• 생명과학회지
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• 제27권5호
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• pp.545-552
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• 2017

Julbernardia globiflora는 미옴보 숲에 널리 분포하는 열대 아프리카 나무로, 우울증, 위장장애 등의 치료를 위해 민간요법으로 사용되고 있으나, 항산화능, 항암 활성 등에 대한 연구는 알려진 바가 없다. 따라서 본 연구에서는 J. globiflora 메탄올 추출물(MEJG)을 사용하여 항산화능 및 인체 대장암 세포주인 HT29에 대한 항암 활성에 관하여 분석하였다. 먼저 DPPH radical scavenging activity를 통해 분석한 결과, MEJG의 $IC_{50}$는 $1.23{\mu}g/ml$로 강력한 항산화능을 보유하였음을 확인하였다. 또한 MEJG 농도 의존적으로 HT29 세포의 성장을 억제하였다. MEJG의 HT29 세포 사멸 효과의 기전을 분석하기 위하여 Annexin V 염색과 DAPI 염색을 수행한 결과, 대조군에 비하여 apoptotic 세포 및 apoptotic body가 증가됨을 확인하였다. 또한 apoptosis 관련 단백질들의 발현변화를 분석한 결과, MEJG처리에 의해 사멸수용체인 Fas와 pro-apoptotic 단백질인 Bax의 발현이 증가되었으며, anti-apoptotic 단백질인 Bcl-2의 발현이 감소하였다. 이러한 결과로 cytochrome c가 미토콘드리아에서 세포질로 방출되어 증가되었으며, caspase-3, -8, -9가 활성화되었다. 최종적으로 PARP가 분해되어 apoptosis가 유도되었음을 확인하였다. 이러한 결과들로부터 MEJG는 내인성 및 외인성 경로를 통한 apoptosis 유도에 의하여 HT29 세포의 증식을 억제하는 항암활성을 보유하였음을 확인하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권11호
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• pp.1856-1861
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• 2007

Physiological cell conditions such as glucose deprivation and hypoxia play roles in the development of drug resistance in solid tumors. These tumor-specific conditions cause decreased expression of DNA topoisomerase $II{\alpha}$, rendering cells resistant to topo II target drugs such as etoposide. Thus, targeting tumor-specific conditions such as a low glucose environment may be a novel strategy in the development of anticancer drugs. On this basis, we established a novel screening program for anticancer agents with preferential cytotoxic activity in cancer cells under glucose-deprived conditions. We recently isolated an active compound, AA-98, from Streptomyces sp. AA030098 that can prevent stress-induced etoposide resistance in vitro. Furthermore, LC-MS and various NMR spectroscopic methods identified AA-98 as mithramycin, which belongs to the aureolic acid group of antitumor compounds. We found that mithramycin prevents the etoposide resistance that is induced by glucose deprivation. The etoposide-chemosensitive action of mithramycin was just dependent on strict low glucose conditions, and resulted in the selective cell death of etoposide-resistant HT-29 human colon cancer cells.

• 한국약용작물학회지
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• 제15권5호
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• pp.329-334
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• 2007

The potential antioxidant and anticancer activities of Hexane, EtOAc (Ethyl acetate), BuOH (n-Buthanol) and water fractions from methanolic (MeOH) extract of Picrasma quassioides (D. Don) Benn. were evaluated in vitro. Tested fractions showed strong antioxidant activity, especially EtOAc fraction had the highest activity ($IC_{50}\;=\;114.01\;{\mu}g/mL$), containing high total phenolics and total flavonoids contents, showed $67.59\;Tan\;{\mu}g/mg$ and $64.95\;Que\;{\mu}g/mg$ respectively. Anticancer activity of these fractions was tested by MTT assay on HT-29 (the human colon carcinoma cells) cell line. BuOH fraction not only showed very high anticancer activity, but also had no cytotoxic effect on 293 (the human normal kidney cells) cell line. Considering these results, we used BuOH fraction of MeOH crude extract from P. quassioides (D.Don) Benn. to do assessment of apoptosis by flow cytometry and the mRNA expression levels of widely established apoptotic-related genes on HT-29 cell line. All the experiments showed that BuOH fraction can induce apoptosis on HT-29 cell line strongly. Taken together, methanolic extract of P. quassioides has potential for antioxidant and anticancer activities products.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 제2회 추계심포지움
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• pp.147-172
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• 1994

