• Reproductive and Developmental Biology
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• 제31권3호
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• pp.187-191
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• 2007

본 연구는 사람 H-transferase가 과발현하는 돼지 체세포주를 개발하는데 있다. 돼지 세포에 사람 H-transferase 유전자를 발현시키는 것은 이종간 장기 이식에 있어서 초급성 거부 반응을 방지하기 위한 한 가지 방법이다. 본 연구에서는 과발현 벡터를 구축하기 위하여 사람 H-transferase을 HepG2 세포로부터 동정하였으며, 이 유전자를 CMV promoter를 이용하여 발현할 수 있도록 포유동물 발현 벡터인 pRc/CMV벡터에 삽입하였다. 또한, 돼지 산자의 귀 세포를 이용하여 체세포를 수립한 후 jetPEI DNA transfection reagent를 이용하여 벡터를 도입하였고, $300{\mu}g/ml$의 G418로 12일간 선별하였다. PCR을 이용하여 선별된 colony들을 분석한 결과, 벡터가 도입되었음을 확인하였고, RT-PCR을 이용하여 사람 H-transferase mRNA가 발현하는 것을 확인하였다. 본 연구에서 확립된 세포주는 사람 H-transferase가 과발현하는 형질 전환돼지의 생산에 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제19권4호
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• pp.381-388
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• 2001

목적 : 사람의 유방암 세포인 MCF-7 세포주를 대상으로 gultathione S-transferase K1 (hGSTK1) 유전자의 발현 정도 및 방사선 조사에 의한 hGSTK1 유전자의 발현 변화를 관찰하고 hGSTK1 유전자를 과발현시킴으로써 hGSTK1이 방사선 감수성에 어떤 영향을 미치는 지를 관찰하였다. 재료 및 방법 : 사람의 모유두 세포 pBluescript phagemid cDNA library로부터 선별한 hGSTK1 cDNA를 pcDNA3.1/Myc-His (+) vector에 결합시킨 후, 사람의 유방암 세포인 MCF극 세포에 이입시켰다. hGSTK1 유전자를 이입시키지 않은 MCF극 세포와 hGSTK1을 이입시킨 MCF-7 세포에 $2\~12\;Gy$의 엑스선을 조사하여 생존 분획을 비교하였다. hGSTK1 유전자를 이입시키지 않은 MCF-7 세포와 hGSTK1을 이입시킨 MCF-7 세포에서 방사선량, 분할조사 여부, 방사선 조사 후 경과 시간에 따른 hGSTK1 mRNA 발현의 차이를 보기 위하여 RT-PCR 분석을 시행하였다. 결과 : hGSTK1 유전자를 이입시키기 전의 MCF-7 세포보다 hGSTK1 유전자를 이입시킨 MCF-7 세포에서 생존 분획이 유의하게 높은 것으로 나타났다. hGSTK1 유전자를 이입시키지 않은 MCF-7 세포에서 2 Gy 생존 분획은 $0.3250{\pm}0.0319$였고, hGSTK1 유전자를 이입시킨 MCF-7 세포에서 2 Gy 생존 분획은 $0.4125{\pm}0.0325$였다 (p<0.05). 그러나 RT-PCR에 의한 hGSTK1 mRNA 분석에서는 방사선량, 분할조사 여부, 방사선 조사 후 경과 시간에 따른 발현의 차이를 볼 수 없었다. 결론 : MCF-7 세포주에서 hGSTK1의 과발현은 방사선 감수성에 영향을 미쳐서 MCF-7 세포의 생존 분획을 증가 시켰다고 볼 수 있으나 이에 대한 정확한 기전을 알기 위해서는 더 많은 연구가 필요할 것이다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.417-422
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• 1990

선발균의 효소생산성 향상을 위해 배양과정의 특징을 조사하였다. 효소생산을 위한 최적의 탄소원은 sucrose (35)이고, 질소원은 ammonium oxalate와 yeast extract를 함께 넣어 주었을 때이었다. 5l jar fermentor에서 선발균의 배양형태를 조사한 결과 2-3일 배양기간에는 pH가 4 이하로 현저하게 감소하는 것을 관찰하였고 4일 이후 다시 pH가 5-6 사이로 증가하였다. 균의 성장은 4일까지 증가하였다. 균체내 효소의 생성은 2일까지는 현저한 증가를 보이고 3-4일 정도 큰 변화를 나타내지 않으며 5일 이후 감소하였다. 균체외 효소는 5-6 일까지 계속 증가하는 형태를 나타내었다. Glucose로 24시간 동안 미리 배양한 후 surcose를 첨가하여 배양했을 때 균체내 효소의 생산이 현저히 증가하는 것을 알 수 있었다.

