The inhibitory effect of herbicides such as sulfonylurea derivatives, imidazolinones and pyrimidylsalicylate has been examined on the purified valine sensitive acetolactate synthase (ALS) from Serratia marcescens. The concentration of sulfometuron methyl which inhibits 50% of the ALS activity was 2.5 mM. The required concentrations of triasulfuron, primisulfuron methyl and imazaquin for the 50% inhibition of the ALS activity were 1 mM. The resistance of Serratia ALS to sulfometuron methyl, imazapyr and imazaquin is similar to that of E. coli ALS 1. However, pyrimidylsalicylate showed a potent inhibitory effect on the Serratia ALS almost 13 times more potent than on E. coli ALS II, which is known as herbicide-sensitive isozyme. The inhibitory mode was competitive against pyruvate. 150 value was determined to be $17{\mu}M$ in an assay mixture containing 20 mM pyruvate, and the $K_1$, value was calculated to be $0.4{\mu}m$ from the modified double reciprocal plot of 1/V versus $1/S^2$.
The catabolic ${\alpha}$-acetolactate synthase was purified to homogeneity from Serratia marcescens ATCC 25419 using ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sepharose, Phenyl-Sepharose, and Hydroxylapatite column chromatography. The native molecular weight of the enzyme was approximately 150 kDa and composed of two identical subunits with molecular weights of 64 kDa each. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was determined to be Ala-Gln-Glu-Lys-Thr-Gly-Asn-Asp-Trp-Gln-His-Gly-Ala-Asp-Leu-Val-Val-Lys-Asn-Leu. It was not inhibited by the branched chain amino acids and sulfometuron methyl herbicide. The optimum pH of the enzyme was around pH 5.5 and the pI value was 6.1. The catabolic ${\alpha}$-acetolactate synthase showed weak immunological relationships with recombinant tobacco ALS, barley ALS, and the valine-sensitive ALS isozyme from Serratia marcescens.
A glutathione S-transferase (GST) related to the phi (F) class of enzymes only found in plants has been cloned from the Oryza sativa. The GST cDNA was cloned by PCR using oligonucleotide primers based on the OsGSTF5 (GenBank Accession No. $\underline{AF309382}$) sequences. The cDNA was composed of a 669-bp open reading frame encoding for 223 amino acids. The deduced peptide of this gene shared on overall identity of 75% with other known phi class GST sequences. On the other hands, the OsGSTF5 sequence showed only 34% identity with the sequence of the OsGSTF3 cloned by our previous study (Cho et al., 2005). This gene was expressed in Escherichia coli with the pET vector system and the gene product was purified to homogeneity by GSH-Sepharose affinity column chromatography. The expressed OsGSTF5 formed a homo-dimer composed of 28 kDa subunit and its pI value was approximately 7.8. The expressed OsGSTF5 displayed glutathione conjugation activity toward 1-chloro-2,4-dinitrobenzene and 1,2-epoxy-3-(p-nitrophenoxy)propane and glutathione peroxidase activity toward cumene hydroperoxide. The OsGSTF5 also had high activities towards the herbicides alachlor, atrazine and metolachlor. The OsGSTF5 was highly sensitive to inhibition by S-hexylGSH, benastatin A and hematin. We propose from these results that the expressed OsGSTF5 is a phi class GST and appears to play a role in the conjugation of herbicide and GPOX activity.
