Park, Hyo-Jin;Kim, Jin-Woo;Park, Jae-Young;Yang, Seul-Gi;Jung, Jae-Min;Kim, Min-Ji;Koo, Deog-Bon
Journal of Embryo Transfer
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v.32
no.1
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pp.17-24
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2017
Ganglioside GD1a is specifically formed by the addition of sialic acid to ganglioside GM1a by ST3 ${\beta}$-galactoside ${\alpha}$-2,3-sialyltransferase 2 (ST3GAL2). Above all, GD1a are known to be related with the functional regulation of several growth factor receptors, including activation and dimerization of epidermal growth factor receptor (EGFR) in tumor cells. The activity of EGF and EGFR is known to be a very important factor for meiotic and cytoplasmic maturation during in vitro maturation (IVM) of mammalian oocytes. However, the role of gangliosides GD1a for EGFR-related signaling pathways in porcine oocyte is not yet clearly understood. Here, we investigated that the effect of ST3GAL2 as synthesizing enzyme GD1a for EGFR activation and phosphorylation during meiotic maturation. To investigate the expression of ST3GAL2 according to the EGF treatment (0, 10 and 50 ng/ml), we observed the patterns of ST3GAL2 genes expression by immunofluorescence staining in denuded oocyte (DO) and cumulus cell-oocyte-complex (COC) during IVM process (22 and 44 h), respectively. Expression levels of ST3GAL2 significantly decreased (p<0.01) in an EGF concentration (10 and 50 ng/ml) dependent manner. And fluorescence expression of ST3GAL2 increased (p<0.01) in the matured COCs for 44 h. Under high EGF concentration (50 ng/ml), ST3GAL2 protein levels was decreased (p<0.01), and their shown opposite expression pattern of phosphorylation-EGFR in COCs of 44 h. Phosphorylation of EGFR significantly increased (p<0.01) in matured COCs treated with GD1a for 44 h. In addition, ST3GAL2 protein levels significantly decreased (p<0.01) in GD1a ($10{\mu}M$) treated COCs without reference to EGF pre-treatment. These results suggest that treatment of exogenous ganglioside GD1a may play an important role such as EGF in EGFR-related activation and phosphorylation in porcine oocyte maturation of in vitro.
Temperature and light responses on the growth and maturation of gametophytes of Undaria pinnatifida were studied in laboratory culture. The effect of the environmental factors on formation of young sporophyte of U. pinnatifida was also examined in the same culture system. Maximum growth and rapid maturation of the gametophytes were observed at $12:12LD,\;17^{\circ}C$ and 60{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}. However, they survived in a wide range of the examined temperature, light intensity and photoperiod. Particularly they survived under continuous dark condition (0:24LD) until 210 days without any growth and maturation, but died within $10\~40$ days at $30^{\circ}C$. This suggests that optimum rendition for conservation of Undaria gametophytes is under continuous dark photoperiod at $17\~25^{\circ}C$.
This study investigated the growth and maturation of free conchocelis of Pyropia yezoensis under monochromatic light of blue light(480 nm), green light(550 nm), yellow light(600 nm) and red light(730 nm) which measured the colony diameter, content of chlorophyll a and conchosporangium formation. In the result, the most of colony diameter and chlorophyll a showed under the blue light, $2,472.6{\pm}27.0{\mu}m$ and $1.55{\pm}0.03mg\;g.dw^{-1}$. Also, the chlrophyll a content of conchocelis was under the blue light. Therefore, the blue light might be favorable for the growth and maturation of conchocelis of P. yezoensis. This study will lead development of indoor culture technologies.
Kim, Byeong-Hak;Moon, Tae-Seok;Park, Ki-Yeol;Jo, Pil-Gue;Kim, Min-Chul
The Korean Journal of Malacology
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v.26
no.2
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pp.151-156
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2010
For industrialization of the hard clams, Meretrix petechiails (Lamarck), spawning was induced per spawning induction technique in the artificial maturation group administered of parent maturation control and the natural maturation group of which parents were transported for artificial spawning per time period. Then, fertilization rates, hatching rates and D-shaped larva development rates were investigated. In addition, growth and survival rates of larvae were investigated per larva breeding technique. The results of spawning induction by exposure in the artificial maturation group indicated that response rates were relatively higher at 23% and 32% respectively at the 4th hour and the 8th hour of exposure. In terms of water temperature increase, responses began only when the temperature reached $28^{\circ}C$ or higher. In the experiment group administered with both exposure and water temperature increase techniques, response rate was found to be 45% or higher at the 4th hour of exposure and the temperature of $28^{\circ}C$. At the temperatures of 29, 30 and $31^{\circ}C$, significant differences were not observed. Therefore, it was indicated that the response rates of parent hard clams were higher toward water temperature increase than exposure time. As for spawning induction per time period of the transported parent group, response rate and D-shaped larva development rate were the highest at 67.6% and 96% respectively on August 6, 2009. In terms of water temperatures during larva breeding experiment, growth was faster as water temperature was higher. In addition, growth and survival rates were relatively higher at the salinity of 25. In terms of stocking density, growth and survival rates were relatively higher at 5 inds./mL.
