Yeniova, Abdullah Ozgur;Uzman, Metin;Kefeli, Ayse;Basyigit, Sebahat;Ata, Naim;Dal, Kursat;Guresci, Servet;Nazligul, Yasar
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권13호
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pp.5199-5203
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2015
Background: Helicobacter pylori (H.pylori) is associated with chronic gastritis, peptic ulcers, gastric adenocarcinomas and mucosa associated tissue lymphomas. Cytotoxin associated gene A (CagA) is one of the virulence factors of H.pylori. It is hypothesized that reactive oxygen species (ROS) play roles in H.pylori associated disease especially in development of gastric adenocarcinoma. Individuals infected with H.pylori bearing CagA produce more ROS than others. 8-hydroxydeoxyguanosine (8OHdG) is an in vitro marker of DNA damage and oxidative stress. The aim of this study was to investigate the relationship between 8OHdG level, H.pylori infection and CagA and alterations of serum 8OHdG level after H.pylori eradication. Materials and Methods: Patients admitted with dyspeptic complaints and upper gastrointestinal endoscopy were assessed. H.pylori was determined from histopathology of specimens. Serum 8OHdG levels of three groups (H.pylori negative, H. pylori positive CagA negative and H.pylori positive CagA positive) were compared. Patients with H.pylori infection received eradication therapy. Serum 8OHdG levels pretreatment and posttreatment were also compared. Results: In total, 129 patients (M/F, 57/72) were enrolled in the study. Serum 8OHdG level of H.pylori negative, H. pylori positive CagA negative and H.pylori positive CagA positive groups were significantly different ($5.77{\pm}1.35ng/ml$, $5.43{\pm}1.14ng/ml$ and $7.57{\pm}1.25ng/ml$ respectively, p=0.05). Furthermore, eradication therapy reduced serum 8OHdG level ($6.10{\pm}1.54ng/ml$ vs $5.55{\pm}1.23ng/ml$, p=0.05). Conclusions: Individuals infected with H.pylori bearing CagA strains have the highest serum 8OHdG level and eradication therapy decreases the serum 8OHdG level. To the best of our knowledge this is the first study that evaluated the effect of CagA virulence factor on serum 8OHdG level and the effect of eradication therapy on serum 8OHdG levels together. Eradication of CagA bearing H.pylori may prevent gastric adenocarcinoma by decreasing ROS. 8OHdG level may thus be a good marker for prevention from gastric adenocarcinoma.
본 연구는 살균온도, pH 및 소화효소의 처리에 따른 anti-H. pylori IgY의 안정성을 평가하였다. 열 안정성 실험시 모든 처리구에서 anti- H. pylori IgY 함량은 대조구에 비해서 유의적으로 감소되었다(p<0.05). 그러나 저온살균 처리구(63$^{\circ}C$, 30분)와 초고온살균 처리구(130$^{\circ}C$, 2초)에서 WSF 중 anti-H. pylori IgY 함량은 각각 76%와 78% 이었다. pH의 안정성은 pH를 7.0에서 1.5로 감소시킴에 따라 anti-H. pylori IgY의 함량은 감소되는 경향을 보였다. pH 5.0으로 조정한 WSF를 37$^{\circ}C$에서 1시간 처리한 후 anti-H. pylori IgY의 함량은 84.4%인데 비해서 pH 2.5에서는 28.6%의 anti-H. pylori IgY 함량을 보였다. 그리고 pepsin과 trypsin을 처리한 후 anti-H. pylori IgY의 안정성도 평가하였다. 100 unit의 pepsin에서 1시간과 2시간 처리시에는 시간에 따른 항체의 함량은 차이가 없었으나, 200 unit의 pepsin 처리구에서는 시간에 따른 항체 함량이 유의적으로 차이가 있었다(P<0.05). 그러나 pepsin의 농도나 반응시간에 관계없이 pH 4.0에서 항체는 비교적 안정하였다. pH 7.0, 37 $^{\circ}C$에서 trypsin을 처리한 후 난황액과 WSF 중 anti-H. pylori IgY의 함량은 반응시간의 증가에 따라서 유의적으로 감소되었다(P<0.05). 난황액 중 항체 함량은 120분 처리시 85%가 잔존하였으나, WSF 중 항체 함량은 30분 처리시 62%로 감소하였다. Trypsin을 처리한 후 난황중의 항체의 안정성은 WSF 보다 유의적으로 높았다(P<0.05).
