한국산 대륙밭쥐 (Clethrionomys rufocanus regulus) 정자변태 과정을 알아보기 위하여 정소내 세정 관상피의 세포분화에 따른 형태적 특징들을 기초로 하여 전자현미경으로 관찰한 결과는 다음과 같다. 1. 대륙밭쥐의 정자변태 과정은 골지(Golgi), 두모(cap), 첨체(acrosome), 성숙(maturation) 및 이탈기(spermiation phase)로 구분하였고, 다시 각각 전후단계로 세분하여 전과정을 10단계로 나누었다. 2. 염색질 변화는 골지 후기에서 서서히 응축하여 성숙기에서 균질화되고, 이탈기에서 완전한 핵을 형성하였다. 3. 정자두부는 낫꼴모양을 가지며, 정자꼬리는 골지 전기에서 형성되기 시작하여 이탈기에서 완성되었다. 4. 이탈 전 후기의 정자세포의 형태적 특징으로서는, 이탈전기의 정자 세포는 3가지 유형으로 구분 되어졌다. (1).미토콘드리아의 불규칙 배열과 더불어 경부와 중편부에 세포질 소적을 함유한 정자세포(A-type). (2). 미토콘드리아가 축사를 중심으로 완전히 배열되고, 중편부에 세포질 소적을 함유한 정자세포(B-type). (3) 축사를 중심으로 미토콘드리아의 배열 후 경부에만 세포질 소적을 함유한 정자세포(C-type). 그리고 이탈후기의 경우, 정자세포들이 정자두부만 Sertoli cell의 세포질에 싸여져 있거나 또는 Sertoli cell의 세포질로부터 이탈되기 직전의 정자로 구분되었다.
Objective: The Yip1 domain family (YIPF) proteins were proposed to function in endoplasmic reticulum (ER) to Golgi transport and maintenance of the morphology of the Golgi, which were homologues of yeast Yip1p and Yif1p. YIPF3, the member 3 of YIPF family was a homolog of Yif1p. The aim of present study was to investigate the expression and regulation mechanism of porcine YIPF3. Methods: Quantitative realtime polymerase chain reaction (qPCR) was used to analyze porcine YIPF3 mRNA expression pattern in different tissues and pig kidney epithelial (PK15) cells stimulated by polyinosine-polycytidylic acid (poly [I:C]). Site-directed mutations combined with dual luciferase reporter assays and electrophoretic mobility shift assay (EMSA) were employed to reveal transcription regulation mechanism of porcine YIPF3. Results: Results showed that the mRNA of porcine YIPF3 (pYIPF3) was widely expressed with the highest levels in lymph and lung followed by spleen and liver, while weak in heart and skeletal muscle. Subcellular localization results indicated that it expressed in Golgi apparatus and plasma membranes. Upon stimulation with poly (I:C), the level of this gene was dramatically up-regulated in a time- and concentration-dependent manner. pYIPF3 core promoter region harbored three cis-acting elements which were bound by ETS proto-oncogene 2 (ETS2), zinc finger and BTB domain containing 4 (ZBTB4), and zinc finger and BTB domain containing 14 (ZBTB14), respectively. In which, ETS2 and ZBTB4 both promoted pYIPF3 transcription activity while ZBTB14 inhibited it, and these three transcription factors all played important regulation roles in tumorigenesis and apoptosis. Conclusion: The pYIPF3 mRNA expression was regulated by ETS2, ZBTB4, and ZBTB14, and its higher expression in immune organs might contribute to enhancing ER to Golgi transport of proteins, thus adapting to the immune response.
큰발웃수염박쥐 (Myotis macrodactylus)의 세정관 정상피의 분화과정과 미세구조적 특징들은 알아보기 위하여 광학 및 전자현미경을 이용하여 조사하였다. 정자형성 과정은 4월부터 9월까지로 나타났다. 정자형성세포의 미세 구조적 특징에 있어서, A형 (Ad, Ap)의 정원세포는 기저막 위에 위치하며, Sertoli cell에 의해 둘러싸여져 있고, 대부분의 세포는 타원형이다. Ad형은 Ap형 보다 핵과 세포질의 전자밀도가 높은 것이 특징적인 반면에, B형의 정원세포는 구형의 세포로서 A형 정원세포 보다 세포가 크며, Ap형과 마찬가지로 세포질이 밝고, 거의 핵소체가 핵막에 인접되어 있다. 정모세포는 크고 구형이지만, 제 1 정모세포가 제 2 정모세포보다 다소 크다. 정자변태는 골지, 두모, 첨체, 성숙 및 이탈기로 구분하였고, 세포구조물의 특징들에 의해 각각 전 후기로 다시 세분하여 전과정을 9 (기)로 나누었다. 핵질의 변화는 골지후기부터 서서히 응축하기 시작하여, 이탈기에서 완전한 핵을 형성하였다. 정자꼬리의 형성시기는 골지전기에서 형성하기 시작하여 이탈기에서 완성되었다. 동면직전 10월부터 동면기 (11월, 12월, 이듬해 1, 2, 3월)까지는 정자형성 세포의 퇴화과정이 일어났다. 즉 미분화 정자형성 세포들은 세르톨리 세포의 식작용에 의해 포식되어졌는데 이는 동면을 위한 에너지 효율적 이용과 번식조절을 위한 적응 메카니즘이라 여겨진다.
