Although the idea that obese people consume higher calorie diets is widely accepted, many dietary surveys have shown that obese people do NOT consume larger amounts of energy. We had an opportunity to study the relationship between calorie intake and obesity in Korea from the data contained in the '98 National Health and Nutrition Examination Survey of Korea. The survey was executed nationwide for two months - from Nov. 1 to Dec.30 in 1998. The survey included 10,876 (aged >10 years) subjects of whom 9,771 underwent health examinations. Surveyors visited each household and checked health status, measured anthropometry and blood pressures, collected blood and urine samples, and interviewed from the health questionnaires. Well-trained dietitians evaluated the food consumption of 11,525 subjects over the age of 1 year with the 24-hour recall method. The number of subjects from whom a complete health examination and food consumption information was obtained was 8,004. Subjects were classified by BMI (< 20, 20-22, 22-24, 24-26, 26-28, 28 $\leq$) and into newly diagnosed patients with DM (FBS $\geq$ 126 mg/㎗), hypertension (SBP $\geq$ 140 mmHg or DBP $\geq$ 90 mmHg) and hyperlipidemia (Total cholesterol $\geq$ 220 mg/㎗ or TG $\geq$ 200 mg/㎗). Our main results were as following:1) their average energy intake was 2,029.6 $\pm$ 908.5 ㎉ and BMI is 22.6 $\pm$ 3.4 kg/$m^2$;2) a comparison of nutrient intakes by BMI level did not show a significant difference of energy intake even though BMI increased (BMI, < 20: 1,999 ㎉ ∼ 28 $\leq$: 2,028 ㎉);and 3) Even in newly diagnosed patients with diabetes, hypertension or hyperlipidemia, their energy consumption was not significantly increased as BMI increased (from BMI 20). There are several possible explanations for these results:1) Reduced physical activity caused the weight of obese people to increase even with the same energy intake;2) people underreported their energy consumption;or, people intentionally reduced their energy consumption due to self-image regarding their obesity. We might also hypothesize that there is a metabolic problem conceiving obese people, because calorie intake was not higher in obese people than in non-obese people in Korea. Further research is necessary for re-evaluating these current conclusions.
Lee, Sang Mi;Kim, Ji Woo;Jeong, Young-Hee;Kim, Se Eun;Kim, Yeong Ji;Moon, Seung Ju;Lee, Ji-Hye;Kim, Keun-Jung;Kim, Min-Kyu;Kang, Man-Jong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권11호
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pp.1644-1651
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2014
Transgenic animals have become important tools for the production of therapeutic proteins in the domestic animal. Production efficiencies of transgenic animals by conventional methods as microinjection and retrovirus vector methods are low, and the foreign gene expression levels are also low because of their random integration in the host genome. In this study, we investigated the homologous recombination on the porcine ${\beta}$-casein gene locus using a knock-in vector for the ${\beta}$-casein gene locus. We developed the knock-in vector on the porcine ${\beta}$-casein gene locus and isolated knock-in fibroblast for nuclear transfer. The knock-in vector consisted of the neomycin resistance gene (neo) as a positive selectable marker gene, diphtheria toxin-A gene as negative selection marker, and 5' arm and 3' arm from the porcine ${\beta}$-casein gene. The secretion of enhanced green fluorescent protein (EGFP) was more easily detected in the cell culture media than it was by western blot analysis of cell extract of the HC11 mouse mammary epithelial cells transfected with EGFP knock-in vector. These results indicated that a knock-in system using ${\beta}$-casein gene induced high expression of transgene by the gene regulatory sequence of endogenous ${\beta}$-casein gene. These fibroblasts may be used to produce transgenic pigs for the production of therapeutic proteins via the mammary glands.