Aziridinylbenzoquinones such as 3, 6-diaziridinyl-1, 4-benzoquinone (DZQ) and its 2, 5-methyl analog (MeDZQ) require bioreductive activation in order to elicit their anticancer activities. To determine the involvement of DTD in the activation of these drugs, we have used a ligation-mediated polymerase chain reaction to map the intracellular alkylation sites in a sing1e copy gene at the nucleotide level. We have performed this analysis in two human colon carcinoma cells, one proficient (HT-29) and one deficient (BE) in DT-diaphorase (DTD) activity. In the DTD proficient HT-29 cell line, DZQ and MeDZQ were found to alkylate both 5'-(A/T)G(C)-3' and 5'-(A/T)A-3' sequences. This is consistent with the nucleotide preferences observed when DZQ and MeDZQ are activated by purified DTD to reactive metabolites capable of alkylating DNA in vitro [Lee, C. -S., Hartley, J. A., Berardini, M. D., Butler, J., Siegel., D., Ross, D., & Gibson, N. W. (1992) Biochemistry, 31: 3019-3025]. Surprisingly in the DTD-deficient BE cell line a pattern of alkylation induced by DZQ and MeDZQ similar to that observed in the DTD-proficient HT-29 cells was observed. This suggests that reductive enzymes other than DTD can be involved in activating DZQ and MeDZQ to DNA reactive species in vivo.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권5호
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• pp.799-804
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• 2006

Ingestion of green tea has been shown to decrease prostaglandin $E_2$ levels in human colorectum, suggesting that tea constituents modulate arachidonic acid metabolism. In the present study, we investigated the effects of four purified green tea catechins, (-)-epicatechin (EC), (-)-epigallocatechin (EGC), (-)-epigallocatechin-3-gallate (EGCG), and (-)-epicatechin-3-gallate (ECG), on the catalytic activity of cytosolic phospholipase $A_2$ ($cPLA_2$) and release of arachidonic acid and its metabolites from intact cells. At $50\;{\mu}M$, EGCG and ECG inhibited $cPLA_2$ activity by 19 and 37%, respectively, whereas EC and EGC were less effective. The inhibitory effects of these catechins on arachidonic acid metabolism in intact cells were much more pronounced. At $10\;{\mu}M$, EGCG and ECG inhibited the release of arachidonic acid and its metabolites by 50-70% in human colon adenocarcinoma cells (HT-29) and human esophageal squamous carcinoma cells (KYSE-190 and 450). EGCG and ECG also inhibited arachidonic acid release induced by A23187, a calcium ionophore, in both HT-29 and KYSE-450 cell lines by 30-50%. The inhibitory effects of green tea catechins on $cPLA_2$ and arachidonic acid release may provide a possible mechanism for the prevention of human gastrointestinal inflammation and cancers.

• 대한한의학방제학회지
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• 제22권2호
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• pp.35-43
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• 2014

Objectives : The purpose of this study was to identify antiproliferative effects of Salviae miltiorrhizae Radix(SM) extracts against cancer cell lines. Methods : We used 2 kinds of cancer cell lines such as colon cancer cells(HT-29), human oral epitheloid carcinoma cells(KB). MTT assay was performed to examine the efficacy of SM extracts on the cytostaticity of cancer cells in proportion to time and doses. Apoptosis was evaluated by DNA laddering and DAPI nuclei staining. Results : The MTT absorbances against HT-29 and KB of SM extracts were significantly decresed. DNA ladders could be identified in KB of SM extracts. The morphological change were observed and number of cells were decreased by SM extracts. Conclusions : SM extracts is considered to be effective to induce apoptosis and inhibit cancer cell proliferation.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권4호
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• pp.425-432
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• 2013

본 연구에서는 인체 대장암세포인 HT29를 사용하여 포황 메탄올 추출물(Methanol extract of Typha orientalis, METO)의 항암 활성 및 그 분자적 기전에 관하여 분석하였다. 먼저 METO가 다양한 암세포의 증식에 미치는 영향을 분석한 결과, 인체 대장암 세포, 폐암 세포, 간암 세포 등의 세포증식을 억제하였으며 그 중에서도 대장암 세포인 HT29에 대해 강한 세포 증식 억제 효과를 나타내었다. METO에 의한 세포 증식 억제 기전을 분석하기 위하여 Flow cytometry analysis를 수행한 결과, METO 농도의존적으로 HT29 세포의 G2/M기 세포분포가 증가하고 아울러 apoptosis 유발군인 SubG1기 세포분포가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. METO에 의한 HT29 세포의 G2/M arrest는 Cdc2의 inactive form인 phospho-Cdc2의 증가에 의한 G2/M checkpoint 관련 단백질의 활성억제에 의한 것이라 사료된다. 이러한 phospho-Cdc2의 증가는 METO에 의해 발현이 증가된 Wee1 kinase와 발현이 감소된 Cdc25C phosphatase에 의해 야기된 것임을 확인하였다. 또한 METO에 의한 HT29의 apoptosis 유도에 관한 분자적 기전 분석을 위해 Western blot analysis를 수행한 결과, METO 농도가 증가할수록 종양 억제 유전자인 p53, death receptor인 FAS, Bcl-2 family 중 pro-apoptotic 단백질인 Bax 및 cytosolic cytochrome C의 발현이 증가되고, Caspase-3가 활성화되어 단편화된 Caspase-3의 증가가 관찰되었다. 또한 활성화된 Caspase-3의 기질 단백질인 PARP의 단편화가 일어나 apoptosis가 유도되는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과들로부터 METO는 인체 대장암세포 HT29의 G2/M arrest 및 apoptosis 유도에 의한 항암활성을 보유함을 확인하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제40권7호
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• pp.935-941
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• 2011

