• 한국식품영양과학회지
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• 제24권5호
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• pp.651-657
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• 1995

모유성분을 고분자분획(20KD 이상 분자)과 저분자분획(20KD 이하 분자)으로 나누어 항산화력을 검토한 결과, 고분자분획이 저분자분획 보다 더 강력한 항산화력을 나타내었다. 이 모유의 항산화력은 주로 20KD 이상에 존재하는 항산화 효소에 기인할 가능성이 시사되어 모유의 채유 기간에 따른 항산화 효소를 비롯하여 protein-SH와 nonprotein-SH를 검토한 결과, catatase는 7일째 현저히 저하한데 비해 GSH peroxidase, GSH S-transferase는 7일째를 전후로 현저히 증가한 후 감소하는 경향을 나타내었다. Protein-SH는 채유 기간에 따라 차츰 감소하였으나 nonprotein-SH는 20일째 peak를 이루고 그 후 감소하였다. 이상의 결과로 부터 모유의 고분자분획은 강력한 항산화력을 나타내었으며, 이 항산화력은 catalase, GSH peroxidase 및 GSH S-transferase 등의 항산화 효소 활성에 기인할 것으로 사료된다.

• 한국환경농학회지
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• 제16권4호
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• pp.365-372
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• 1997

콩과 옥수수에서 glutatione-S-transferases와 carboxylesterase의 생화학적 특성과 quizalofopethyl 처리에 따른 식물체내 효소의 활성 변화를 조사한 결과는 다음과 같다. GSTS의 최적 pH는 8.2이고, Km값은 콩 $6.7{\times}10^{-3}M$, 옥수수 $2.5{\times}10^{-3}M$이었으며, Vmax는 콩 50nmole/mg/min, 옥수수 20nmole/mg/min이었다. Carboxylesterase의 최적 pH는 6.2${\sim}$7.0 범위이고, Km값은 콩 $4.2{\times}10^{-4}M$, 옥수수 $2.5{\times}10^{-4}M$이었으며, Vmax는 콩 33 nmole/mg/min, 옥수수 10nmole/mg/min이었다. 콩과 옥수수에 살포된 quizalofop-ethyl은 콩과 옥수수의 GSTs와 carboxy-lesterase의 활성을 감소시켰고, quizalofop-ethyl 80ppm을 처리했을때 콩은 10일이 경과후 회복되었지만, 옥수수는 3일이 경과후 고사하였다.

• BMB Reports
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• 제29권5호
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• pp.462-467
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• 1996

Acetolactate synthase (ALS, EC 4.1.3.18) is the first common enzyme in the biosynthesis of leucine, isoleucine, and valine. It is the target enzyme for several classes of herbicides, including the sulfonylureas, the imidazolinones, the mazolopyrimidines, the pyrimidyl-oxy-benzoates, the pyrimidyl-thio-benzens, and the 4,6-dimethoxypyrimidines. An amino-terminal fragment of the sulfonylurea-resistant ALS gene (SurB) from Nicotiana tabaccum was cloned into the bacterial expression vector pGEX-2T. The resulting recombinant plasmid pGEX-ALS1 was used to transform Escherichia coli strain BL21, and the tobacco ALS was expressed in the bacteria as a protein fused with glutathione S-transferase (GST). Polyclonal antibodies against the fusion product (GST-ALS) were produced, and the sensitivity of GST-ALS with the rabbit anti-GST-ALS IgG was up to 50 ng. This antibody was used for Western blot analysis of the partially purified ALS from barley shoots. The results suggest that the polyclonal antibody produced in this study can be used to detect plant ALS.