목 적: Helicobacter pylori (H. pylori)에 의한 질병 발생의 병독 인자로 cagA, picB 및 iceA 등의 유전형이 연구되고 있으며, 최근에는 위 상피세포의 증식(proliferation)과 세포사(apoptosis)의 불균형이 중요시되고 있다. 이에 H. pylori 감염 소아에서 위 상피세포 증식과 세포사 및 cagA, picB 및 iceA 유전형의 관련성을 알아보고자 하였다. 방 법: 1999년 8월부터 2001년 6월까지 이화여자 대학교 목동병원 소아과에서 소화기 증상으로 내시경을 시행하여 H. pylori 감염으로 진단된 20예와 감염 음성 20예를 대상으로 하였다. H. pylori 감염 양성은 조직학적으로 H. pylori 균이 관찰되고, CLO 검사와 ureC PCR이 전부 양성인 경우로 하였다. 위생검 조직에서 개정된 시드니 체계를 이용하여 조직 소견을 분석하고, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) 발현으로 위 상피세포 증식의 정도를 in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) 방법으로 세포사의 정도를 조사하였다. cagA, picB 및 iceA 유전자에 대해 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 결 과: 1) 세포 증식 지표는 H. pylori 감염 양성에서 $77.4{\pm}13.12$로 음성 $52.3{\pm}12.20$에 비하여 유의하게 높았다(p=0.000). 세포 증식 지표는 H. pylori 밀도가 증가할수록(r=0.624, p=0.000, 다핵형 중성구의 활동성이 증가할수록(r=0.460, p=0.005), 만성 염증이 증가할수록(r=0.433, p=0.009) 증가하였다. 2) 세포사 지표는 H. pylori 감염 양성에서 $0.70{\pm}0.411$, 음성에서 $0.14{\pm}0.201$로 감염 양성에서 음성보다 유의하게 높았다(p=0.000). 세포사 지표는 H.pylori 밀도가 증가할수록(r=0.691, p=0.000), 다핵형 중성구의 활동성이 증가할수록(r=0.585, p=0.000), 만성 염증이 증가할수록(r=0.535, p=0.001) 증가하였다. 3) 세포 증식 지표가 증가할수록 세포사 지표는 유의하게 증가하였다(r=0.527, p=0.001). 4) H. pylori 감염 양성에서 유전형의 양성률은 cagA 90%, picB 75%, iceA1 60% 및 iceA2 15%였으며, cagA, picB, 및 iceA 유전형에 따른 세포 증식지표, 세포사 지표, 내시경 소견 및 조직 소견에는 유의한 차이가 없었다. 결 론: H. pylori 감염 소아에서 위 상피세포 증식 지표와 세포사 지표가 균형을 이루면서 증가하였으며, cagA, pic B 및 iceA 유전형에 따른 유의한 차이는 없었다. 이는 위 상피세포 증식과 세포사가 H. pylori의 병인에 중요함을 시사하며, 앞으로 세포 증식과 세포사의 기전과 유발 요인, 여러 유전형과의 관계, 성인과의 비교 연구 등이 필요하리라 생각된다.
Background: Gastric cancer is the second leading cause of cancer-related deaths worldwide and infection with H. pylori is considered essential for its development. Helicobacter pylori infects more than 50% of the world's population with higher prevalence in developing countries than developed countries. The prevalence of H. pylori varies in different societies and geographical locations. The objectives of this study were to estimate the seroprevalence and determine the risk factors of H. pylori infection in dyspeptic patents in Ethiopia. Materials and Methods: A cross-sectional study involving 209 dyspeptic patients was carried out from February 15 to April 30, 2013. Five to ten ml venous blood was collected from each dyspeptic patient and analyzed for detection of Helicobacter pylori immunoglobulin (IgG). The socio-demographic characteristic, hygienic practices, alcohol consumption, sources of drinking water and types of latrine were also obtained with a pre-tested questionnaire. Results: The overall seroprevalence of Helicobacter pylori was 72.2%. There was statistically significant difference in the prevalence of H. pylori among age groups (p=0.02). Seroprevalence of H. pylori was higher in those patients who used unprotected surface water (76.4%) than those with access to piped tap water (65.9%). There was also statistically significant differences in prevalence of H. pylori with the habit of hand washing before meal (p=0.01) and alcohol consumption (p=0.001). Conclusions: The prevalence of H. pylori was high in the study area and increased with age of dyspeptic patients. Alcohol consumption and the type of drinking water are risk factors that have associations with the prevalence of H. pylori. Molecular epidemiological techniques can show a true picture of H. pylori and improvement in the drinking water quality is recommended.