Background: Hepatitis C virus(HCV), a family of Flaviviridae, has a host cell-derived envelope containing a positive-stranded RNA genome, and has been known as the maj or etiological agent for chronic hepatitis, hepatic cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. There remains a need to dissect a molecular mechanism of pathogenesis for the development of therapeutic and effective preventive measure for HCV. Identification of cellular receptor is of central importance not only to understand the viral pathogenesis, but also to exploit strategies for prevention of HCV. This study was aimed at identifying peptide mimotopes inhibiting the binding of E2 protein of HCV to MOLT-4 cell. Methods: In this study, phage peptide library displaying a random peptides consisting of 7 or 12 random peptides was employed in order to pan against E2 protein. Free HCV particles were separated from the immune complex forms by immunoprecipitation using anti-human IgG antibody, and used for HCV-capture ELISA. To identify the peptides inhibiting E2-binding to MOLT-4 cells, E2 protein was subj ect to bind to MOLT-4 cells under the competition with phage peptides. Results: Several phage peptides were selected for their specific binding to E2 protein, which showed the conserved sequence of SHFWRAP from 3 different peptide sequences. They were also able to recognize the HCV particles in the sera of HCV patients captured by monoclonal antibody against E2 protein. Two of them, showing peptide sequence of HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, were revealed to inhibit the binding of E2 protein to MOLT-4 cell efficiently in dose dependent mode. However, few membrane-associated receptor candidates were seen using Fasta3 programe for homology search with these peptides. Conclusion: Phage peptides containing HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, showed the inhibition of E2-binding to MOLT-4 cells. However, they did not reveal any homologues to cellular receptors from GenBank database. In further study, cellular receptor could be identified through the screening of cDNA library from MOLT-4 or hepatocytes using antibodies against these peptide mimotopes.
Mycoplasma genitalium은 367개의 보존적 유전자를 가지고 있으며 단독배양이 가능한 원핵생물 중 게놈크기가 최소이다. 본 연구에서는 M. genitalium과 M. genitalium보다 보존적 유전자 수가 적은 14개 원핵생물 즉 세포외 공생을 하는 초고온성 고세균 Nanoarchaeum equitans, 식물 세포 내부 기생성 진정세균 혹은 곤충 세포 내부 공생성 진정세균 13종 등의 원핵생물에 보존적인 대사경로를 검토하였다. 이들은 11~71개의 대사경로를 가졌지만 완전한 대사경로는 1~24개였다. 전체 대사경로에 필요한 효소의 45.8%가 결핍되어 대사경로 구멍(metabolic pathway hole)이 매우 많아, 숙주의 효소와 함께 공유대사경로(shared metabolic pathway)를 나타내거나 필수물질의 상당 부분이 숙주에 의존적일 것으로 사료되었다. 세포막을 통한 물질이동에 필요한 유전자의 개수도 아주 적어 단순확산 내지 숙주의 단백질이 이들의 세포막에서 물질이동의 기능을 할 것으로 사료되었다. tRNA charging 경로만이 15개의 분석 대상 원핵생물 모두에 분포하였지만, 분석 대상 원핵생물들은 각각 5~20개의 tRNA charging 유전자를 보유하였다. 본 연구 결과는 배양 불가능한 식물 세포 내 기생성 그리고 곤충 세포 내 공생성 원핵생물들의 대사경로 이해에 대한 단서와 함께 농작물 피해 방지와 해충구제, 의약품 개발 등에 사용할 기초자료를 제공할 수 있을 것이다.
사상성 진균에서 veA 유전자와 연계되어 있는 velvet 복합체는 진균의 분화와 이차 대사산물의 조절에 매우 중요한 기능을 한다. 모델 사상균인 Aspergillus nidulans의 경우 methyltransferase인 VipB와 VipC를 포함한 여러 단백질들이 VeA 단백질과 상호작용하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 인간 기회감염 진균인 Aspergillus fumigatus에서 vipB와 vipC 유전자의 상동유전자를 분리하여 각각 AfuvipB와 AfuvipC로 명명하였다. AfuvipB 유전자는 AspGD 데이터베이스에 Afu3g14920으로 등록되어 있으며 1,510 bp 길이에 10개의 인트론을 가지고 있고, 유전자 산물은 336 아미노산 잔기로 구성된 단백질로 methyltransferase 도메인을 가지고 있었다. AfuvipC는 Afu8g01930으로 AfuvipB와 유사하게 10개의 인트론을 가지고 있으며 339개의 아미노산으로 구성된 methyltransferase를 암호화하고 있었다. A. fumigatus에서 각각의 유전자에 대한 기능을 알아보고자 유전자제거 돌연변이 균주들을 제조하고 그들의 표현형을 관찰하였다. AfuvipB 유전자 제거 돌연변이는 점 접종을 하였을 경우 대조군에 비하여 표현형의 차이를 보이지 않았다. 그러나 단일 포자에서 성장한 콜로니를 비교해 보았을 때 대조군에 비하여 그 크기가 작고 분화 속도도 약간 더딘 것을 관찰할 수 있었다. 반면에 AfuvipC 유전자 제거 돌연변이는 대조군과 비교하였을 때 표현형의 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과는 두 개의 methyltransferase가 상호 중복적인 역할을 수행하거나 정상적인 실험실 배양조건에서는 중요한 기능을 수행하지 않을 수 있음을 시사한다.