• 한국수정란이식학회지
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• 제25권4호
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• pp.273-279
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• 2010

Follicular cystic follicles (FCFs) show delayed regression with persistent follicle growth. However, the mechanism by which follicles are persistently grown remains unclear. Glutathione S-transferases (GSTs) are drug-metabolizing and detoxification enzymes that are involved in the intracellular transport and metabolism of steroid hormones. In this study, a proteomic analysis was performed to identify whether GST expression is changed in bovine FCFs and to predict the interactions between GST and other proteins. Normal follicles and FCFs were classified based on their sizes (5 to 10 mm and 25 mm). In bovine follicles, GST mu 1 (GSTM1) was detected as a differentially expressed protein (DEP) and significantly up-regulated in FCFs compared to normal follicles (p<0.05). Consistent with the proteomic results, semi-quantitative PCR data and western blot analysis revealed an up-regulation of GSTM1 in FCFs. Expression levels of aromatase and dehydrogenase proteins were changed in FCFs. These results show that the up-regulation of GSTM1 that is observed in bovine FCFs is likely to be responsible for the persistent follicle growth in FCFs as the activity of aromatase and the dehydrogenases.

• Animal cells and systems
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• 제12권3호
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• pp.149-155
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• 2008

We have isolated and characterized Agrius convolvuli cDNA encoding a c-type lysozyme. The cDNA sequence encodes a processed protein of 139 amino acid residues with 19 amino acid residues amino-terminal signal sequence and 120 amino acid residues mature sequence. The amino acid residues responsible for the catalytic activity and the binding of the substrate are conserved. Agrius lysozyme has a high identity to Manduca sexta. Recombinant A. convolvuli lysozyme was expressed in Escherichia coli BL21(DE3) pLysS cells for pGEX 4T-1 expression vector. Their optimal conditions for the fusion protein expression and purification were screened. Lysozyme gene amplified with primers ACLyz BamHI and ACLyz XhoI was ligated into the pGEX 4T-1 vector, which contained the glutathione S-transferase(GST) gene for fusion partner. The fusion protein was induced by IPTG and identified by SDS-PAGE analysis. Molecular weight of the fusion protein was estimated to be about 45 kDa. Recombinant lysozyme, fused to GST, was purified by glutathion-Sepharose 4B affinity chromatography. Western blot analysis of this protein revealed an immunoreactivity with the anti-Agrius lysozyme.

• 생명과학회지
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• 제14권1호
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• pp.148-153
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• 2004

가자 추출물을 취하여 사람, 돼지, 쥐 및 개 등의 3% 적혈구용액으로 응집력시험을 행한 결과 7가지 적혈구 모두에 렉틴 활성이 나타났으며 $LD_{50}$는 390 mg/kg으로 측정되었다. 생리 활성에 대한 영향을 알아보고자 생체 내외인성 요인에 의한 친전자성 물질로 생체내에서 독작용, 노화, 발암 및 면역 억제작용을 유발하는 원인 물질인 free radical생성에 관여하는 효소인 XO 및 AO의 활성을 측정 한 결과, XO 에서는 일주일간 매일 300 mg/kg의 용량으로 가자 추출물을 투여한 군이 정상군보다 5배 증가되는 결과를 나타내었고 AO에서는 정상군보다 시료 투여군이 2배 증가되는 결과를 나타내었다 glutathione은 단백질이나 DNA합성, amino acid의 이동 반응 및 thiol기의 저장 등과 같은 생물학적으로 중요한 여러 가지 반응에 직접 관여하는 물질이다[16〕. 이에 간장 조직의 glutathione농도를 측정한 결과 간장 독성의 유발로 인한 효소 활성은 정상군에 비하여 1주간 매일 300 mg/kg의 용량으로 시료 투여한 군의 효소 활성이 79% 감소됨을 볼 수 있었다. 체내의 여러 가지 해독반응과정에 관여하는 GST효소활성을 측정 한 결과 정상군에 비해 1주간 매 일 300 mg/kg의 용량으로 시료 투여한 군이 66%정도 감소된다는 결과를 볼 수 있었다. glutathione 합성에 관여하는 $\gamma$-GCS의 활성과 산화형 glutathione을 환원형 glutathione으로 환원시키는 GR의 활성을 관찰한 결과 가자 추출물 투여군이 정상군보다 GR의 활성은 80% 감소되었고, 합성에 관여하는 $\gamma$-GCS의 활성은 정상군과 비교할 때 약간의 감소만을 나타내 glutathione함량 변동에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 생각된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제22권4호
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• pp.267-273
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• 1998

