4 channel expressed in Xenopus oocytes was inhibited by the pretreatment of BAPTA/AM and calmidazolium, a $Ca^{2+}/Calmodulin$ kinase inhibitor, in a dose-dependent manner. These results indicate that the expression and the function of AQP4 channel are regulated by developmental processes and various pathophysiological conditions. These results will contribute to the understanding of fluid balance in the central nervous system and the osmoregulatory mechanisms of the body.
Antimicrobial peptides have recently gained the much attention because of their ability to make defense system from attacking bacterial infections. Drosocin has been considered as very attractive antibiotic agents because of low toxicity against human erythrocytes and active at the low concentration. We have studied the structureactivity relationship of a glycopeptide drosocin focused on the N-acetyl-D-galactoside at $Thr^{11}$ residue. Based on the radial diffusion assay, we found that the acetylation of carbohydrate moiety increased the antimicrobial activity and the $Pro^{10}$, present in the middle of drosocin plays an important role in the antimicrobial activity. Our results provide a good lead compound for further studies on the design of drosocin-based analogues targeting glyco linked Thr site.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.26
no.3
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pp.269-278
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2009
In this study, the anti oxidative effects, inhibitory effects on elastase, and components of Securinega suffruticosa extracts were investigated. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activities ($FSC_{50}$) and reactive oxygen species ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of extract/fractions from Securinega suffruticosa were measured. The aglycone fraction ($9.04\;{\pm}\;0.51\;{\mu}g/mL$) and 50 % ethanol extract ($1.05\;{\pm}\;0.41\;{\mu}g/mL$) showed the most effective scavenging activities. The protective effects on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The aglycone fraction exhibited the most prominent cellular protective effect (${\tau}_{50},\;102.77\;{\pm}\;5.37$ min at $10{\mu}g/mL$). The inhibitory effect of ethyl acetate fraction on tyrosinase were of examined ($210.0\;{\pm}\;1.02\;{\mu}g/mL$). The inhibitory effect of aglycone fraction on elastase were also investigated ($17.6\;{\pm}\;1.26\;{\mu}g/mL$). These results indicate that extract/fractions of Securinega suffruticosa can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS. Securinega suffruticosa extract could be used as a new cosmeceutical ingredient for whitening and anti-wrinkle products.
Many food protein hydrolysates have been shown to have antioxidant activities, and recent research focuses on low molecular peptides produced during hydrolysis of food protein. Korean rice wine contains about 60-70% of protein at dry base and originates from raw materials. It has been suggested that the protein is transformed into low molecular weight peptides, and have antioxidant activity during fermentation. The objectives of this study were to evaluate the antioxidant activity of the pre-purified and purified peptides found in Korean rice wine and to identify the responsible peptides. The wine extract of Samhaeju, a traditional Korean rice wine made by low temperature fermentation, was evaporated at $35^{\circ}C$. The two methods employed in the evaluation of antioxidant activity were the DPPH radical scavenging method and the beta-carotene bleaching test. The pre-purified samples showed 808 AAC (Antioxidant Activity Coefficient) and 56.5% AOA (Antioxidant Activity), which were higher than $\alpha$-tocopherol (572 AAC and 78% AOA). The rice wine extract was separated by reversed-phase HPLC. The protective effect of the four most antioxidant active fractions were tested for t-butyl hydroperoxide induced oxidation of healthy human erythrocytes and the byproduct was determined by malondialdehyde formation. Fraction No.5 showed 35% lower MDA concentration as compared to the control. The peptides were further purified using consecutive chromatographic methods and 4 antioxidant peptides were isolated. The amino acid sequences of the peptides were identified as Ile-His-His, Val- Val-His(Asn), Leu-Val-Pro, and Leu(Val)-Lys-Arg-Pro. The AAC value of the synthetic form of the identified peptides was the highest for Ile-His-His.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.18
no.1
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pp.1-9
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1983