뽕잎으로부터 분리한 H. pylori 억제물질이 건강기능식품으로 산업화되기 위하여 이들 유용성분이 생체 내에서 약리성을 가지는지 여부를 검토하였다. 청목노상으로부터 분리한 혼합물은 $200{\mu}g/100{\mu}L$의 농도에서 H. pylori에 대한 저해 clear zone을 형성하여 항균활성을 나타내었고, C57BL/6종 mouse에 H. pylori의 감염을 유도 한 결과 6주 이상이 되어야 H. pylori의 감염이 되는 것을 확인하였으며, 이 때 감염균수는 평균 $8{\times}10^5$ CFU/mL이었다. 경구투여를 통해 청목노상뽕잎에서 추출한 유효성분의 혼합물이 H. pylori 감염에 있어 예방 및 치료 효과를 갖는지 시험한 결과, 절개된 위속의 H. pylori colony 수가 약물투여 군에서 대조군에 비해 감소한 것을 확인하였다. 마우스의 혈청을 분리하여 immunoglobulin isotype을 측정한 결과, 대조군 보다 IgG1, IgA 등이 높게 생성되는 것이 확인되었고, 시료 혼합물에 의해 항체생성이 증가되어 H. pylori 감염을 억제하는 것으로 판단되었다. 이러한 결과로 뽕잎에서 추출한 유용성분인 caffeic acid, rosemarinic acid와 chlorogenic acid가 H. pylori의 감염에 있어서 예방 또는 치료효과가 있는 것으로 확인되었다. 따라서 H. pylori에 의해 유발되고 감염률이 증가되고 있는 위염, 위궤양, 위암의 예방과 치료가 가능할 것으로 판단되었다.
목 적: Helicobacter pylori (H. pylori)에 감염된 환자에서 나타나는 결절성 위염은 소아에 특징적인 소견이지만, 지금까지 이에 대한 연구가 이루어지지 못 하였다. 본 연구에서는 H. pylori 감염이 없는 소아 환자의 위 점막의 유전자 발현 양상과 H. pylori에 감염에 의한 결절성 위염이 있는 소아 및 결절성 위염이 없는 소아의 위 점막 유전자 발현 양상을 microarray를 이용하여 비교함으로써 H. pylori 감염 시에 소아의 위 점막에 나타나는 유전자 발현 양상의 변화를 규명하고자 하였다. 방 법: 분당서울대학교 소아청소년과에 내원하여 상 부위장관내시경검사에 의한 위 점막 조직검사를 시행받은 12명의 소아청소년을 대상으로 하였다. 이들을 H. pylori 양성이면서 육안적인 병변이 없는 환아 4명의 HP(+)NG(-)군과, 위 전정부에서 결절성 위염 소견이 관찰된 환아 4명의 HP(+)NG(+)군으로 나누고, 연령 및 성별이 일치하는 H. pylori 음성인 4명의 소아를 대조군인 HP(-)NG(-)군으로 분류하였다. $-70^{\circ}C$에 냉동보관한 위 점막 조직에서 RNA를 추출하여 microarray를 시행하고 분석된 결과에 의거하여 발현 정도에 변화가 있는 유전자를 분석하였다. 결 과: 대상 환자 12명(남자 6명, 여자 6명, 평균 연령 9.8세)의 위 점막 조직에서 cDNA microarray 시행하여 H. pylori 감염의 유무에 따라 유전자 발현 정도를 비교하였을때, H. pylori 감염된 위 점막은 감염되지 않은 소아에 비해 182개의 유전자가 과발현 되었으며, 29개의 유전자가 발현이 저하되었다. H. pylori 감염이 확인 된 8명을 결절성 위염의 유무에 따라 유전자 발현 정도를 비교분석하였을 때, 상부위장관 내시경검사에서 H. pylori 감염과 연관된 결절성 위염을 보인 환자의 위 점막은 결절성 위염이 없는 H. pylori 감염 환아의 위 점막조직에 비해 5개의 유전자가 발현이 증가하였으며 5개의 유전자가 발현이 저하되었다. 결 론: 소아의 위 점막은 H. pylori 감염 여부에 따라 뚜렷한 유전자 발현의 차이를 보이며, 결절성 위염이 동반된 H. pylori 감염 환자의 위 점막은 일부 유전자에서 발현의 차이를 보이는 것을 알 수 있었다. 향후 추가적인 연구를 통해 소아에서 H. pylori 감염에 의한 결절성 위염의 발병 기전을 밝히려는 시도가 필요할 것이다.