토마토 품종간의 제초제(除草劑) Quinclorac에 대한 생육(生育) 저해(沮害) 정도의 차이를 알아 보기 위하여 토마토 8개 품종에 Quinclorac 0, 1, 2, 3, 4, 5g ai/ha을 토마토 유묘의 본엽 2 엽기에 토양 표면에 산포(散布)하였다. 약제 처리후 일주일 간격으로 초장을 조사하였고 약제 처리 28일후에 식물체의 건물중을 측정하였다. 무처리(無處理)에 대한 초장(草長)의 비율은 약제 처리 7일후에 최고 약량 5g ai/ha 에서 69-81%였고 나머지 약량에서는 무처리와 차이가 없었다. 약제 처리후 시간 경과에 따라 초장의 무처리에 비한 단축율(短縮率)이 커져 갔으며 약제 처리 28 일후에는 5g ai/ha에서 (2-26)*836038과(TR*VC8-1)-1-2F4가 각각 무처리의 88%와 89%로 높았고 나머지 6개 품종은 무처리의 61-68%로 낮았다. 약제 처리 28일후의 무처리에 대한 줄기의 건물중(乾物重) 비율은 초장보다 더 커서 최고 약량인 4-5g ai/ha에서 (TR*VC8-1)-1-2F4가 59%와 51%, (2-26)*836038이 각각 43%와 45%로 초장에서와 같이 가장 감소율(減少率)이 적었다. 뿌리의 건물중은 무처리보다 높았다. 줄기와 뿌리를 합한 식물체 전체의 건물중도 줄기와 동일한 경향이었다.
벼의 제초제에 대한 반응을 조사키 위하여 300 품종 및 계통을 대상으로 제초제 butachlor, thiobencarb, simetryn을 사용하여 선발한 결과는 다음과 같다. 1. 제초제에 대한 벼품종과 계통들의 반응은 사용한 제초제와 그 농도에 따라 다르게 나타났는데, New Sabarmati(BAS), Gora, PTB 18 등은 butachlor에 내성을 보인 반면에 Azucena, IR44707-31-1-3-2, ARC 7293 등은 thiobencarb에 내성을 나타내었고, Gora, ARC 7293, and Dudmona 등은 두제초제에 공히 내성을 보였다. 그러나 simetryn에 대한 벼의 반응은 butachlor과 thiobencarb와는 다른 반응을 나타내었다. 2. 제초제 처리에 의한 신초의 생장과 생체중은 온도와 제초제 농도가 증가함에 따라 더욱 감소하는 경향을 보였다. 3 제초제에 대한 벼의 반응을 간편하고 효과적으로 검정하기 위해 실내시험을 수행하여 얻은 결과를 온실시험 결과와 비교한 결과 실내시험이 높은 온도(온실의 낮기온)에서 수행되었을 때 두가지 검정방법간에 높은 상관관계를 보였다.
새로운 sulfonamide형(型) 제초제(除草劑) asimsulfuron은 논에서 발생(發生)하는 다년생(多年生) 잡초(雜草)인 너도방동사니, 올방개, 올미, 벗풀 및 올챙고랭이에 대하여 7.5 - 30 g ai/ha 처리(處理) 수준(水準)에서 선택적(選擇的)인 방제(防除) 효과(效果)를 나타낸다. Azimsulfuron 0.3 - 30 ppm 수준(水準)을 포함(包含)한 양액(養液) 재배(栽培)에서 화본과(禾本科)에 대한 내성(耐性) 검정(檢定) 결과(結果), 벼 및 피의 지상부(地上部) 경엽(莖葉)에 대한 저해(沮害)보다는 뿌리에 대하여 더 큰 저해(沮害)를 나타내었다. 그러나 벼의 뿌리는 피에 대하여서 azimsulfuron에 대하여 약 5배(倍) 이상(以上)의 내성(耐性)을 보였다. 올챙고랭이 생육(生育) 50% 저해(沮害)에 필요(必要)한 농도(濃度)를 기준(基準)으로 측정(測定)한 토양(土壤) 중(中) 하방(下方) 이동(移動)은 3일간(日間) 3 cm/일(日)의 용탈(溶脫) 조건하(條件下) $20^{\circ}C$ 및 $30^{\circ}C$에서 배양(培養)된 azimsulfuron의 잔효성(殘效性)은 각각 30일(日) 및 21일(日) 지속(持續)되었다. Azimsulfuron 15 g ai/ha 처리(處理) 후(後) 3일(日) 동안 3 cm/일(日) 용탈(溶脫)시킨 토양(土壤)컬럼에서 표층(表層) 하(下) 5, 10 및 15 cm에 이식(移植)된 벗풀의 건물중(乾物重)은 각 층위(層位)에서 출아(出芽)된 무처리(無處理) 대비(對比) 87%, 85% 및 79%로써 azimsulfuron에 대한 벗풀의 감수성(感受性)은 이식(移植) 심도(深度)에 따라 크게 변하지 않았다.
