IgY was separated from a hen's egg yolk that was immunized with Helicobacter pyroli. The anti-H. pyroli IgY activity at acidic pH and the suppressive effect of polyol on acid-induced inactivation of IgY were investigated. Sorbitol and xylitol were used as polyols. IgY was quite stable at pH 5~7. Irreversible inactivation of IgY was observed at pH below 4, and proceeded rapidly at pH below 3. The acid stability of IgY was enhanced in the presence of 30% sorbitol or above. In a 50% aqueous sorbitol solution, an acid-induced inactivation was almost completely suppressed at pH 3. However, the improvement of IgY activity was not observed in the aqueous xylitol solution. IgY showed almost the same activity as native IgY when sucrose was substituted for sorbitol. On the other hand, the xylitol replacement with sucrose did not enhance the acid stability of IgY. The acid-induced inactivation of IgY was related to tryptophyl fluorescence. Fluorescence emission spectra suggested that structural changes near the tryptophan residues may occur under acidic conditions. An increase in sorbitol concentration induced a blue shift. The fluorescence emission of IgY in a 50% sorbitol solution had a peak at 330 nm, which was the same emission peak that was exhibited by native IgY. Sorbitol could, therefore, be used as a good stabilizer of IgY under acidic conditions.
본 연구는 H. pyroli 억제능을 지닌 김치 유래 유산균인 Pediococcus pentosaceus MD1을 가지고 궤양 예방효과를 지닌 김치를 개발하기 위한 선행연구로서 독성평가 실험을 수행하고자 4주 반복 투여 독성시험을 실시하였다. 본 시험에서 설정한 최고 용량 투여군인 2,000 mg/kg에서도 일반증상관찰, 체중변화, 사료섭취량 및 물 섭취량을 측정한 결과, 모두에서 시험물질과 관련된 유의성 있는 변화가 관찰되지 않았다. 또한 혈액학적, 혈액생화학적 검사 및 장기의 육안적 관찰 및 장기 중량변화에서도 대조군과 유의성이 있는 차이를 보이는 항목이 없었으며, 모두 정상범위를 벗어나지 않아 시험물질에 기인하는 이상소견을 발견할 수 없었으므로, 최대 무해 용량은 2,000 mg/kg 이상일 것으로 추정되었다. 이상의 결과 4주 반복 투여 독성시험 결과 H. pyroli 억제능을 지닌 유산균인 Pediococcus pentosaceus MD1은 저독성물질로 판정되었으며, 유산균이 기능성식품 소재로서의 안전성 확인을 통하여 소비자들에게 소화성 궤양 예방효과를 지닌 안전하고 차별화된 경쟁력 있는 김치를 개발할 수 있을 것으로 사료된다.
The antagonistic activities of 30 strains of lactobacilli against Helicobacter pylori were determined and Lactobacillus helveticus CU631 has been selected as the strain which possesses the strongest inhibitory effect in the disc diffusion assay showing inhibition zone diameter of $10{\pm}1.5mm$, whereas those of L. plantarum and L. fermentum have been shown to be $4.0{\pm}0.6mm$. H. pylori G88016 revealed the highest vacuolating toxin producing activity among the 8 strains, the inhibitory activity of L. helveticus CU631 in vacuolating toxin producing activity of H. pylori manifested in the co-culture of two strains and in the 5:5 mixture of supernatant of the two strains. Both L. helveticus CU631 and cell free culture supernatant had a strong inhibitory activities in urease and cytotoxin producing activities of H. pylori NCTC11637 and CJH12. An accelerated proteolytic activity of water soluble peptides by L. helveticus CU631 during the refrigeration storage has been manifested in the cream cheese. DNA seqences of 16S-23S ribosomal RNA spacer region showed typical pattern among the various strains of L. helveticus, which could be used in the identification of L. helveticus CU 631.
