• 한국식품위생안전성학회지
• /
• 제13권1호
• /
• pp.41-46
• /
• 1998

HPLCdp 의한 주요 afltoxins(aflatoxins $B_1,\;B_2,\;G_1\;및\;G_2$)의 동시 분석에서 postcolumn 유도체화법을 시도하였다. Electrochemical cell (Kobra-cell)을 사용한 postcolumn 유도체화법은 기존의 precolumn 유도체화법보다 분석시간을 단축하였으며 (약 1/2 단축), 더 안전하고 , 향상된 분석능을 보였다. Aflatoxin $B_1과\;G_1의$ 경우 10~100ppb에서, 그리고 B_2와\;G_2의$ 경우 3~30 ppb에서 직선성을 나타내었다. Aflatoxin $B_1과\;G_1은$ 각각 88.9% 및 100.5%로 양호한 회수율을 보였다. Aflatoxin $B_2와\;G_2의$ 경우 분리도는 우수하였으나 회수율에있어서 변이가 크게 나타났다.

• 약학회지
• /
• 제43권3호
• /
• pp.300-305
• /
• 1999

A sensitive and efficient assay method was applied to determine the level of glutamic acid (GA) and ${\gamma}-aminobutyric$ acid (GABA) in frontal cortex and hippocampus of rat administrated with ethanol and drugs. The compounds were derivatized with ο-phthalaldehyde (OPA) and 2-mercaptoethanof for precolunm analysis. The condition for the simultaneous determination of GA, GABA and $\beta-aminobutyric$ acid (BABA) by high performance liquid chromatography with electrochemical detection was reverse phase $C_{18}$ column as stationary phase, 0.1 M phosphate buffer containing 0.1 mM $Na_4EDTA$ : methanol = 55:45 (v+v) pH 3.8 as mobile phase and 0.7V electrode voltage. The stability of reaction product of GA, GABA and BABA with OPA could be increased by adding the same volume of polyethylene glycol 400 to reaction mixture. The GABA level in frotal cortex of rat was significantly decreased by the administration of picrotoxin and diazepam, but it was significantly increased by the administration of red ginseng total saponin, N-methyl-D-glucamine and (-)-deprenyl.

• 대한약학회:학술대회논문집
• /
• 대한약학회 2001년도 Proceedings of the Pharmaceutical Society of Korea
• /
• pp.223.1-223.1
• /
• 2001

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제24권4호
• /
• pp.355-359
• /
• 2001

A novel HPLC method with electrochemical detection has been developed for the determination of recombinant human epidermal growth factor (rhEGF) in pharmaceutical products. rhEGF was separated from other components in formulation on a reversed-phase C18 column with 24% acetonitrile in 0.1 M phosphate buffer (pH 4.75). The optimum electrochemical oxidation of EGF was obtained at 0.85 V vs. Ag/AgCl in a glassy carbon working electrode due to electroactive tyrosine, tryptophan, methionine, and arginine residues. The quantitation range was from 1.0 to 200 ng of rhEGF with the linear correlation coefficient greater than 0.999. The method was successfully applied for the quantitation of rhEGF in a pharmaceutical preparation.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
• /
• 제18권3호
• /
• pp.316-318
• /
• 1997

A general and universal detection method, which can be used in high performance liquid chromatography (HPLC) and flow injection analysis (FIA) system for the determination of any metal ions complexing with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), is demonstrated. Pulsed amperometric detection scheme is applied in a flow-through thin layer electrochemical cell at an Au working electrode. Fluctuation of peak current level at the same flow rate of carrier solution is minimized at this solid working electrode, whereas not at a dropping mercury electrode. Removal of dissolved oxygen can be omitted with this detection method, which is a required step for cathodic detection methods. Also, a group of metal ions can be determined selectively and indirectly with this detection scheme.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제21권2호
• /
• pp.217-222
• /
• 1998

A stereospecific HPLC method has been developed for the resolution of the enantiomers of salbutamol in human urine. After solid-phase extraction and derivatization with 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-$\beta$-D-glucopyranosyl isothiocyanate, the diastereomeric derivatives were resolved (Rs=1.83) on $5{\mu}m$ octadecylsilan column using 35% acetonitrile in 0.05M ammonium acetate buffer (pH=6) as a mobile phase with electrochemical detection. The diastereomeric derivatives were formed within 30 min. The detection limit of each enantiomer was 20 ng/ml (S/N=3).

• 대한약리학회지
• /
• 제27권1호
• /
• pp.7-12
• /
• 1991

쥐(태령 14일) 뇌간 세포배양에서 발달과정에 따른 Tyrosine hydroxylase(TH) 활성 및 dopamine의 양적 증가를 전기화학 HPLC를 이용하여 측정하였다. TH 활성 및 dopamine의 양은 배양 7일까지 점차 증가하였다. 배양 7일째에 여러 약물들의 dopamine 대사에 대한 영향을 조사하였다. TH 억제제인 ${\alpha}-methyl-p-tyrosine$ 및 aromatic amiono acid decarboxylase 억제제인 NSD-1015는 효과적으로 dopamine을 고갈시켰다. Dopamine은 reserpine에 의해 고갈되었고, parglyine에 의해 증가되었다. 일주일 배양한 세포의 배양액에 tetrodotoxin$(0.1\;{\mu}M$)을 7일간 투여하였을 때 TH 활성은 현저히 감소하였다. 이상의 결과들은 배양세포의 dopamine 대사가 뇌 dopamine 대사를 충실히 반영함을 나타낸다. 뇌간 세포의 배양에서 HPLC-전기화학검출을 이용한 TH 활성 및 dopamine의 측정은 중추 dopamine계의 약리 및 독성 연구에 유용하리라 사료된다.