Objectives : It has long been known about the anticancer effect of GRR-HAS, however, it has not been systemically determined the differentially regulated genes by GRR-HAS in cancer cells. The purpose of this study is to screen the GRR-HAS mediated differentially expressed genes in cancer cells such as HepG2 hepatoma cell lines. Oligonucleotide microarray and proteomic approaches were employed to screen the differential expression genes. Methods : GRR~HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of GRR-HAS (0.1, 0.5, 1.5, 10, $20mg/m{\ell}$) for 24 h. Cell toxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with $1.5mg/m{\ell}$ of GRR-HAS. For oligonucleotide microarray assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide genechip (Human genome Ul33 Plus 2.0., Affimatrix Co.). For proteomic analysis, total protein was analyzed by 2D gel electrophoresis and Q-TOF mass spectrometer. Results : It has no cytotoxic effects on both HepG2 cells in all concentrations(0.1, 0.5, 1.5, 10,$20mg/m{\ell}$). In oligonucleotide microarray assay, the number of more than twofold differentially regulated known genes was 320 with 6 up-regulated and 314 down-regulated genes in HepG2 cells. In proteomic analysis, three spots were identified by 2D-gel electrophoresis and Q-TOF analysis. One down -regulated protein was protein disulfide isomerase and up-regulated proteins were fatty acid binding protein 1 and 14-3-3 gan1lTIa protein by $1.5mg/m{\ell}$ of CRR-HAS. Discussion : This study showed the comprehensive gene expression analysis using oligonucleotide microarray for the screening of GRR-HAS mediated differentially regulated genes. These results will provide a better application of GRR-HAS in cancer field and drug target development.
Kim, Min-Su;Min, Kwan-Sik;Seong, Hwan-Hoo;Kim, Chan-Lan;Kim, Dongkyo;Imakawa, Kazuhiko;Kim, Sung Woo
한국수정란이식학회지
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제31권4호
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pp.335-347
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2016
Multiple interferon tau (IFNT) genes exist in bovine. An antiluteolytic substance secreted by the bovine conceptus and primarily responsible for maternal recognition of pregnancy is bovine trophoblast protein 1 (bIFNT1), a new type I interferon tau (IFNT) genes. The objectives of this research were to investigate whether multiple, distinct gene encode bIFNT1 and other type I bIFNT gene in the bovine genome and to examine expression of bIFNT1 and other bIFNTc1 mRNAs during conceptus development. These transcrips could be regulated through caudal-related homeobox-2 (CDX2) and ETS2 and/or AP1 (JUN) expression, a transcription factor implicated in the control of cell differentiation in the trophectoderm. The presence of mRNAs encoded by bIFNT1 and type I bIFNTc1 genes were examined quantitatively via reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of total cellular RNA (tcRNA) extracted from on day 17, 20 and 22 bovine conceptuses. The expression level of bIFNT1 was higher on day 17 transcripts were gradually weakly detectable on day 20 and 22. However, the other bIFNTc1 gene examined transcripts was highly expressed on day 20 and transcripts were weakly detectable on day 17 and 22 bovine conceptuses. Furthermore, human choriocarcinoma JEG3 was co-transfected with an -1kb-bIFNT1/c1-Luc constructs and several transcription factor expression plasmids. Compared to each -1kb-bIFNT1/c1-Luc increased when this constructs were co-transfected with, ETS2, AP1(JUN), CREBBP and/or CDX2. Also, bIFNTc1 gene was had very effect on activity by alone ETS2, and AP1 (JUN) expression factors in choriocarcinoma JEG3 cell. However, bIFNT1 gene expression of the upstream region was not identified. We demonstrated that the activities of bIFN genes are regulated by differential, tissue-specific and developmental competence during pregnancy.