Till date the phenomenon of maternal transfer of photic information was reported to regulate the fetal/neonatal growth, however its influence on neonatal immune system is still an enigma. In the present study, we observed an increase in maternal plasma melatonin level under short day length (SOL) condition with a consequent decrease in TLC and LC in their respective neonates. However, a significant decrease in maternal plasma melatonin level was noted under constant darkness (DD) with an increase in TLC and LC of their neonates. The blastogenic response (BGR) to Con A of splenocytes exhibited a significant increase in neonates of SDL females and a significant decrease in the neonates of DD females. Hence, it appears that the increase in maternal plasma melatonin under SOL condition transmitted information to decrease the immune status. Continuous exposure of females to darkness (DD) negatively regulated the maternal pineal gland activity thereby decreasing their plasma melatonin level. This information was transmitted for elevation of immune status in neonates, so that they exhibit better growth and sexual maturation. Therefore, we may suggest that the maternal photic information transmitted either prenatally through placenta or postnatally via the milk regulate the hormonal profile of Melatonin to regulate the immune status of neonates in order to influence their growth and sexual maturation.
돼지 수정란의 체외생산은 난자의 체외성숙과 체외수정에 관한 기술의 부족으로 아직까지 만족스럽지 못한 수준이다. 특히 돼지 수정란의 체외생산에는 복잡한 세포질의 성숙과정과 높은 다정자침입율 및 전핵형성의 억제등의 문제점이 있다. 본 연구에서는 돼지 난자의 체외성숙 체계를 개선하기 위하여 transforming growth factor$\beta$(TGF$\beta$)의 첨가가 난자 및 난구세포에 미치는 효과에 대하여 검토하였다. 체외성숙용 배지에 TGF$\beta$를 1~10ng/$m\ell$의 농도로 첨가하여 미성숙 난자를 배양한 결과 성숙율이 높아졌다. TGF$\beta$의 효과는 난구세포가 제거된 난자의 성숙에도 효과적이었다. TGF$\beta$(를 첨가하지 않은 배양액 내에서는 배양 24시간 까지 metaphase-II로 성숙된 난자가 관찰되지 않았으나 TGF$\beta$를 첨가한 배양액 내에서는 관찰되었다. 한편, 난구세포가 부착된 난자의 성숙배양시 TGF$\beta$의 첨가시기에 따른 차이는 없었으나, 난구세포를 제거한 난자의 경우에는 성숙배양 전반기(59%) 또는 후반기(57%) 24시간 동안에만 TGF$\beta$를 첨가하는 것이 48시간 동안 계속하여 첨가(27%)하는 경우 또는 비첨가(38%)에 비하여 유의적으로 높은 성숙율을 나타냈다(p<0.05). 이와 같은 결과는 난구 세포가 돼지 난자의 체외성숙에 필수적이지만 TGF$\beta$는 난구세포가 제거된 난자의 체외성숙에 어 느정도 유익한 효과를 발휘하는 것으로 추측된다.
For the ecological study on the gobioid (Favonigobius gymnauchen), samples were collected in the Korean coasts from 1983 to 1995, and the process of ovarian maturation, spawning season, settling period of young individuals and growth were investigated with the specimens collected from Kunsan coast. The ovarian egg development of this species underwent three stages; growth stage from March to April, maturity stage from May to June and spawning stage in July. All the adults died after spawning in late July. Young individuals of total length 10 mm began to live a bottom life in the tide pool of shallow waters in early and middle August. The total length of these individuals reached about 42.1 mm (mean 36.7 mm) in late November. The largest specimen examined in this study was 85.0mm of male. After that time, individuals of this species inhabited in subtidal zone from December to May of the next year. The Favonigobius gymnauchen is distributed at 17 areas of shallow waters and estuaries in the western and southern coasts of Korea.