9, 10일 계배의 대뇌 신경세포 분화의 변화를 관찰하기 위하여 신경세포의 미세구조 변화를 전자현미경을 이용하여 관찰하였으며, 또한 대뇌 단백질, 탈수소효소의 활성도 및 ATP의 변화상을 분석한 결과는 다음과 같다. 대뇌 신경세포의 미세구조의 변화는 발생 9일 계배의 염색질은 핵질내에 비교적 고르게 분포해 있었으며 핵막은 2중막으로 아주 선명하게 구별되어 있음을 관찰할 수 있었다. 특히 조면소포체와 Golgi복합체가 잘 발달되어 있었으며, 또한 polysome이 관찰되었고 synaptic소포들이 산재되어 있었다. 10일 배양군의 계배의 신경세포는 염색질이 고루 분포해 있었으며 핵막을 뚜렷이 구분할 수 있었다. 세포질을 포함한 조면소포체와 mitochondria 그리고 Golgi 복합체가 비교적 잘 발달되어 있었다. 계배대뇌의 9일 배양군에서는 37개의 polypeptide band들이 분리되었고, 10일 배양군에서는 38개의 band가 생성되었다. 탈수소효소 활성도는 배양시간이 증가할 수록 증가하는 현상을 보였는데, LDH의 활성도는 9일 배양시 11.07이며 10일 배양시에는 12.12이였고, MDH는 각각 11.89와 13.44로 나타났다. 그리고 SDH는 9일 배양군에서는 8.45이며 10일 배양군에서는 10.52의 활성을 보여 증가했음을 알 수 있다. ATP의 변화는 10일 배양군$(2.10\times10^{-4}mol/ml)$이 9일 배양군$(2.50\times10^{-6}mol/ml)$에 비해 감소현상을 보였다.
대부분의 연갑류에서 androgenic gland (AG)는 수컷의 성 분화와 성징의 발달에 관여하는 호르몬을 분비하는 것으로 알려져 있다. 징거미새우, M. nipponense의 AG는 제5보각 (fifth waking legs)의 저절 (coxopodite)내에 위치한 사정관과 수정관의 말단부 (distat vas deferens)사이에 위치하고 있었다. AG는 단일 세포 가닥 (simple cellular strand)들로 이루어져 있고 이들 세포 가닥의 바깥은 섬유성 외피 (fibrious sheath)로 둘러싸여 있었다. 특히, 각 세포 가닥의 가장자리를 둘러싸고 있는 섬유성 외피에는 미세융모 (microvilli)들이 존재하고 있었다. AG 세포의 핵은 난구형으로 관찰되었고, 핵 내에는 전자밀도가 높은 2∼3개의 핵소체 (nucleolus)와 전자밀도가 다소 낮은 과립상의 염색질 (chromatin)들이 분산되어 존재하였다. 세포질 내에는 매우 잘 발달된 조면소포체와 Golgi 복합체 그리고 횡 방향의 크리스테를 갖는 미토콘드리아가 존재하는 점으로 보아 본 종의 AG 세포는 단백-생산세포 (protein-production cell)로 판단되었다. 하지만, 단백-생산세포의 구조를 가짐에도 불구하고 이들 세포로부터 분비과립과 같은 어떠한 물질도 관찰할 수 없었다. 이러한 분비물질이 관찰되지 않는 점은 생합성된 물질이 세포 내 축적없이 혈강으로 분비되기 때문인 것으로 판단되었다.
