This study was performed to investigate the effect of types of oil (OVOIL vs. OIL) on B6D2F1 mice oogenesis. In this study, B6D2F1 F1 mice were used in order to maximize oogenesis. The expansion rate of cumulus cells ($82.0%{\pm}0.2$ vs. $78.0%{\pm}0.1$), in vitro fertilization rate ($92.0%{\pm}0.1$ vs. $88.0%{\pm}0.1$), developmental rate ($91.0%{\pm}0.1$ vs. $87.0%{\pm}0.2$), blastocysts formation rate ($56.0%{\pm}0.1$ vs. $57.0%{\pm}0.1$), and zona hatched rate($41.4%{\pm}0.2$ vs. $24.0%{\pm}0.1$) were not different between groups (NS; P>0.05). However, there was a significant difference in maturation rate; the OVOIL group showed higher maturation rate compared to that of the OIL group ($96.0%{\pm}0.1$ vs. $87.0%{\pm}0.1$; P<0.05). In the blastocysts cell numbers, the total cell numbers ($83.9{\pm}26.1$ vs. $56.9{\pm}23.9$), ICM cell numbers ($15.7{\pm}8.8$ vs. $6.3{\pm}3.5$), TE cell numbers ($68.3{\pm}25.7$ vs. $50.7{\pm}24.1$), % ICM ($21.6%{\pm}0.1$ vs. $12.7%{\pm}0.1$), and the ratio of ICM:TE ($1:6.2{\pm}6.5$ vs. $1:10.3{\pm}7.0$) were significantly higher in the OVOIL group than the OIL group (P<0.05). These results suggested that it is expected to achieve the more developmental ability of B6D2F1 mice depending on the type of oil (OVOIL vs. OIL). In addition, the results can provide essential information for culture condition on B6D2F1 mice. Henceforth, thus, it is expected that these results herein might be used for in vitro culture of human embryos.
본 연구는 환경요인이 성숙기 발달단계의 양식산 수컷 참조기(Larimichthys polyactis)의 성성숙에 미치는 영향을 알아보고자 광주기와 수온에 따른 GSI, 정소 발달 및 혈중 성호르몬 변화를 조사하였다. 실험 1 : 광주기를 자연광주기(Natural Photoperiod, NP, 10L:14D~11L:13D), 장일주기(Long Photoperiod, LP, 14L:10D), 단일주기(Short Photoperiod, SP, 10L:14D)로 설정하였고, 수온은 17℃로 설정하여 90일간 실험하였다. 그 결과, GSI는 실험 30일째와 60일째, 혈중 11-KT 농도는 실험 30일째에 LP 실험구에서 다른 실험구보다 유의하게 높게 나타났다. 실험 2 : 수온을 자연수온(Natural temperature, NT, 19.1~15.0℃), 17℃, 21℃, 25℃로 설정하였고, 광주기는 14L:10D로 설정하여 60일간 실험하였다. 그 결과, GSI는 실험 30일째와 60일째, 혈중 11-KT 농도는 실험 60일째에 25℃ 실험구에서 다른 실험구보다 유의하게 낮게 나타났다. 따라서 수컷 참조기는 단일주기(10L:14D)보다 장일주기(14L: 10D)에서 성성숙이 촉진되고, 25℃ 이상의 수온에서는 성성숙이 억제되는 것으로 생각된다. 이러한 결과는 참조기 번식생리학 연구를 위한 기초자료로 유용하게 이용될 것이라 기대된다.