Alnus japonica Steud (A. japonica) have long been used in the traditional medicine for gastric disorder, hepatitis and fatty liver in Korea. Antiulcer effects of A. japonica hot water extract (AJ ext) were evaluated by in vitro antibacterial activity against H. pylori, by the inhibitory action against the in vitro gastric $H^+/K^+$-ATPase and using rat models of gastric mucosal damage and gastric ulcer induced by HCl-ethanol, indomethacin, and restraint and water-immersion stress. For the determination of antibacterial activity of AJ ext against H. pylori, the activity of urease which released from H. pylori was measured in culture. AJ ext showed weak antibacterial activity against H. pylori with the growth inhibitions of 37% and 61% by adding final concentrations of 500 and $1000{\mu}g/ml$ culture, respectively at 24 h. To observe the inhibitory activity of AJ ext against the $H^+/K^+$-ATPase in hog gastric membrane vesicle, $IC_{50}$ value of AJ ext was $806.3{\mu}g/ml$. Pretreatment of AJ ext (200, 500 mg/kg, p.o.) prevented in a dose-dependent manner the acute gastritis in HCl-ethanol model and the formation of gastric ulcer in indomethacin model and restraint and water-immersion stress model. These results suggest that the AJ ext can be used for prevention and treatment of gastric mucosal damage and ulcers induced by various stress.
Helicobacter pylori (H. pyroli) infection it associated with type B gastritis, peptic uler disease, and gastric cancer. The vacuolation of cells induced by H. pylori is thought to be essential for the initiation and maintenance of gastric infection. The roles of H. pylori cytotoxin, urease, and ammonia in the vacuolation of HeLa cells were determined. H. pylori toxin induced vacuolation of HeLa cells. Korean and Japanese radishes significantly prevented the vacuolation of HeLa cells induced by H. pylori toxin. The urease activity in vacuolated cells was also decreased with Korean and Japanese radishes. H. Pylori toxin-induced vacuolation was inhibited by vacuolar type ATPase inhibitors (bafilomycin and N-ethylmaleimide). However, further investigation is required to determine the mechanisms of radish for the inhibition of vacuole formation of eukaryotic cells in response to the H. pylori toxin.
Acetyl-CoA carboxylase (ACC) is an excellent candidate for antibiotics drug target, which mediates malonyl-CoA synthesis from acetyl-CoA through acetylation process. It is also involved in the committed step of fatty acid synthesis which is essential for living organisms. We have determined the three dimensional structure of C terminal domain of HP0371, biotin-carboxyl carrier protein of H. pyroli, in solution state using heteronuclear multi-dimensional NMR spectroscopy. The structure of HP0371 shows a flatten b-sheet fold which is similar with that of E. coli. However, the sequence and structure of protruding thumb are different with that of E. coli and the thumb shows different basis of structural rigidity based on backbone dynamics data.
목 적: Helicobacter pylori는 위염의 원인균으로 사춘기의 철 결핍성 빈혈 빈혈과 관계가 있다고 생각된다. H. pylori feoB 유전자는 철 결핍 상태에서 철의 획득에 있어 중심적인 역할을 한다. 본 연구는 철 결핍성 빈혈이 있거나 또는 없는 H. pylori 위염 환자들에 있어서 H. pylori feoB의 염기 구조 차이를 분석하려고 하였다. 방 법: 10~18세의 H. pylori가 양성인 14명을 철 결핍성 빈혈 유무에 따라 두 군으로 분류하였다. 8명의 환자들은 철 결핍성 빈혈로 진단 받았고 나머지 6명은 정상의 혈액학적 소견들을 나타내었다. 위장의 생검 조직에서 배양된 H. pylori에서 genomic DNA를 분리하였다. feoB 유전자의 PCR 증폭을 위해 5개의 primer를 사용하였다. PCR의 결과로 1.93 kb의 feoB region이 생성되었다. H. pylori J99와 26695의 feoB 유전자 염기 배열과 임상 균주를 비교하였다. 또한 철결핍성 빈혈 동반 유무에 따른 두 군 사이에 feoB 유전자를 비교하였다. 결 과: feoB 유전자의 분석으로 16개의 다형성 위치를 밝혀내었다. 이중에서 3개의 다형성 (Glu/Thr254Ala, Ile263Val과 Lys511Gln)은 한국에 고유한 것이었다. 비록 철 결핍성 빈혈 유무에 따른 비교에서 4곳에 통계학적인 차이가 나타나기는 했으나 이것이 실제적인 차이라고 보기에는 검체의 수가 적었다. 결 론: 철 결핍성 빈혈 유무에 따른 군 간 비교에서 4곳의 feoB 다형성 차이를 보였으나 대상 균주 수가 적어 의미를 두기에는 아직 불명확하다. 더 많은 다원적 연구가 필요할 것으로 보인다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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