In this study, an attempt was made to investigate the probable organelles participating in the secretion of biligrafin. The animals (ICR male mice, 25-30gm) were divided into normal control and 6 biligrafin injected groups to which 30% biligrafin (0.006ml/gm b.w.) were injected at 10, 20, 40, 80, 160 and 320 min prior to the sampling. The mice of each group were perfused through the heart with ice-cold 2.5% glutaraldehyde buffered with 0.1M Na-cacodylate (pH. 7.4) under the Na-pentobarbital (Nembtal 0.0015mg/gm b.w.) anesthesia and liver tissues were taken from each group. Some specimens were immersed 1 hr in the same solution used in the perfusion. After an overnight rinse in 0.1M Na-cacodylate buffer containing 10% DMSO and 7.6% sucrose, $75{\mu}m$ fronzen sections were made for cytochemical study. The sections were incubated in thiamin pyrophosphatase (TPPase) and inosine diphosphatase (ID Pase) media for 70 min at $37^{\circ}C$ respectively and acid phosphatase (AcPase) medium for 40 min at $37^{\circ}C$. They were postfixed in 1 % $OsO_4$ for 1 hr. The other specimens were immersed for 8 hrs in the fixative consisting of 2.5% glutaraldehyde and 3.0% paraformaldehyde buffered with Na-cacodylate (pH. 7.4). All of the osmificated specimens were processed for electron microscopy. In both normal and biligrafin injected groups, endoplasmic reticulum (ER), vacuoles, Golgi apparatus and lysosomes were seen in the vicinity of bile canaliculus. In the biligrafin injected groups, however, the Golgi apparatus appeared to be decreased and ER and vacuoles were dilated and increased. The rough endoplasmic reticulum (RER) having a few attached ribosomes appeared to be the round saccule, especially at 20 min after biligrafin injection. Smooth endoplasmic reticulum (SER) seemed to be formed by the detachment of ribosomes at the cisternal end of RER. The cistern of SER showed saccules which probably budded off to form the vacuole. The vacuoles were devoid of visible centents. This finding seemed to be in agreement with the biochemical property of the bile constituents. The fusion between the vacuoles and bile canaliculus were frequently seen in the groups injected with biligrafin. The lysosome did not show any changes in the biligrafin injected groups. Accumulation of some material and lipid droplets were seen at the 40 and 80 min after biligrafin injection, especially at the latter. At 160 and 320 min after biligrafin injections, however, they were decreased successively while the RER stack, free ribosomes and polysomes were increased. Although the reactive products of TPPase and IDPase were observed in the ER saccules and vesicles of the normal control and biligrafin injected groups, the fusion between the bile canaliculus and saccules or vesicles could easily be seen in the latter. The AcPase activity, however, was observed in the cistern at the maturing face of Golgi apparatus and lysosomes in both normal and biligrafin groups. The results suggest that the biligrafin is excreted via the vesicles, vacuoles or sacoules probably derived from the SER without the participation of Golgi apparatus and lysosomes, and the excess amount of material is stored as inclusions during the repairing of the organelles being overactive.
This study observes the change of small intestine mucosa paneth cell by changing the amount of radiation to rat. It uses the rat(Wistar) of 250-300g as the experimental animal and irradiation equipment is Gammacell 3000Elan System. and the irradiation is conducted for 500Rad group for 34sec., 1000rad for 68sec., and 1500Rad for 102sec. once on the whole body of each group, eachgroup is anesthetized with ether after 24hours. its small intestine is extrated and then it is observed by transmission electronic microscopy. The experimental results are as follows : 1. 500 Rad Group The Slightly elongated form of mitochondria and rough endoplasmic reticulum are observed in 500 Rad group. 2. 1000 Rad Group Golgi apparatus is appeared as the extended plasmodium, secretory granules exist only external membrane due to the self-fusion, the number of mitochondria that are changed as L-type are reduced, rough endoplasmic reticulum is distributed with the expanded form. 3. 1500 Rad Group The number of Golgi apparatus and granules is remarkably reduced, mitochondria is changed into C-type and free ribosomes can be observed instead of the reduction of rough endoplasmic reticulum.
In order to study process of spermiogenesis of the Korean manchurian field mouse, Apodemus spesiosus peninsulae, the testis obtained from sexually matured male reproductive organs, were examined with electron microscopy, and the following results were obtained based on the characters of cell differentiation. 1. According to the features of cell structure, spermiogenesis of the Apodemus spesiosus peninsulae was five phases: Golgi, cap, acrosome, maturation and spermiation phase. They were further subdivided into two steps of early and late phases respectively. Hence, the spermiogenesis consists of ten steps. 2. In the changes of the chromatin, the chromatin granules began to be condenced in the cap phase and regularizated at maturation phases, and a perfect nucleus of sperm was formed at the spermiation phases. 3. The formative period of sperm tail began to be develop in the early Golgi phase and completed at the spermiation phases 4. The outer dence fibers of middle piece were arranged in a horseshoe fashion. Nos. 1, 5, 6 and 9 of the outer dense fibers were larger than the others. The structure of axoneme in the middle piece was 9+2, and the axonemal complex consists of A and B microtubules, dynein arms and radial links.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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