• 한국자원식물학회지
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• 제18권2호
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• pp.240-245
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• 2005

더덕 뿌리에서 유래한 EST cDNA library로부터 GST(glutatione S-transferase)유전자와 높은 상동성을 나타내는 full clone cDNA를 얻었다. 더덕의 GST(glutatione S-transferase), CIGST은 761 bp의 cDNA로 173개의 아미노산을 코딩하는 522 bp의 ORF를 가지고 있으며, A. thaliana(AAC63629) $71\%$, C. chinense(CAI51314) $73\%$, E. esula(AAE65767) $75\%$, H. muticus(CAA55039) $70\%$, N. plumbaginifolia(CAA96431) $77\%$, S. commersonii(AAB65163) $76\%$등 다른 식에서 밝혀져 있는 GST(glutatione S-transferase)와 유의한 상동성을 나타내였다.

• 약학회지
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• 제48권3호
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• pp.213-217
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• 2004

For the determination of glutathione S-transferase activity, a new method was established by using HPLC system. Moreover, amount of enzyme for a optimum reaction was determined by a comparative study with a variety concentration of enzyme. Using a established method, activity of glutathione S-transferase that is alcohol metabolizing enzyme was investigated on the fruit of Hovenia dulcis Thunb. As the result of experiment, EtOH and $H_2O$ extracts of the fruit of Hovenia dulcis Thunb showed visible a synergistic effect of glutathione S-transferase activity. On a continuous experiment, EtOH and $H_2O$ extracts of the fruit of Hovenia dulcis Thunb showed alcohol decomposition activity on the in vivo test using rat. These results suggest that the fruit of Hovenia dulcis Thunb may be useful in the prevention of hangover.

• 생약학회지
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• 제35권1호통권136호
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• pp.28-34
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• 2004

DNA damage induced by reactive oxygen species (ROS) seems to play an important role in the induction of mutation and cancer. Hydrogen peroxide $(H_2O_2)$ has been shown to induce a variety of genetic alterations, probably by the generation of hydroxyl radicals via Fenton reaction. In this study, we examined the ability of medicinal herbs in the suppression of $H_2O_2$-induced mutagenesis. Human fibroblast GM00637 cells were treated with $H_2O_2$ in the presence or absence of medicinal herbs, and $H_2O_2$-induced mutant frequency was measured at the hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase (HPRT) locus. Treatment of cells with various doses of $H_2O_2$ caused a significant increase of the HPRT mutant frequency. However, pretreatment of cells with several medicinal herbs reduced $H_2O_2$-induced mutant frequency. The strong antimutagenic effects were observed from the methylene chloride and ethyl acetate fractions of Selaginella tamariscina, Panax ginseng, and Angelica acutiloba; ethyl acetate fractions of Rehmania glutinosa, Leonurus sibiricus, Curcuma zedoaria and Commiphora molmol; butanol fractions of Scutellaria barbata, Tribulus terrestris, Curcuma zedoaria, Cyperus rotundus and Carthamus tinctorius, which were more than 60% inhibition of $H_2O_2$-induced mutant frequency at the HPRT locus.

• 생약학회지
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• 제32권4호통권127호
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• pp.269-273
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• 2001

Ethanol extracts from Xanthii Fructus (XFE) and Prunellae Spica (PSE) were investigated for the effects on the induction of cancer chemoprevention-associated enzymes. The following effects were measured: (a) induction of quinone reductase (QR) (b) induction of glutathione S-transferase (GST) (c) reduced glutathione (GSH) level. XFE and PSE were potent inducers of quinone reductase activity in Hepa1c1c7 murine hepatoma cells. Glutathione levels were increased with XFE and PSE. In addition, glutathione S-transferase activity was increased with XFE. However, GST activity was not increased with PSE. These results suggest that XFE and PSE have chemopreventive potentials by inducing quinone reductase and increasing GSH levels.