The author studied on the distribution of V. parahaemolyticus among sea water, sea mud, and various marine products in Jeju, Keoje, Namhae, Yockji, Busan, and Masan on the southern seas of Korea from winter in 1981 to summer in 1982. The author studies for the isolated strains to bacteriological identification Kanagawa phenomenon(hemolytic activity) on Modified Wagatuma blood agar plates and serotypes with anti V. parahaemolyticus. The results obtained were as follows:. 1. V. parahaemolyticus was isolated in 713 strains(28.3%) among 2519 total specimens of sea water, sea mud, and various marine products. 2. The isolation rates of V. parahaemolyticus in summer season were higher than in spring and winter season. Above results were 304 strains(32.6%) among 932 specimens in summer, 160 strains (28.1%) among 570 specimens in spring, 149 strains(14.6%) among 1017 specimens in winter, respectively. 3. The hemolysis on Modified Wagatuma agar added human erythrocytes was 66.0% of positive Kanagawa phenomenon, and was 34.0% of negative Kanagawa phenomenon, respectively. 4. The distributions of serotypes of V. parahaemolyticus isolated were from KI to K VIII of K pooling antisera. The results were 6 strains(6.6%) on K 1 of K I, 14 strains(l5.5%) on K 17 of K II, 26 strains(28.8%) on K 28 of K IV. 10 strains(11.1%) on K 32 of KV, 4 strains(4.4%) on K 39 of KV, 8 strains(8.8%) on K 42 of K VI, 2 strains(2.2%) on K 48 of K VII, 1 strain(1.1%) on K 50 of K II and 7 strains(7.7%) on K 55 of K VII, respectively. 5. V. parahaemolyticus was more frequently isolated from sea mud than sea water and various marine prdoucts in winter season. 6. There was no great difference as far as the distribution of V. parahaemolyticus concerned in Jeju, Keoje, Namhae, Yockji, Busan and Masan of the southern seas of Korea.
To investigate the effects of low dosed microcystin -LR (MCLR) on the initial stage of subacute hepatotoxicity in vivo, male Sprague-Dawley rats after weanling were divided in four groups. The orally treated group (OG) was administered orally by 1 $\mu\textrm{g}$/kg B.W. at an interval of three days. The free group (FG) has taken the drinking water including 1 $\mu\textrm{g}$/L freely and the control group (CC) was only treated with 0.9% saline solution All groups were treated for a period of 3 weeks. There was a significant correlation in body growth rate between OG and FC and especially, a deterioration of the growth of spleen was observed in the FG after 5 days. The protein levels were also decreased in OG and FG after 9 days. Level of total fat was increased to the 9th day but again decreased up to the initial level. High hemolysis of the isolated erythrocytes occurred only in OG. Activities of ${\gamma}$-G7 of 0G and FG were higher twice-fold than CG, but the values of OG were already higher at the first treatment day. No significant change in aspartate aminotransferase (AST) activity was shown in all groups, but the activity of alanine aminotransferase (ALT) was slightly increased at the beginning state. There were much similarities in the results of OG and FG. except the growth inhibition of spleen in FG. It may be concluded that long -term effects of the low doses of mycrocystins in animals including human being can lead to serious health problems, especially to liver and spleen.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.22
no.3
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pp.241-250
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1987
A total 64 strains of Escherichia coli including 38 strains of urinary tract infection and 26 strains from other clincal sources were studied for several properties related to the virulence markers of organisms. Urinary isolates(76.3%) showed higher frequency of mannose resistant hemagglutination(MRHA) wi th human erythrocytes(A type, $Rh^+$) than the strains of control group isolated from other sources(34.6%). Seventeen strains(44.4%) of urinary isolates and 2 strains(7.7%) of control group showed hemolysis on blood agar plate. There was no significant difference in MIC's of 23 drugs between both groups of urinary isolates and control group. But they showed high frequency of resistance to ampicillin, carbenicillin, piperacillin, kanamycin, and trimethoprim, but were very susceptible to cefotaxime, moxalactam, ceftizidime, imipenem, and norfloxacine. Fourteen strains(36.8%) of urinary isolates and 10 strains(38.5%) of control group showed conjugally transferable resistance conferred to R plasmids. The urinary isolates carried one or more to 6(mean 3.4) plasmids of approximate molecular weight ranged 3.1 to 94 megadalton(Mdal) and strains of control group carried 2 to 5(mean 3.8) plasm ids of size ranged 3.6 to 130 Mdal. The size of conjugally transferable R plasmid identified with transconjugants ranged 32 to 130 Mdal.
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