A simple and efficient analytical method for the simultaneous determination of seven tar color additives was developed using ion pair high performance liquid chromatography. The conditions for HPLC analysis were as follows: column, ${\mu}$-Bondapak C18 (10 ${\mu}m$, 300 ${\times}$ 3.9 mm i.d.); gradient mobile phase, 0.025 mol/L ammonium acetate (containing 0.01 mol/L tetrabutylammonium bromide)-acetonitrile-methanol (65:25:10) as a mobile for fraction A and 0.025 mol/L ammonium acetate (containing 0.01 mol/L tetrabutylammonium bromide)-acetonitrilemethanol (40:50:10) as a mobile for fraction B; flow rate, 1.0 mL/ min; detection wavelength, 254/520/620 nm. We could attain to the detection limits as 0.01~0.05 ${\mu}$g/mL (254 nm) and 0.005~0.01 ${\mu}$g/mL (520 nm) for six red tar color additives, and 0.05 ${\mu}$g/mL (254 nm) and 0.002 ${\mu}$g/mL (620 nm) for Fast green FCF. This analytical method was applicable to determine the tar color additives contained in several commercial cold syrups.
We previously isolated cordycepin, guanosine and tryptophan from Cordyceps militaris as antiadipogenic constituents. For the quality control of C. militaris for anti-adipogenic activity, simultaneous analytical method using high-performance liquid chromatography (HPLC)-diode array detection (DAD) was developed and validated. Quantitation of these compounds in various Cordyceps samples from different sources and various extraction methods were conducted using developed method. Our study shows that natural Cordyceps and host insect possess higher content than cultured ones and fruiting bodies, respectively. The content of cordycepin showed great difference in different C. militaris samples whereas trytophan content was similar in tested samples. Addition of water to extraction solvent greatly increased the yield of guanosine and tryptophan. High temperature and longer extraction time increased yield of guanosine, whereas the content of trytophan was decreased in high temperature during extraction with water. Extraction using ultrasonic apparatus slightly increased extraction efficiency. Cordycepin, however, has little variation in different extraction method tested. Strong anti-adipogenic activity was observed in the samples that contain all the three constituents. Taken together, quantitation of these compounds using developed analytical method might provide basic requirement for the anti-adipogenic activity of C. militaris.
Kim, Da-Eun;Kim, Min-Seon;An, Hye Suck;Lee, Jae Wook;Park, Jin-Soo
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.64
no.1
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pp.33-38
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2021
Marine sponges contain pharmacologically attractive substances that exhibit strong cytotoxicity and are used as materials to isolate potential drug candidates. However, with a growing interest in marine ecosystem conservation, it is becoming increasingly difficult to gather a sponge for natural product research. To build a database to cope with this issue, we measured the neuroprotective and anti-inflammatory activity of 181 sponge extracts. As a result, we found 17 samples with neuroprotective effects and 14 samples with anti-inflammatory effects. In addition, high-performance liquid chromatography (HPLC) analysis was performed to compare the components contained in each sample, and based on HPLC profiles, a dendrogram according to similarity was created. The results of this study suggested the possibility of discovering the active compounds in the sponge and laid the basis for efficient research on the sponge.
A sensitive high-performance liquid chromatographic method was developed to determine the content of cholesterol in milk and dairy products. To optimize separation of cholesterol, mobile phases including acetonitrile:2-propanol (8:1, v/v), acetonitrile:methanol (3:1, v/v), and acetonitrile:methanoI:2-propanol (7:3: I, v/v/v) were compared. Acetonitrile/methanol/2-propanol was superior to the other mobile phase systems for separating cholesterol. Liquid-liquid extraction (LLE) of cholesterol was simplified using a non-polar solvent, hexane, to remove interfering compounds, and had an excellent recovery $(100{\pm}1.0%)$ of cholesterol. A solid phase extraction (SPE) method using Sep-pak $C_{18}$ was developed and compared with LLE. The SPE method was rapid and highly reproducible. Both extraction methods were useful when used in combination with saponification of esterified cholesterol to facilitate total cholesterol determination. The detection limit of cholesterol was $0.01{\mu}g$. The newly developed HPLC method was rapid, simple, and accurate, and has advantages over the many methods commonly used.
A new isolation and purification method was developed aiming at increasing yield and purity for homoharringtonine. This method was a simple andefficient procedures, for the isolation and purification of homoharringtonine from Cephalotaxus koreana, consisting of solvent extraction, adsorbent treatment, low-pressure chromatography, and high performance liquid chromatography (HPLC). The crude homoharringtonine was efficiently pre-purified adequately to perform HPLC through a combination withadsorbent treatment and low-pressure chromatogaphy. The homoharringtonine can be simply obtained with high purity and yield from crude homoharringtonine by HPLC. Purified homoharringtonine was characterized.