• 생명과학회지
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• 제20권2호
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• pp.202-207
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• 2010

Ras 유전자는 30%의 인간암에서 변이가 발견되며 세 종류의 isoform, H-Ras, K-Ras 및 N-Ras로 구성되어 있다. Ras 단백질의 CAAX motif에 farnesylation과 같은 번역 후 변형은 Ras의 활성에 필수 요소이다. 본 연구에서는 새로운 farnesyl transferase 억제제인 YH3938과 YH3945의 발암원성 H-Ras, K-Ras 및 N-Ras의 작용에 대한 영향을 조사하였다. YH3938과 YH3945는 발암원성 H-Ras에 의해 형질전환된 Rat2 세포의 증식과 형태 변화를 억제하였으나 K-Ras에 대해서는 효과가 없었다. N-Ras에 대해서는 약한 영향이 있었다. H-Ras와 N-Ras에 의한 SRE promoter 활성화는 YH3938과 YH3945에 의해 억제되었으나, K-Ras에는 영향이 없었다. Ras 단백질의 bandshift 분석을 통해 YH3938은 H-Ras와 N-Ras의 번역 후 변환을 억제하였으나, K-Ras에는 영향이 없었다. YH3945는 H-Ras의 변환에만 영향이 있었다. 결론적으로 YH3938과 YH3945는 H-Ras의 farnesylation을 억제하여 그 발암원성을 억제하며, YH3938은 N-Ras 작용을 농도의존적으로 억제하며, K-ras에 대해서는 영향이 없음을 알 수 있었다.

• 한국결정학회지
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• 제14권1호
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• pp.32-34
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• 2003

여러 조건하에서 Clonorchis sinensis로부터 helminth glutatione S-transferase(28kDa isozyme)가 결정화되었다. 0.05 M potassium 완충 용액 (pH 7.0) 내에서 10% polyehtylene glycol MME 550(PEG MME 5 K)에서 자라난 결정이 $3.0{\AA}$ 분해능까지 회절하였다. 이 결정의 결정학적 자료는 다음과 같다 : 단사정계 공간 군 C2, $a=95.83{\AA}$, $b=63.82{\AA}$, $c=235.09{\AA}$, ${\beta}=97.2^{\circ}$.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제30권7호
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• pp.803-812
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• 1997

The influences of dietary supplements of vitamin E on hepatocellular chemical carcinogenesis have been studied, Placental glutathione S-transferase(GST-P) positive foci area, antioxidant enzymes(superoxide dismutase(SOD), catalase, glutathione reductase, glutathione peroxidase, glutathione S-transferase(GST)), glucose 6-phosphatase(G6Pase) activities, and lipid peroxidation of mecrosomes(thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) contents) were investigated. For is purpose , we used the murine chemical hepatocardinogenic procedure induced by modified Ito model, which consists of 200mg/kg body weight diethylinitrosamine (DEN) injection, 0.01% 2-acethlaminoflurene(2-AAF) feeding for 6 weeks, and partial hepatectomy on week 3. Weanling Sprague-Dawley male rats were fed pulverized Purina rat chow with 15, 000IU/kg diet vitamin E from initiation or promotion stages. We found that vitamin E supplement decreased the area of GST-P positive foci. Catalase, glutathione peroxidase, glutathione reductase. GST activities, and TBARS contents were decreased. On the other hand G6Pase activities were increased by vitamin E supplement. It seemed that vitamin E supplements helped endogenous defense systems against carcinogenesis by decreasing TBARS contents, $H_2O$$_2$ and organic peroxides. So, vitamin E seemed to protect cell from free radical damage in carcinogenesis. Anticarcinogenic effects of vitamin E were more effective at intiation that at promotion stage. These results suggest that vitamin E has suppressive effects on hepatocellular chemical carcinogenesis, probably through antioxidant effects against TBARS contents $H_2O$$_2$ and orgainc peroxides.