Seo, Ji-Hyun;Woo, Hyang-Ok;Youn, Hee-Shang;Rhee, Kwang-Ho
Clinical and Experimental Pediatrics
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제57권2호
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pp.67-71
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2014
Pediatric infection with Helicobacter pylori may occur early in childhood and persist lifelong. Global pediatric clinical studies have reported a decreasing tendency in the overall rate of H. pylori eradication. In pediatric patients with H. pylori infection, pediatric patients with peptic ulcer, and the first-degree relatives of patients with a history of gastric cancer, it is commonly recommended that H. pylori strains be eradicated. Antibiotic drug resistance to H. pylori, which has been reported to vary widely between geographic regions, is mainly associated with treatment failure in these patients. It is therefore imperative that the antibiotic resistance rates of H. pylori in children and adolescents be meticulously monitored across countries and throughout geographic regions. This paper particularly focuses on the antibiotic drug resistance of H. pylori and the thearpy of pediatric H. pylori infection cases.
Helicobacter pylori is a spiral-shaped, microaerophilic human gastric pathogen causing chronic-active gastritis in association with duodenal ulcer and gastric cancer. To investigate the possibility of H. pylori outer membrane proteins (OMPS) as the oral vaccine antigens, sarcosine-insoluble outer membrane fraction has been prepared from H. pylori NCTC 11637. The major OMPs having apparent molecular masses of 62 kDa, 54 kDa and 33 kDa were detected by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which were identified as urease B subunit (UreB), heat shock protein (Hsp54 kDa) and urease A subunit (UreA), respectively. Minor protein bands of 57 kDa, 52 kDa, 40 kDa, 36 kDa and 31 kDa were also observed. The antigenicity of H. pylori OMPs and antigenic cross-reactivity among the strains were determined by immunoblot analysis using anti-H. pylori OMPs antisera or intestinal lavage solutions. The results showed that UreB, Hsp54 kDa, UreA and 40 kDa proteins vigorously stimulated mucosal immune response rather than systemic immunity. From this results, these proteins seemed to be useful as the antigen candidates for the oral vaccine. The immunoblotting results with surface proteins from eight isolated H. pylori strains were similar to that of H. pylori NCTC 11637. The IgA which had been arised from oral administration of H. pylori OMPs, was able to bind H. pylori whole-cells.
Lactobacillus acidophilus is known to have an inhibitory activity on growth of Helicobacter pylori and this activity has been attributed to lactic acid and antibacterial agents produced by Lactobacillus. Since every Lactobacilli produces lactic acid, an another factor must exist for L. acidophilus to inhibit H. pylori growth. In this work, the inhibitory activity of L. acidophilus on H. pylori adherence was studied. An immunoabsorbent assay using TLC plate was developed and used for screening the inhibitory activity of various Lactobacilli on H. pylori adherence. Glycolipid, the attachment site for H. pylori, was isolated from blood type O red blood cells and spotted on a TLC plate. The H. pylori adherence increased linearly with increasing amounts of glycolipid spotted on the TLC plate. Various L. acidophilus strains, but not L. casei, appeared to inhibit H. pylori adherence to glycolipid, and the adherence decreased linearly as the concentration of the Lactobacillus increased. The results show that the inhibitory activity of L. acidophilus on H. pylori adherence is an another factor for L. acidophilus to inhibit H. pylori growth.
Helicobacter pylori (H. pylori) infection rapidly stimulated either COX-2 or 5-LOX and released arachidonic acid metabolites that have been considered as pivotal mediators in H. pylori-induced inflammatory responses. To determine whether red ginseng extract (RGE) can suppress the biosynthesis of 5(S)-hydroxyeicosatetraenoic acids (HETE), a precursor metabolite of leukotrienes B4 (LTB4) in H. pylori-provoked inflammatory responses in gastric epithelial cells, the biosynthesis of monohydroxy fatty acids was measured using radioactive arachidonic acid and validated by RP-HPLC using non-radioactive AA as substrate in AGS cells cocultured with H. pylori (ATCC 43504) with or without pretreatment of RGE. Among three known major HETEs, H. pylori infection specifically induced the biosynthesis of $^{14}C-5(S)-HETE$ rather than the complex of $^{14}C-15S-/^{14}C-12(S)-HETE$ from $^{14}C-AA$, concomitantly obtained by HPLC(p<0.01). RGE, 1 to $100{\mu}g/ml$, selectively suppressed H. pylori-stimulated $^{14}C-5(S)-HETE$ production implying the attenuation of 5-lipoxygenase activity, of which was similar to known LOX inhibitor NDGA $(10{\mu}M)$ (p<0.01). However, the amount of 5(S)-HETE was significantly reduced by higher dose of RGE $(100{\mu}g/ml)$ (p<0.05). These results indicated that LOX pathway might be one of principle pathogenic mechanisms of H. pylori and red ginseng could be a nutraceutical against H. pylori infection through inhibiting action of LOX activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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