• 미생물학회지
• /
• 제39권4호
• /
• pp.235-241
• /
• 2003

제1형 인간 면역결핍 바이러스 (human immunodeficiency virus type 1, HIV-1)의 Rev 단백질에 대하여 야생형보다 10배 더 잘 결합하도록 시험관에서 선택된 RRE40라 명명된 RNA aptamer가 과연 임상적으로 유용한지 알기 위하여 인체의 CD4^+ peripheral blood lymphocytes 세포에서 레트로바이러스 벡터를 이용하여 RRE40 RNA를 발현한 후에 그 세포에서의 HIV-1 증식 현상을 관찰하였다. 그 결과 대조군인 tRNA를 발현하는 유전자가 전달된 세포에 비해 RRE40 RNA를 발현하는 세포에서 보다 더 효과적으로 HIV-1의 증식이 억제되었다. 그러나 바이러스의 증식이 완전히 억제되지는 못 하였고 일시적 또는 감소된 형태로 바이러스 증식이 억제되었다. 이러한 결과는 RRE40 RNA가 decoy로서 세포에서의 HIV-1 증식 억제에 유용함을 시사하지만 RNA decoy를 HIV-1 감염 환자의 치료에 이용하기 위해선 보다 효과적인 유전자 전달방법 및 보다 개선된 RNA decoy의 개발 등이 필요할 것이다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제16권1호
• /
• pp.109-117
• /
• 2006

The Rev binding to Rev Responsive Element (RRE) of HIV-1 mRNA plays an important role in the HIV-I viral replication cycle. The disruption of the Rev-RRE interaction has been studied extensively in order to develop a potential antiviral drug. In order to provide the basis for a more promising approach to develop a Rev-RRE binding inhibitor against HIV-I infection, it is necessary to understand the binding modes of the aminoglycoside antibiotics to RRE. In the present study, the binding mode of a modified antibiotic, a neamine conjugated with pyrene and arginine (NCPA), to RRE has been studied by the methods of $T_m$ measurement and spectroscopic analysis of RRE with or without antibiotics. The results confirmed that NCPA competes with Rev in binding to RRE.

• Journal of Microbiology
• /
• 제41권4호
• /
• pp.300-305
• /
• 2003

Intracellular expression of RNA decoys, such as TAR or RRE decoy, has been previously shown to protect immune cells from human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) replication by inhibiting the binding of the HIV-1 regulatory protein to the authentic HIV RNA sequence. However, HIV-1 challenge experiments of primary human T cells, which express the RNA decoy, demonstrated that the cells were only transiently protected, and hence, more improved protocols for HIV-1 inhibition with the RNA decoys need to be developed. In this report, in order to develop a more effective RNA decoy, we analyzed and compared the ability of a series of RNA decoy derivatives in inhibiting HIV-1 replication in CEM cells. Using an improved tRNA cassette to express high levels of RNA decoy transcripts in cells, we found that co-expression of both TAR and RRE decoys, in the form of an aligned sequence in a single transcription cassette, much more potently blocked cells from HIV-1 than the expression of only one kind of RNA decoy. This observation will have an important implication for experiments involving optimization of clinical applications in RNA decoy-based gene therapy against HIV-1.

• 생명과학회지
• /
• 제7권3호
• /
• pp.161-166
• /
• 1997

HIV-1 Rev단백질은 바이러스의 구조단백질의 발현조절에 매우 중요한 역할을 하며RNA가 1차발현된 원형대로 또는 일부만이 절단/재조합된 상태로 세포질에 집적되는 것을 가능하게 한다. env gene에 존재하는 Rev-responsive element RNA는 복잡한 RNA구조를 지니면서 Rev의 기능을 위하여 필수적으로 필요시 된다. 그러나 이러한 절차의 완전한 진행을 위해서는 핵단백질이 요구되는 것으로 추정된다. 본 연구에서는 electrophoretic mobility shift, UV-crosslinking 또는 SDS/PAGE등의 실험을 통하여 36/37, 56, 41, 76, 150 kD등의 핵단백질등이 RRE RNA와 결합반응하는 것을 발견하였으며 특히 36/37 과 56 kD 단백질을 5분간의 자외선조사에 의해 특히 RRE RNA에 결합하는 핵단백질들은 gel mobility shift assay에서 Rev RNA인식결합에 경쟁적인 특징을 나타내고 있다.