• 대한약리학회지
• /
• 제26권1호
• /
• pp.1-6
• /
• 1990

본 연구에서는 흰쥐 태아 뇌간의 일차 세포배양을 이용하여 중추 serotonin(5-HT) 신경세포의 연구에 적합한 in vitro 모델을 확립하고, 여기에서 5-HT 대사의 전반적인 과정을 살펴보고자 하였다. 배양세포의 5-HT 및 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA)함량을 high performance liquid chromatography-electrochemical detection (HPLC-EC)방법 으로 측정함으로써 흰쥐태아(태령 14-15일)뇌간으로 부터 얻은 5-HT 신경세포가 배양상에서 2주까지 발달함을 추적할 수 있었고 아울러 이들 세포에서 5-HT의 합성, 저장, 대사의 각 과정을 몇가지 약물들을 이용하여 확인하였다. 배양 14일에 5-HT의 함량이 13ng/mg protein으로서 성숙한 흰쥐 뇌속에 존재하는 5-HT의 값과 유사하였다. 5-HT 합성의 속도조절효소인 tryptophan hydroxylase(TPH)의 상경적 억제제인 p-chlorophenylalanine (PCPA)처리시 aromatic L-amino acid decarboxylase (AADC)억제제인 3-hydroxybenzylhydrazine NSD 1015보다 5-HT 및 5-HIAA 함량을 더 많이 감소시켰다. TPH의 기질인 tryptophan은 5-HT의 합성을 현저히 (200%) 증가시켰으며 이 증가는 PCPA로 상당히 둔화되었다. 5-HIAA의 변화도 유사한 양상을 보였다. 5-hydroxytryptophan처리시 5-HT 및 5-HIAA 함량이 현저히 증가하였으며 이 증가는 NSD 1015로 거의 차단되었다. 5-HT 대사 경로인 monoamine oxidase (MAO)의 비특이적 억제제인 pargyline과 MAO A의 특이적 억제제인 LY-51641을 처리한 결과 5-HT 함량은 각각 대조군의 295% 및 140%로 증가하여 pargyline이 LY-51641보다 현저한 작용을 나타내었다. 그러나 5-HIAA의 함량은 반대로 현저히 감소하여 pargyline 및 LY-51641에 의해서 각각 대조군의 50% 및 40%의 함량을 나타내었다. 이상의 결과로 보아 5-HT 신경세포는 일차 세포배양상에서 활발한 5-HT대사가 이루어짐을 HPLC-EC 방법으로 확인할 수 있었으며 따라서 본 in vitro system은 중추 5-HT 신경세포에 대한 전반적인 약리 및 독성 연구에 매우 유용하게 사용될 수 있다고 사료된다.

• 대한수의학회지
• /
• 제33권4호
• /
• pp.605-609
• /
• 1993

항암치료의 조절인자로서 중요시되는 활성엽산대사물의 장간(腸肝)순환동태를 규명하기 위해 랫드에 $[^3H]pteroylglutamic$ acid(PteGlu)를 정맥주사한 후 고성능 액체 크로마토그래피법(HPLC)을 이용해 담즙중 활성대사물에 관해 조사하였다. HPLC-liquid scintillation counting법의 분석결과, 현저한 다섯개의 방사활성 피크가 출현, 이들은 $H_4PteGlu$, $10-HCO-H_4PteGlu$, $5-CH_3-H_4PteGlu$와 paraaminobenzoyl glutamate(pABG), PteGlu로 각각 동정되었다. 전자 3물질의 활성엽산대사물의 동정은 표준물질과의 비교분석에 의해 HPLC-전기화학검출기를 이용한 retention time profile 및 hydrodynamic, Voltammogram의 일치성 그리고 HPLC-photodiode array분석에 의한 흡광스펙트럼의 일치성에 근거하였다. 후자 그 물질의(pABG 및 PteGlu) 동정은 흡광스펙트럼의 일치성에 근거하였다. 랫드 담즙중$[^3H]PteGlu$의 활성엽산대사물로서 $H_4PteGlu$의 존재가 처음으로 밝혀졌다.

• 약학회지
• /
• 제54권1호
• /
• pp.32-38
• /
• 2010

The aim of this study was to evaluate the effect of galangin towards hydrogen peroxide-induced DNA damage. The calf thymus DNA and Chinese Hamster Lung (CHL) cells were used to measure 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine(8-OH2'dG) as an indicator of DNA oxidative damage using high performance liquid chromatography with electrochemical detection. Hydrogen peroxide in the presence of Fe(II) ion induced the formation of 8-OH2'dG in both calf thymus DNA and CHL cells. The DNA damage effects were enhanced by increasing the concentration of Fe(II) ion and inhibited by galangin. In the single cell gel electrophoresis (Comet assay), galangin and dl-a-tocopherol showed an inhibitory effect in CHL on hydrogen peroxide induced DNA single strand breaks. Galangin showed more potent activity than dl-$\alpha$-tocopherol under our experimental conditions. These results indicate that galangin can modify the action mechanisms of the oxidative DNA damage and may act as chemopreventive agents against oxidative stress.