본 실험은 allelopathic물질을 함유한 것으로 알려진 보리, 수수를 이용하여 주요 잡초의 발아 및 생육에 어떠한 영향을 미치는가에 대한 특성을 조사하기 위하여 실시하였던 바 그 결과는 다음과 같다. 1)보리의 생체추출물은 잡초의 발아 및 뿌리와 줄기 초기생육을 억제하였으며 그 억제정도는 잡초의 종류, 농도에 따라 반응 차이를 보였다. 일반적으로 생체추출물의 농도가 증가함에 따라 잡초발아 및 뿌리와 줄기생육을 억제하는 정도가 크게 나타났다. 2)보리, 수수의 건조분말 추출물질로 잡초의 발아율, 줄기 및 뿌리의 생육을 억제하였으며 억제정도는 allelopathy 식물체의 종류, 농도 및 잡초의 종류에 따라 차이를 보였다. 건조분말 농도가 10% 이상이었을 때 까마중, 털진득찰, 개비름, 강아지풀의 발아가 전혀 안되었으며 쇠비름은 10%만 발아가 되었다. 3)보리, 수수 건조분말의 토양혼화시 건조분말의 농도가 높아짐에 따라 잡초의 발아율 및 줄기와 뿌리생육이 억제되었으며, 건조분말농도가 10% 이상일 때는 80%이상 발아 및 생육의 억제를 가져 왔다.
Triazolopyrimidine sulfonanilide (TP) 유도체는 널리 사용되고 있는 제초제 중의 하나이다. 우리는 TP 유도체 화합물의 골격을 이루고 있는 벤젠 고리를 pyrimidine 고리로 치환시킨 새로운 3 종류의 sulfonamide 유도체(TPP)를 합성하고, 보리에서 추출한 acetolactate synthase (ALS)의 저해 활성도를 측정한 결과 0.005 부터 2 mM 사이의$I_{50}$값을 얻었다. $I_{50}$ 값의 비교에서 pyrimidine 고리에 methyl기가 치환된 TPP 유도체는 methoxy기가 치환된 유도체 보다 높은 저해 활성도를 나타내었다. 또한 triazolopyrimidine 고리에 cyclopentano 고리로 치환된 TPP 유도체는 methyl- 및 phenyl가 치환된 유도체보다 우수한 저해 활성도를 보였다. 따라서 새로운 TPP 유도체의 제초 효력은 치환기에 의한 분자내 전자 분포 변화와 밀접한 관계가 있으나 치환기의 크기에 따른 입체적 장애 요인은 저해 활성도에 전혀 영향이 없음을 알 수 있었다.
시판 농약류의 미생물에 대한 독성을 검정한 결과 제초제인 paraquat(1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridylium dichloride)가 편성혐기성 세균을 제외한 세균류와 효모 및 곰팡이에 걸치는 광범위한 미생물의 증식을 저해하였다. Paraquat는 $1.0\;{\mu}M$(0.186ppm)의 농도에서도 공시균(Escherichia coli KCTC 1039)의 turbidometric growth를 지연시켰으나, 생균수 변화 및 well test 등의 결과로부터 공시균에 대한 paraquat의 생육저지 최소 농도는 1.0mM(186ppm)로 평가되었다. Paraquat 처리시 공시균의 생균수는 처리직후에 대조구의 약 50%로 급격히 감소되었으나, 이후 4시간 동안 1.0mM의 paraquat 존재하에서도 유의적으로 증가되었다. 그러나 처리 4시간 이후로는 생균수가 서서히 감소되었으며 계속된 배양에도 불구하고 재증식은 관찰되지 아니하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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