The purpose of this study was to evaluate the healing process of the calvarial defect filled with hydroxylapatite(HA) and $TGF-{\beta}$ in Rat. 72 Sprague-Dawly rats were divided into 3 groups, control and two experimental groups. Bony defect were artificially prepared in the calvaria of all 72 rats and followed by implantation of HA (experimental group of 24 rats) and HA+$TGF-{\beta}$(another experimental group of 24 rats) into the defects. Sequential sacrifice was performed at 1, 2, 4, 6, 8, 12 weeks of experiment. Obtained specimen was stained with Hematoxylin and Eosin, Masson's Trichrome and Immunohistochemistry. The results were as follows, 1. Granulation tissue was prominent on control group in 1 and 2 weeks. Bony defects were filled with dense fibrous tissue through the whole experimental period and osteoinduction could not be observed in all groups. 2. Inflammatory cell infiltration was prominent on control group in 1 and 2 weeks and osteoclastic activity was high in HA implanted experimental group at 1 and 2 weeks. 3. Inflammatory cell infiltration was less and maturation of fibrous tissue could be found on HA+$TGF-{\beta}$ implanted experimental group at 1 and 2 weeks. 4. Osteoconduction activity was high in HA+$TGF-{\beta}$ implanted experimental group at 2 and 4 weeks but there was no difference after 6 weeks among 3 groups. 5. In grafted site of HA+$TGF-{\beta}$ implanted group, osteonectin expression was slightly increased from 1 week to 6 weeks. In the host site, it was increased from 1 to 4weeks. 6. In grafted site of HA+$TGF-{\beta}$ implanted group, osteocalcin expression was high at 4 weeks. In the host site, we could find the difference among 3 groups. From above results, the HA with mixture of $TGF-{\beta}$ has the potentiality of promoting bone formation in the bony defect area in the rat.
Objectives: This study was designed to investigate the effect of Ojeok-san(OJS) on the estradiol valerate(EV)-induced polycystic ovaries(PCO) in rats. Methods: PCO was induced by single intramuscular injection with estradiol valerate(EV)(4mg) in female rats. Normal group(n=8) were injected with sesame oil and orally administrated distilled water for sixty days. PCO control group (n=8) were injected with EV and orally administrated distilled water for sixty days. OJS treated group(n=8) were injected with EV and orally administrated OJS for sixty days. Then, we measured weights of body, ovaries, adrenal glands and uterus of rats. The histomorphometrical changes of ovaries were also evaluated. And we observed the NGF and CRF expression by immunohistochemistry. Results: The results were as follows - The weights(mg) of ovaries in OJS treated group($57.4{\pm}9.4$) were significantly increased(p < 0.05) compared with PCO control group($42.3{\pm}8.5$). - The numbers of mature follicles in OJS treated group($9.3{\pm}2.5$) were significantly increased(p < 0.05) compared with PCO control group($6.1{\pm}2.1$). - The expressions of NGF-immunoreactive cells in the ovarian granulosa cells in OJS treated group were weaker than PCO control group. Conclusion: From the these results, we concluded that Ojeok-san(OJS) has inhibitory effect on the development of EV-induced polycystic ovary. And it's effect maybe related with decreased NGF activities in the ovary.
Pavani, Krishna;Carvalhais, Isabel;Faheem, Marwa;Chaveiro, Antonio;Reis, Francisco Vieira;da Silva, Fernando Moreira
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제28권3호
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pp.334-342
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2015
The present study was designed to evaluate how environmental factors in a dry-summer subtropical climate in Terceira-Azores (situated in the North Atlantic Ocean: $38^{\circ}43^{\prime}N27^{\circ}12^{\prime}W$) can affect dairy cow (Holstein) fertility, as well as seasonal influence on in vitro oocytes maturation and embryos development. Impact of heat shock (HS) effects on in vitro oocyte's maturation and further embryo development after in vitro fertilization (IVF) was also evaluated. For such purpose the result of the first artificial insemination (AI) performed 60 to 90 days after calving of 6,300 cows were recorded for one year. In parallel, climatic data was obtained at different elevation points (n = 5) from 0 to 1,000 m and grazing points from 0 to 500 m, in Terceira island, and the temperature humidity index (THI) was calculated. For in vitro experiments, oocytes (n = 706) were collected weekly during all year, for meiotic maturation and IVF. Further, to evaluate HS effect, 891 oocytes were collected in the cold moths (December, January, February and March) and divided in three groups treated to HS for 24 h during in vitro maturation at: C (Control = $38.5^{\circ}C$), HS1 ($39.5^{\circ}C$) and HS2 ($40.5^{\circ}C$). Oocytes from each group were used for meiotic assessment and IVF. Cleavage, morula and blastocyst development were evaluated respectively on day 2, 6, and 9 after IVF. A negative correlation between cow's conception rate (CR) and THI in grazing points (-91.3%; p<0.001) was observed. Mean THI in warmer months (June, July, August and September) was $71.7{\pm}0.7$ and the CR ($40.2{\pm}1.5%$) while in cold months THI was $62.8{\pm}0.2$ and CR was $63.8{\pm}0.4%$. A similar impact was obtained with in vitro results in which nuclear maturation rate (NMR) ranged from 78.4% (${\pm}8.0$) to 44.3% (${\pm}8.1$), while embryos development ranged from 53.8% (${\pm}5.8$) to 36.3% (${\pm}3.3$) in cold and warmer months respectively. In vitro HS results showed a significant decline (p<0.05) on NMR of oocytes for every $1^{\circ}C$ rising temperature ($78.4{\pm}8.0$, $21.7{\pm}3.1$ and $8.9{\pm}2.2$, respectively for C, HS1, and HS2). Similar results were observed in cleavage rate and embryo development, showing a clear correlation (96.9 p<0.05) between NMR and embryo development with respect to temperatures. Results clearly demonstrated that, up to a THI of 70.6, a decrease in the CR occurs in first AI after calving; this impairment was confirmed with in vitro results.