Copy number variations (CNVs), important genetic factors for study of human diseases, may have as large of an effect on phenotype as do single nucleotide polymorphisms. Indeed, it is widely accepted that CNVs are associated with differential disease susceptibility. However, the relationships between CNVs and gene expression have not been characterized in the horse. In this study, we investigated the effects of copy number deletion in the blood and muscle transcriptomes of Thoroughbred racing horses. We identified a total of 1,246 CNVs of deletion polymorphisms using DNA re-sequencing data from 18 Thoroughbred racing horses. To discover the tendencies between CNV status and gene expression levels, we extracted CNVs of four Thoroughbred racing horses of which RNA sequencing was available. We found that 252 pairs of CNVs and genes were associated in the four horse samples. We did not observe a clear and consistent relationship between the deletion status of CNVs and gene expression levels before and after exercise in blood and muscle. However, we found some pairs of CNVs and associated genes that indicated relationships with gene expression levels: a positive relationship with genes responsible for membrane structure or cytoskeleton and a negative relationship with genes involved in disease. This study will lead to conceptual advances in understanding the relationship between CNVs and global gene expression in the horse.
Background: DNA repair pathways play a crucial role in maintaining the human genome. Previous studies associated DNA repair gene polymorphisms (XPD Lys751Gln, XRCC1 Arg280His and XRCC1 Arg399Gln) with nasopharyngeal carcinoma. These non-synonymous polymorphisms may alter DNA repair capacity and thus increase or decrease susceptibility. The present study aimed to determine the genotype distribution of XPD codon 751, XRCC1 codon 280 and codon 399 polymorphisms and haplotype associations among NPC cases and controls in the Malaysian population. Materials and Methods: We selected 157 NPC cases and 136 controls from two hospitals in Kuala Lumpur, Malaysia for this study. The polymorphisms studied were genotyped by PCR-RFLP assay and allele and genotype frequenci es, haplotype and linkage disequilibrium were determined using SNPstat software. Results: For the XPD Lys751Gln polymorphism, the frequency of the Lys allele was higher in cases than in controls (94.5% versus 85.0%). For the XRCC1 Arg280His polymorphism, the frequency of Arg allele was 90.0% and 89.0% in cases and controls, respectively and for XRCC1 Arg399Gln the frequency of the Arg allele was 72.0% and 72.8% in cases and controls respectively. All three polymorphisms were in linkage disequilibrium. The odds ratio from haplotype analysis for these three polymorphisms and their association with NPC was 1.93 (95%CI: 0.90-4.16) for haplotype CGC vs AGC allele combinations. The global haplotypte association with NPC gave a p-value of 0.054. Conclusions: Our study provides an estimate of allele and genotype frequencies of XRCC1Arg280His, XRCC1 Arg399Gln and XPD Lys751Gln polymorphisms in the Malaysian population and showed no association with nasopharyngeal cancer.
So, Kyoung-Ha;Choi, Jai Ho;Islam, Jaisan;KC, Elina;Moon, Hyeong Cheol;Won, So Yoon;Kim, Hyong Kyu;Kim, Soochong;Hyun, Sang-Hwan;Park, Young Seok
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제63권5호
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pp.579-589
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2020
Objective : No optimum genetic rat Huntington model both neuropathological using an adeno-associated virus (AAV-2) vector vector has been reported to date. We investigated whether direct infection of an AAV2 encoding a fragment of mutant huntingtin (AV2-82Q) into the rat striatum was useful for optimizing the Huntington rat model. Methods : We prepared ten unilateral models by injecting AAV2-82Q into the right striatum, as well as ten bilateral models. In each group, five rats were assigned to either the 2×1012 genome copies (GC)/mL of AAV2-82Q (×1, low dose) or 2×1013 GC/mL of AAV2-82Q (×10, high dose) injection model. Ten unilateral and ten bilateral models injected with AAV-empty were also prepared as control groups. We performed cylinder and stepping tests 2, 4, 6, and 8 weeks after injection, tested EM48 positive mutant huntingtin aggregates. Results : The high dose of unilateral and bilateral AAV2-82Q model showed a greater decrease in performance on the stepping and cylinder tests. We also observed more prominent EM48-positive mutant huntingtin aggregates in the medium spiny neurons of the high dose of AAV2-82Q injected group. Conclusion : Based on the results from the present study, high dose of AAV2-82Q is the optimum titer for establishing a Huntington rat model. Delivery of high dose of human AAV2-82Q resulted in the manifestation of Huntington behaviors and optimum expression of the huntingtin protein in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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