This study was conducted to determine the effects of biophoton treatment during in vitro maturation (IVM) and/or in vitro culture (IVC) on oocyte maturation and embryonic development in pigs. An apparatus capable of generating homogeneous biophoton energy emissions was placed in an incubator. Initially, immature pig oocytes were matured in the biophoton-equipped incubator in medium 199 supplemented with cysteine, epidermal growth factor, insulin, and gonadotrophic hormones for 22 h, after which they were matured in hormone-free medium for an additional 22 hr. Next, IVM oocytes were induced for parthenogenesis (PA) or provided as cytoplasts for somatic cell nuclear transfer (SCNT). Treatment of oocytes with biophoton energy during IVM did not improve cumulus cell expansion, nuclear maturation, intraoocyte glutathione content, or mitochondrial distribution of oocytes. However, biophoton-treated oocytes showed higher (p < 0.05) blastocyst formation after PA than that in untreated oocytes (50.7% vs. 42.7%). In an additional experiment, SCNT embryos produced from biophoton-treated oocytes showed a greater (p < 0.05) number of cells in blastocysts (52.6 vs. 43.9) than that in untreated oocytes. Taken together, our results demonstrate that biophoton treatment during IVM improves developmental competence of PA- and SCNT-derived embryos.
Kim, Young-Ju;Kang, Hye-Eun;Cho, Gyu-Tae;Suh, Young-Sang;Yoo, Myong-Suk;Kim, Hyun-Woo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.12
no.4
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pp.276-285
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2009
Despite great commercial interest, relatively little has been described about molecular mechanism of bivalve reproduction. We investigated genes involved in ovarian maturation of the Yesso scallop, Patinopecten yessoensis. GSI index and histological analysis revealed that maturation of ovary begin in February and spawning period is from April to June which is similar to the previous study in the East Sea. As result of combination analysis of differential display RTPCR (DDRT-PCR) and histological examination, vitellogenin (Vg), ferritin (Ft) and ADT/ATP carrier protein (ACC) were identified as differently expressed genes in maturating ovary. Endpoint RT-PCR results showed that Vg is ovary-specific genes whereas Ft and ACC are expressed ubiquitously suggesting that Vg can be good molecular markers for ovarian development and sex determination in bivalves. Quantitative PCR results revealed that Vg were expressed highest during growth stage and appears to play a major role in oocyte maturation. On the contrary, expression of Ft was highest after spawning stage, which suggests that up-regulation may be involved in spawning and inactive stages in which the scallops recover from spawning. In addition, high level of the mitochondrial gene, ACC, may play a role in energy metabolism in maturating oocytes. Isolation and molecular studies of these key genes will expand our knowledge of the physiological changes from various exogenous factors including temperature, salinity, pH, even or numerous endocrine disrupting chemicals (EDCs) during reproductive cycle. In addition, further study of these genes implicates various industrial applications including the stable seed production, increased food quality, or economic aquaculture system.
This study was performed to improve the development of the in vitro fertilized bovine embryos by the condition of in vitro maturation. COCs were matured in TCM 199 supplemented with 0.1% PVA, 10ng/ml EGF, Hormones (5$\mu\textrm{g}$/ml FSH, 10 IU hCG, 1 $\mu\textrm{g}$/ml estradiol 17-$\beta$) or granulsa cell+Hormones atmosphere 39$^{\circ}C$, 5% CO2, 95% air for 24hrs. Matured oocytes were fertilized with frozen-thawed semen capacitated with 5mM caffein in BO medium for 20 hrs. IVF embryos were cultured in TCM 199 containing with hormones(same as matured medium), 10% FBS and co-culture with bovine oviduct epitherial cells. Maturation rates of COCs were showed 73.8%, 78.5%, 83.2% and 87.6% respectively, and were significant differences between PVA, EGF, and Hormones, GC+Hormones(p<0.05). The cleavage rates of IVF embryos were revealed 72.5%, 78.4%, 82.3% and 84.2% and showed same tendency as maturation rates(p<0.05). The blastocysts matured by above maturation condition and cultured for 7~10 days after fertilization had 34.4, 43.6, 52.3 and 59.3 cells had no differences among the treatments. These results suggest that high molecules as a substitutes of serum and growth factor may induce nuclear resumption of COCs but we need more study to produce transferable IVF blastocysts by use of that agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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