Male rats were fed a purified diet containing one of 3 experimental diets, gelatinized rice starch that was not modified physically (RC), gelatinized physically modified rice starch using ultrasonic homogenizer(RU), gelatinized physically modified rice starch using hydroshear homogenizer(RH) during 28 days. RC was used as the rice starch control. Feeding a physically modified rice starch (RU) caused an increase in liver weight and RH increased RNA and protein contents in kidney significantly although there were no differences in food intakes compared to feeding a RC diet. The wet weight of liver, kidney and heart were higher in RU. The wet weights of fecal output of the rats fed RH was greater than in rice control group. The gut transit time was longer in the rats fed RH than in the rice control group significantly. Serum GOT, GPT, total bilirubin concentration were tended to be lower and blood urea nitrogen was significantly lower in RH group. The maturation index of kidney was higher in RU than in RC. These results suggest that physically modified rice starch improved growth performance and physiological functions in organs of growing rats.
The study evaluated the effect of donor cell treatments for G0/Gl synchronization and the donor ceil type on development and incidence of apoptosis in cloned cattle embryos. Primary cultures were established from a female fetus on day 50 of gestation and adult ear skin biopsies. Cells were randomly allocated into 3 experimental treatment groups after 6~8 passages. Group 1 (Confluent), cells were cultured in DMEM supplemented with 10% FBS until 90% confluent. Group 2 (Serum-starvation), cells were cultured in DMEM Supplemented With 0.5% FBS for 5 days. Group 3 (Roscovitine), Cells were cultured in DMEM supplemented with 10% FBS and 30 $\mu$M Roscovitine for 12 h. Cell cycle and apoptosis were analyzed using flow cytometry after labelling with DAPI and YO-PRO-1. At 19 h post-maturation (hpm), enucleated oocytes were reconstructed with donor cells and fused by a single DC pulse (1.6 kV/cm, 60 $\mu$sec). (중략)
Objective: The effects on spermatogenesis by expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and endothelin-1 (ET-1) were investigated. Materials and Methods: Testicular specimens were obtained from 40 infertile males due to primary testicular failure and from 10 fertile males with other urologic problems. The specimens of infertile males were devided into 4 groups according to histologic findings; Sertoli cell only syndrome (A), maturation arrest (B), hypospermatogenesis (C) and sloughing and disorganization (D). VEGF and ET-1 expression were detected with immunohistochemical stain. Results: VEGF expression on Leydig cell was detected in all cases. But, VEGF expression rates on germ cell were significantly higher in infertile group B, C, D compared to that of the control group (p<0.05). ET-1 expression rates on Leydig cell was significantly lower in all infertile group compared to that of the control group (p<0.05). But, ET-1 expression rates on Sertoli cell was significantly higher in all infertile group compared to that of the control group (p>0.05). In germ cell of infertile group, LH, FSH and prolactin were significantly decreased, and estradiol is increased in positive stain group on ET-1 immunohistochemical stain (p<0.05). VEGF and ET-1 expression were not correlated mean seminiferous tubule diameter (p>0.05). Conclusions: Abnormal spermatogenesis would be reflected in VEGF expression in germ cell.
