We investigated the rate of hepatitis G virus infection among 50 patients who were not infected with the hepatitis C virus but showed symptoms of hepatitis. Viral RNA was extracted from the patients' sera and cDNA was synthesized and amplified by RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) using random hexamer and 5 primers (470-20-1-77F, 470-20-1-211R, 470-20-1-211R-biotin, GV57-4512MF, GV57-4657MR). The amplified PCR products were confirmed by electrochemiluminescence (ECL), liquid hybridization (LH) and Southern blotting (SB). Among the 50 PCR products, by means of ECL, we found 4 samples to be positive and 5 samples to be indeterminate. The GV45-89M probe (5'-CYCGCTGRTITGGGGTGTACfGGAAGGC-3') was end-labelled with gamma-$^{32}P$ ATP and used for liquid hybridization with the PCR products. By using liquid hybridization, we detected specific bands from 4 positive sera and also from one indeterminate serum as determined by ECL. An 1.5% agarose gel electrophoresis of the 9 PCR products which were HGV positive or indeterminate as determined by ECL showed a 160bp band from 4 positive and one indeterminate serum. The 5 PCR products proved to be positive when SB was applied with the GV45-89M probe as well as when LH was applied. LH and SB were shown to have higher sensitivity and specificity than ECL. Two cases among 5 positive cases had relatively high SGOT, SGPT, ALP values when compared with other 48 cases. In summary, we confirmed hepatitis G virus infection in 5 cases among 50 Korean patients showing symptoms of viral hepatitis.
Evaluation of plant extracts that might inhibit hepatitis B virus (HBV) replication was performed to find potent anti-HBV agents. Eighty-five species of plants from forty-three families were tested for their anti-HBV activities using HBV-producing HepG2-derived 2.2.15 cells. The anti-HBV activity of plant extracts was measured by slot blot hybridization technique and cytotoxicity was determined by crystal violet staining procedure. All plants were extracted with methanol and the extracts were partitioned into n-hexane, ethyl acetate and aqueous layer. The ethyl acetate fractions of Rhus verniciflua $(stem:\;EC_{50},\;8.2{\mu}g/ml;\;CC_{50},\;9.4{\mu}g/ml)$, Gastrodia elata $(root:\;EC_{50},\;17.7{\mu}g/ml;\;CC_{50},\;>20{\mu}g/ml)$, Raphanus sativus $(seeds:\;EC_{50},\;17.3{\mu}g/ml;\;CC_{50},\;>20{\mu}g/ml)$, and Angelica gigas $(root:\;EC_{50},\;8.3{\mu}g/ml;\;CC_{50},\;15.6{\mu}g/ml)$ revealed the anti-HBV activity in 2.2.15 cell culture system and these fractions are under the process of further sequential fractionation by column chromatography to find the active principles against HBV.
The nucleoside analogue, L-FMAUS was synthesized from L-FMAU which has been shown to have significant antiviral acitivity against hepatitis B virus (HBV). The anti-HBV activity and toxicity of the L-FMAUS were examined by a cell culture system using a hepatitis B virus (HBV) producing cell line, HepG2 2.2.15. L-FMAUS was assayed for the inhibition of HBV multiplication by measurement of HBV DNA and surface antigen (HBsAg) levels in the extracellular medium of HepG2 2.2.15 cells after an 8-day treatment. (omitted)
The age-specific anti-hepatitis A virus (HAV) seroprevalence rates in South Korea have changed markedly since the last 2030 years with an improvement in the socio-economic, housing, and environmental-sanitation conditions. These changes are characterized by very low anti-HAV seropositive rates among individuals less than 30 years of age; however, nowadays, most adolescents and young adults at an increased risk of developing symptomatic HAV infections. The Korea Center for Disease Control Sentinel Surveillance System has recently revealed an increase in the incidence of hepatitis A infection since 2001 and has revealed a potential endemic nature of the hepatitis A infection. Hepatitis A vaccines that were introduced in 1997 in Korea have made the current anti-HAV IgG positive rates in children (less than 10 years of age) approximately 50% of the rates observed in Seoul in 2006. However, in the same year, a few children were diagnosed as having anti-HAV IgG antibodies in Busan. This suggests the presence of some difference in the vaccination policy among doctors practicing in Seoul and Busan. Thus, the current recommendation of vaccinating 12-year-old child with HAV vaccination should be emphasized and a new strategy should be developed for the vaccination program to cater to the adolescents and young adults who are not immune, as well as for persons who are at a high risk for hepatitis A viral infection such as military personnel and hospital and day care center employees. Further, urgent hepatitis A vaccinations are also needed in patients with chronic liver diseases.
Viral hepatitis is the inflammation of liver cells caused by viruses, and still one of the major health-care problems worldwide. A number of viruses to cause hepatitis are type A, B, C, D, E or G. Among these viruses leading to hepatitis, B and C are more troublesome being more prone to chronic illness which can cause the potentially fatal conditions of hepatocellular carcinoma (HCC) and/or liver failure. If immediate treatment is not initiated, liver transplant is the only option left. Over the past few decades there has been remarkable progress in diagnose and monitor all hepatitis virus infections for treatment and prevention. Nonetheless, important challenges remain to develop more effective and safe vaccines for prevention as well as antiviral agents to reduce viremia/viral load by inhibiting viral replication. The development and evaluation of antiviral agents through carefully designed clinical trials over the last 25 years has heralded a new dawn in the treatment of patients chronically infected with the hepatitis B and C viruses, but not so for the D virus. The introduction of Direct Acting Antivirals (DDAs) for the treatment of HBV carriers has permitted the long term use of these compounds for the continuous suppression of viral replication. This review aims to summarize the current status and development approaches of antiviral drugs for the treatment of viral hepatitis and future perspectives.