The content of chiisanoside in the Acanthopanax Species was determined by reversed-phase high performance liquid chromatographic method. Chiisanoside was separated from the other components in the plant extracts using Zorbax 300 SB $C_{18}$ column with gradient elution of acetonitrile. Identification of chiisanoside was carried out by comparison in the LC/MS spectrum of separated peak from extract with that of standard. By HPLC analysis in this experiment, Acanthopanax species could be classified into two groups based upon the content of chiisanoside-one with low concentration of chiisanoside, such as A. senticosus and A. koreanum, and another with high concentration of chiisanoside, such as A. senticosus f. inermis, A. Divaricatus var. albeofructus, and A. chiisanensis.
Fluoroquinolones are the most common group of antibacterial agents currently used in the Korean aquaculture industry, and use of these agents has been increasing steadily. High performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection was used for the simultaneous determination of five fluoroquinolones in fish and shellfish: ofloxacin (OFL), pefloxacin (PEF), norfloxacin (NOR), ciprofloxacin (CIP), and enrofloxacin (ENRO). Fish and shellfish muscle was homogenized, and protein, lipid, and low molecular weight pigments were then excluded from the homogenate. The final eluates were analyzed by HPLC equipped with a Shiseido UG-120 type C18 reverse-phase column ($4.6{\times}250 mm$, $5{\mu}m$) and a fluorescence detector (excitation at 280 nm, emission at 450 nm). The mobile phase was 0.1 M phosphoric acid and acetonitrile solution (91:9, v/v) and tetrahydrofuran (THF) was added to it at a rate of 5 mL per a liter of the mobile phase. Adequate chromatography separation was obtained using the above method. Average recoveries of fortified samples at levels from 0.05 to 0.5 mg/kg were $72.3{\pm}2.5-84.5{\pm}1.2%$ for OFL, $82.7{\pm}3.3- 109.3{\pm}7.5%$ for NOR, $85.3{\pm}6.6-116.0{\pm}7.9%$ for PEF, $76.0{\pm}4.3-109.3{\pm}12.4%$ for CIP, and $78.7{\pm}5.9-100.0{\pm}9.8%$ for ENRO. The limit of detection of OFL was $5{\mu}g/L$, the others were $1{\mu}g/L$. We concluded that the new analytical method was suitable for the determination of fluoroquinolones in fish and shellfish.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.22
no.5
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pp.581-585
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1993
Five flavonoids isolated from the ethyl acetate fraction of Cedrela sinensis A. Juss. were identified by high performance liquid chromatography. Separation was achieved by reversed phase chromatography on ${\mu}-bondapak$ C18 column with isocratic elution method. The content of the major flavonoid, quercitrin was about 9.48%(w/w) and 37.06%(w/w) for the methanol extract and ethyl acetate fraction, respectively.
A simple and reproducible pretreatment method was developed for the determination of dioxins in milk sample. Liquid-liquid extraction (LLE) was used for the initial extraction of the analyte from milk. For the elimination of interferences coextracted from milk, acid treatment followed by multilayer silica gel, and then alumina column clean-up were performed. The clean extract could be obtained without carbon column or high performance liquid chromatographic (HPLC) clean-up procedure. Polychlorinated biphenyles (PCBs) and dioxins were separated on neutral alumina activated at 180 ℃ for 12 hours. The final extract was analyzed by HPLC and high resolution gas chromatography/high resolution mass spectrometry (HRGC/HRMS). The recovery of dioxins spiked in milk at 75-300 ppt level was 83.3-98.9% and their relative standard deviation was 4.1-14%.
A simple and reproducible pretreatment method was developed for the determination of dioxins in milk sample. Liquid-liquid extraction (LLE) was used for the initial extraction of the analyte from milk. For the elimination of interferences coextracted from milk, acid treatment followed by multilayer silica gel, and then alumina column clean-up were performed. The clean extract could be obtained without carbon column or high performance liquid chromatographic (HPLC) clean-up procedure. Polychlorinated biphenyles (PCBS) and dioxins were separated on neutral alumina activated at 180 ℃ for 12 hours. The final extract was analyzed by HPLC and high resolution gas chromatography/high resolution mass spectrometry (HRGC/HRMS). The recovery of dioxins spiked in milk at 75-300 ppt level was 83.3-98.9% and their relative standard deviation was 4.1-14%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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