다양한 소금(정제염, 4년 숙성 천일염, 토판염)으로 제조한 김치를 발효시켜 산도 0.5~0.6%에 도달했을 때 이를 물과 메탄올로 추출하여 사용 소금에 따른 김치의 암세포 생육 억제효과를 조사하였다. 소금의 종류를 달리한 김치의 물추출물과 메탄올 추출물은 위암세포 AGS, 장암세포 HT-292 종의 암세포에 대해서 모두 농도가 증가할수록 농도 의존적으로 높은 세포 생육 억제율을 나타내었다. 최대 처리 농도인 5 mg/mL에서 AGS의 경우 정제염 김치의 물 추출물은 44%, 메탄올 추출물은 52%의 억제율을 보였고 천일염 김치의 물 추출물은 40%, 메탄올 추출물은 73%의 억제율을 보였으며, 토판염 김치의 물 추출물은 49%, 메탄올 추출물은 62%의 억제율을 나타냄을 보여 천일염 김치의 메탄올 추출물의 AGS 암세포 생육 억제효과가 매우 뛰어남을 확인하였다. 동일 농도에서 HT-29의 경우 정제염 김치의 물 추출물은 43%, 메탄올 추출물은 39%의 억제율을 보였고, 천일염 김치의 물 추출물은 37%, 메탄올 추출물은 48%의 억제율을 보였으며, 토판염 김치의 물 추출물은 42%, 메탄올 추출물은 46%의 억제효과를 나타냄을 보여 AGS에 대한 암세포 성장 억제효과보다는 다소 낮지만 4년 숙성 천일염과 토판염으로 제조한 김치의 메탄올 추출물이 HT-29 암세포의 높은 성장억제 효과를 보임을 확인하였다. 반면에 소금의 종류를 달리한 김치의 물 추출물과 메탄올 추출물은 모두 정상세포 BJ에 대해 세포독성을 거의 보이지 않으며 오히려 세포 성장효과를 보였다. 더 나아가 최대 암세포 생육 억제현상을 나타낸 4년 숙성 김치의 메탄올 추출물을 AGS, HT-29, BJ 세포에 처리하였을 때 정상세포 BJ에 대해서는 처리 전후 별다른 차이가 관찰되지는 않았으나 AGS 위암세포와 HT-29 장암세포에서는 모두 세포 밀도의 감소와 함께 일부 세포수축 현상을 관찰할 수 있었다. 이상의 결과로부터 기능적 측면(암세포 생육억제)에서 김치 발효에는 가장 좋은 소금은 4년 숙성 천일염이며, 소금의 숙성이 김치 발효에 매우 중요함을 알 수 있다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제2권4호
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• pp.348-353
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• 1997

The antimutagenic and cancer cell growth inhibitory effects of methanol extracts from 9 kinds of seaweed were studied in the Ames assay and cell culture systems, respectively. The methanol extracts from the seaweeds of sea lettuce, chlorella, sea tangle, sea mustard, sporophyll of sea mustard, fusiforme, seaweed papulosa, purple laver and ceylon moss showed antimutagenicities against aflatoxin B₁(AFB₁) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in the Salmonella typhimurium TA100. These extracts revealed relatively higher antimutagenicity against AFB₁(indirect mutagen) than MNNG(direct mutagen). Sporophyll of sea mustard and seaweed papulosa exhibited strong antimutagenic activity against AFB₁, and sporophyll of sea mustard, sea tangle and ceylon moss also reduced the mutagenicity induced by MNNG. The sporophyll fo sea mustard exerted the highest antimutagenic activity among the samples treated. The methanol extracts from 9 kinds of seaweed inhibited the growth of two cancer cell lines, AGS human gastric adenocarcinoma cells and HT-29 human colon carcinoma cells. Sea tangle, sea mustard and sporophyll of sea mustard inhibited the growth of cancer cells significantly. These results suggest that various seaweeds show not only antimutagenic activity but also growth inhibitory effect of some cancer cells.

• 한국독성학회:학술대회논문집
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• 한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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• pp.185-185
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• 2001

The CD95 (Fas, APO-1) is known to play a key role as a transmembrane cell surface receptor that mediates apoptosis of many cell types through binding with Fas ligand or cross-linking to agonistic anti-Fas antibody. Activation of CD95 provokes a potent and rapid responses in a variety of cell types by unknown mechanism.(omitted)