Pretreatment of acidic polysaccharide of Korean red ginseng (AcPS) for two weeks remarkably lowered the elevated content of lipid peroxide and levels of aminotransferases, sorbitol dehydrogenase, ${\gamma}$-glutamyltransferase, alkaline phosphatase and lactate dehydrogenase in liver intoxicated by acetaminophen (AA) . Pretreatments of AcPS also strengthen the liver function of glutathione related detoxication system indicated by glutathione contents and activities of glutathione S-transferase and glutathione reeducates which were affected by AA treatments. Activity of ${\gamma}$-glutamylcysteine syntheses was not changed by AcPS pretreatment whereas the activity of flu tathione reeducates was increased significantly. These results collectively indicate that the treatments of AcPS can promote the metabolism of lipid and reduce the production of peroxide in acetaminophen-intoxicated animals.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제22권1호
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• pp.9-17
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• 2007

Hermansky-Pudlak Syndrome (HPS) 환자에서 조기에 발생되는 폐섬유화의 원인을 알아보고자, 생쥐 HPS 모델인 ep/ep,pe/pe 돌연변이종의 폐 항산화계의 환성과 방사선에 대한 반응을 측정하였다. HPS 폐에서는 대조군에 비해 glutathione이 더 산화되어 있었고, catalase, glutathione S-transferase(GST) 등의 항산화효소의 활성이 저하되어 있었으며, 10 Gy의 방사선을 조사하였을 때, glutathione 양이 감소하였고, 대조군 폐에서 보여지는 방사선에 의한 ${\gamma}$-glutamylcysteine ligase(GCL), glutathione peroxidase(GPx) 활성의 유의성 있는 증가가 관찰되지 않았다. 이 결과로부터 HPS 환자의 폐는 항산화계 활성이 저하되어 있을 뿐 아니라, 산화적 스트레스가 가해 졌을 때 적응 반응이 매우 취약하여 산화적 환경에 노출된 폐의 병증을 유발할 수 있음을 추측할 수 있다.

• 분석과학
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• 제22권3호
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• pp.228-234
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• 2009

본 연구에서는 식물의 제초제 해독 기구를 알아보기 위해, 양배추 (Brassica oleracea)로 부터 글루타티온 전달효소를 정제하고 외래성 이물질에 대한 기질 특이성과 저해 효과를 분석하였다. 양배추로부터 DEAE-Sephacel 컬럼과 GSH-Sepharose 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 약 10%의 수율로 글루타티온 전달효소를 정제하였다. 정제된 효소에 대해 분자량을 측정한 결과, SDS-polyacrylamide 겔 전기영동으로 측정한 분자량은 23,000Da을 나타내었으며, 겔 크로마토그래피로 측정한 분자량은 48,000Da을 나타내었다. 따라서 정제된 양배추 글루타티온 전달효소는 소단위체의 분자량이 약 23,000Da의 동종이량체라는 사실을 알 수 있었다. 이 효소의 저해제에 대한 효과를 조사한 결과, S-hexyl-GSH와 S-(2,4-dinitrophenyl)GSH에 의해 활성이 저해되었다. 양배추 글루타티온 전달효소의 기질특이성은 CDNB와 ETA에서 높은 활성을 보였으며, cumene hydroperoxide에 대한 GSH peroxidase 활성도 나타내었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제36권6호
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• pp.708-719
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• 2007