본 연구는 측모 두부 규격 방사선사진을 이용하며 성장 중인 아동의 제4경추 형태를 경추 몸체부 하연의 만곡 정도에 따라 분류하고 초경의 시기와 수완부 골 성숙 단계를 평가하여, 성장 중인 아동의 골격적 부정교합의 진단 및 악정형 치료를 위한 성장 시기 평가에 제4경추의 형태 변화가 진단의 참고자료로 활용될 수 있는지를 연구하였다. 11-14세 여자 환자 중, 같은 날짜에 촬영된 측모 두부 규격 방사선사진과 수완부 방사선사진이 모두 있는 81명을 대상으로 환자의 측모 두부 규격 방사선사진상 제4경추 몸체부 하연의 만곡 정도에 따라 세 그룹으로 분류하였다. (Group A - 제4경추 몸체부 하연의 만곡 정도가 1.05 mm 이하, Group B - 제4경추 몸체부 하연의 만곡 정도가 1.05 - 2.07 mm 사이, Group C - 제4 경추 몸체부 하연의 만곡 정도가 2.07 mm 이상) 세 그룹에서 각각 제4경추 몸체부의 수직 길이, 수평 길이, 수직/수평 비율, 초경의 시기, 수완부 골 성숙 단계를 측정한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 평균 수완부 골 성숙 단계는 Group A가 SMI $5.67{\pm}2.57$단계, Group B 는 SMI $8.73{\pm}2.41$ 단계, Group C 는 SMI $10.00{\pm}1.47$ 단계로 나타났다. Group A에서 Group B, Group C 로 갈수록 제4 경추의 수직 길이, 수평 길이, 수직/수평 비율, 수완부 골 성숙 단계에 있어서 각각 유의하게 더 큰 값을 보였다. 본 연구대상 아동의 평균 초경 시기는 $11.64{\pm}0.92$세를 보였다. 제4경추 몸체부 하연의 만곡 정도, 수직 길이, 수평 길이, 수직/수평 비율은 수완부 골 성숙 단계와 각각 서로 유의한 양의 상관관계를 나타냈다. 초경을 경험한 그룹이 초경을 경험하지 않은 그룹에 비해 제4경추의 수직 길이, 수평 길이, 수직/수평 비율, 수완부 골 성숙 단계에 있어서 유의하게 큰 값을 보였다. 연구 결과 측모 두부 규격 방사선사진상 제4경추 하연의 만곡 갚이가 2.07 mm 이상인 경우 성장의 완료 단계에 가까운 시기로 나타나 이 시기의 악정형적 치료는 큰 효과를 얻을 수 없을 것으로 사료된다.
체외 배양액에 성장호르몬 및 사이토카인의 첨가는 초기배 발육 및 생산된 배반포의 질에 영향을 미칠 수 있다. 본 연구는 돼지 유도만능줄기세포(porcine induced pluripotent stem cell, piPSC)의 조정배지(conditioned medium, CM)가 돼지 난자의 체외성숙 및 단위발생 후 초기배 발육에 미치는 영향을 검토하기 위하여 수행하였다. 난자-난구세포 복합체(cumulus-oocyte complex, COC)는 0(control), 25, or 50%의 줄기세포 배양액(stem cell medium, SM) 또는 CM이 첨가된 체외성숙 배양액으로 배양하였으며, 성숙된 난자는 활성화 유도 후 같은 농도의 SM 또는 CM을 첨가한 체외배양액에서 배양하였다. 체외 성숙율은 CM-25% 그룹에서 대조구보다 유의적으로 높았으나 (p<0.05), 다른 SM 또는 CM 처리구와는 차이가 없었다. 배반포 형성율은 CM-25% 그룹(29.2%)에서 대조구(20.7%), SM-50%(19.6%) 및 CM-50%(23.66%) 처리구보다 유의적으로 높았다(p<0.05). 배반포에서의 세포수 및 세포사 비율은 SM-25% 그룹이 대조구에 비하여 유의적인 차이가 나타났다(p<0.05). 난자의 질과 연관되어 있는 유전자들(Oct4, Klf4, Tert 및 Zfp42)의 발현은 CM-25% 그룹에서 대조구보다 유의적으로 증가되었다(p<0.05). 따라서 본 실험의 결과 체외성숙(IVM) 및 체외발달(IVC) 배양액에 25% 수준의 CM의 첨가는 돼지 단위발생 난자의 배발달과 난자의 질적 향상에 기여하는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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