One of the essential functions of virus surface proteins is the recognition of specific receptors on target cell membranes, and cellular receptors play an important role in viral pathogenesis. But the earliest steps of hepatitis B virus (HBV) infection, such as hepatocyte receptor interaction with the virus, are poorly understood. Previous work has suggested an important role of the preS1 region of HBV envelope protein in mediating viral binding to hepatocytes. Although hepatitis B virus (HBV) infection appears to be initiated by specific binding of virions to cell membrane structures via one or potentially several viral surface proteins, data showing the identification or isolation of the HBV receptor (s) are not yet available. The receptor-like proteins on the plasma membrane surface of HepG2 cells that bind to PreS1 were separated and identified using affinity chromatography, and the amino-terminal amino acid sequences of the receptor-like proteins were determined.
The prevalence of hepatitis A virus (HAV) in a certain community reflects that community's living standard and hygienic condition. The seroprevalence rate of IgG anti-HAV has been changing with regions and times. In this study, we aimed to study the difference of seroprevalence of IgG anti-HAV according to sex, age and type of drinking water, and to know the vaccination rate and seroconversion rate for vaccinated subjects in Busan. A total of 644 samples were analyzed. The overall seroprevalence rate of IgG anti-HAV was 35.4% (228/644). There was no significant difference in sex (male 39.8%, female 32.7) (p>0.05). According to age, seroprevalence rate of anti-HAV were 55.0% in subjects aged 5~9 years old, 47.8% in 10~14 years old, decreced to 10.6% in 15~19 years old, 1.0% in 20~24 years old, 0.0% in 25~29 years old and increced with advacing ages ; 14.7% in 30~34 years old, 39.4% in 35~39 years old, 67.3% in 40~44 years old, 94.1% in 45~49 years old, 100.0% over 50 years (p<0.001). The seroprevalence of IgG anti-HAV was no statistical difference according to the types of drinking water (p>0.05). The vaccinated subject was 42 case only in below 25 years old. The seroconversion rate after vaccination was 88.1%.
The acute toxicity of CJ-50005, an inactivated whole virus vaccine derived from hepatitis A virus (HM175) grown in human MRC-5 diploid fibroblast culture, was tested in Sprague Dawley (SD) rats and beagle dogs. CJ-50005 was orally and intramuscularly administered up to the maximum dose of 81$\mu\textrm{g}$/kg. as much as 3,000 times of the expected clinical dose, in SD rats and was intramuscularly administered up to 27 $\mu\textrm{g}$/kg, as much as 1,000 times of the expected clinical dose, in beagle dogs. In these experiments, there were no death and clinical changes which were related to CJ-50005 administration. In addition, there were no significant changes between control and treated groups in body weights and autopsy findings. In conclusion, the administration of CJ-50005 over 81$\mu\textrm{g}$/kg in SD rats and over 27$\mu\textrm{g}$/kg in beagle dogs was proved to be safe, and it is thought that CJ-50005 may not show any toxicity in its clinical use.
The co-infection with hepatitis B virus (HBV) and hepatitis C Virus (HCV) is associated with a more severe liver disease and increased frequency in the development of hepatocellular carcinoma com-pared to those with single infection. Here, we demonstrated that HBV X protein (HBx) and HCV Core cooperatively up-regulated the level of p53 in human hepatoma HepG2 cells. The elevated p53 subsequently stimulated the expression of proapoptotic Bax whereas it repressed the expression of antiapoptotic Bcl2. These effects, however, were not observed in p53-negative Hep3B cells. Consistently to their cooperative regulation of apoptotic effectors, HBx and HCV Core additively stimulated cisplatin-mediated apoptotic cell death of HepG2 but not of Hep3B cells. These results may help to explain the development of a more severe liver disease in patients co-infection with HBV and HCV as well as some contradictory results on the roles of HBx and Core in apoptosis.
The core protein of the hepatitis C virus (HCV) is a multifunctional protein. The HCV core protein was reported to regulate cellular gene expression and transform primary rat embryo fibroblast cells. However, the role of the core protein in the pathogenesis of HCV-associated liver diseases is not well understood. To investigate the functional role of the core protein in cytophathogenicity, we have constructed stable expression systems of full length or truncated HCV core protein lacking the C-terminal hyderophobic domains and established HepG2 cell clones constitutively expressing the core protein. The full length core protein was localized in the cytoplasm and the C-terminal truncated core protein was localized in the nucleus. HepG2 cells expressing nuclear, truncated core protein showed elevated cell death during cultivation compared to untransfected cells and full length core-expressing cells. In the treatment with bleomycin, both cell clones expressing full length or truncated core protein appeared to be more sensitive to blemoycin than the parental HepG2 cells. These results suggest that the core protein may play a role in HCV pathogenesis promoting apoptotic cell death of infected cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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