본 연구에서는 104명의 성인남녀를 대상으로 그들의 GSTT1, GSTM1, GSTP1의 유전적 다형성 분포도를 조사한 결과, 전체 대상자들 중 각각 60명(57.4%), 42명(40.6%)가 GSTT1 과 GSTM1의 유전자를 가지고 있었으며, GSTT1과 GSTM1 유전자가 둘 다를 가진 대상자는 27명(25.7%), 둘 중에 하나만 가지고 있는 사람은 47명(45.5%) 그리고 둘 다 없는 사람은 30명으로 28.7%에 해당되었다. GSTP1 유전자의 경우 homozygous(a/a) wild type은 79명(75.5%)으로 대부분의 대상자가 여기에 해당되었으며, heterozygous(a/b) heterozygous type은 22명(21.6%), 그리고 homozygous(b/b) wild type으로 나타난 대상자는 3명(2.9%)이었다. GSTT1 null type은 산화적 스트레스를 더 많이 받고 있는 것으로 알려진흡연자의 비율이 present 군에 비해 낮음에도 불구하고 적혈구 GSH의 농도는 유의적으로 낮고 임파구 DNA 손상정도는 유의적으로 높은 것으로 나타났다. GSTM1 유전자의 경우 적혈구 GSH-Px의 활성만이 GSTM1 null type이 presenttype에 비해 유의적으로 높은 것으로 나타났으며, 나머지 다른 지표에서는 GSTM1 null type과 present type 간의 유의적인 차이가 없었다. GSTP1 유전자 다형성에 따른 항산화 영양상태의 유의적인 차이는 없었다. 흡연과 GST 유전자 다형성의 상호작용결과, 혈장 ${\alpha}$-carotene 농도, 적혈구 GSH-Px와 GST 활성은 GSTT1 null type의 경우 흡연자에 비해 비흡연자가 유의적으로 높게 나타났으며, GSTT1 present type에서는 흡연자와 비흡연자간의 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났다. GSTM1 유전자의 경우 GSTM1의 null type에서 흡연자의 경우 비흡연자에 비해 혈장 ${\gamma}$-tocopherol과 ${\beta}$-carotene 수준이 유의적으로 낮았다. GSTT1과 GSTM1 유전자가 둘 다 없는 경우(both null)에는 흡연자의 혈장 lycopene과 적혈구 GST 활성이 비흡연자에 비해 유의적으로 낮았다. GSTP1 유전자의 경우 혈장 ${\alpha}$-carotene과 적혈구 GSH-Px 활성은 a/a type의 흡연자가 비흡연자에 비해 유의적으로 낮았고, 적혈구 catalase의 활성은 a/b type에서 흡연자가 비흡연자에 비해 유의적으로 낮았으며, ${\beta}$-carotene 농도는 두 type 모두에서 유의적으로 흡연자가 낮았다. 이상의 연구 결과 GST 유전적 다형성에따라 산화, 항산화 관련 효소 활성 및 항산화 영양소 수준의상태가 차이가 있음을 알 수 있었으며, 특히 흡연자의 경우 GST 유전자 type에 따라 항산화 영양상태가 더 큰 영향을 받음을 알 수 있었다. 이러한 연구 결과는 유전적 다형성에따라 항산화 영양소의 권장수준을 책정하는데 기초연구자료로 활용될 수 있을 것이다. 즉, GSTT1 또는 GSTM1 null type의 경우 비흡연자에 비해 흡연자가 항산화 영양소 수준이 더 낮게 나타났으므로 그들의 체내 항산화 영양 상태를 증가시킬 수 있는 여러 방안들, 즉 항산화 비타민의 보충투여 및 야채와 과일의 섭취 권장 등이 고려될 수 있을 것이다. 또한 GST 유전자 다형성에 따라 항산화 영양상태의 차이가 있으므로 항산화 관련 in vitro 실험, 동물 및 인체 실험의 결과 해석 시 나타나는 개인 간의 변이차이는 GST 유전자 다형성으로 일부분 설명될 수 있으리라 기대된다. 향후대상자의 범위를 좀 더 넓혀서 GST 유전자 다형성과 항산화 영양상태의 관계를 규명하고자 하며 더불어 산화물질 해독에 관여하는 다른 유전자(CYP 450, SULT 등)의 역할에 대해서도 계속적인 연구가 필요하다고 사료된다.