Kim, Nam-Dae;Kim, Hyun-Jin;Jang, Duck-Kyu;Ahn, Byung-Kwoun;Joo, Hyun-Kyu;Lee, Si-Kyung
Applied Biological Chemistry
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v.43
no.1
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pp.29-33
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2000
This study was carried out to investigate the effect of glutaminase added to Doenjang, Kochujang and Kanjang in manufacturing. The consequential changes of L-glutamic acid and amino nitrogen contents were periodically analysed during aging. L-Glutamic acid contents in Kochujang, Doenjang and Kanjang aged for 45 days increased to 671.8%, 298.1% and 193.4% with glutaminase and also increased to 363.1%, 159.2% and 35.7% as compared with those without glutaminase. The 0.01% addition of glutaminase to Kochujang made L-glutamic acid content increased more than 3 times. The increase ratio of amino nitrogen was 216%, 120.8% and 84.5% in Kochujang, Kanjang and Doenjang with glutaminase which aged for 45 days, respectively. The effect of glutaminase added was the greatest in Kochujang. It increased to 35.7%, 8.4% and 40.3% as compared with those without glutaminase. The results of sensory evaluation showed that the products were favorably affected in taste, flavor and acceptability by glutaminase added.
This study was aimed to find out the influence of long-term fertilization for 21 years on soil enzyme activities in the silty clay loam textured normal paddy soil. Total urease activity (TUA) and the microbial urease activity (MUA) were shown to be changed significantly, but the accumulated urease activity (AUA) was similar within trial plots. Especially the MUA of the plots annually applied N.P.K. fertilizers with compost and N.P.K. fertilizers with silicate fertilizer were the highest among plots. The total L-glutaminase activity (TGA) and the accumulated L-glutaminase activity(AGA) were changed significantly among trial plots, but the microbial L-glutaminase activity (MGA) was not. By the simple correlation analysis, it was shown that the TGA and the AGA correlated highly significant to available phosphorus available $SiO_2$ content and pH. Addition of the toluene to the incubation mixture did not markedly affect the activity of phosphatase, but the difference of phosphatase activity among plots was significant. By the simple correlation analysis, it was shown that the phosphatase activity ; correlated highly significant to pH, available $SiO_2$, available phosphorus and exchangeable calcium in soils.
Changes in glutamatergic nervous activities following intracerebroventricular (icv) administration of ethylcholine aziridinium (AF64A) were studied in rats. The levels of total glutamate, those of glutamate in cerebrospinal fluid (CSF) and in extracellular fluid (ECF) of striatum, the activities of glutamine synthetase (GS), glutaminase and glutamate dehydrogenase (GDH) and the specific binding sites of $[^3H]$MK801 in striatum, hippocampus and frontal cortex were assessed a week after the infusion of AF64A (3 nmol) into lateral ventricle. The levels of total glutamate were significantly decreased in striatum, hippocampus and frontal cortex after AF64A treatment. Although the levels of glutamate in CSF weren't changed after AF64A treatment, the levels of glutamate in ECF of striatum were significantly decreased (62.6%). GS activities in striatum were significantly decreased. But, glutaminase activities in striatum were significantly increased. However, the activities of GS and glutaminase in frontal cortex and hippocampus weren't changed. Although GDH activities in frontal cortex were significantly decreased, those in striatum and hippocampus weren't altered. The striatal densities of $[^3H]$MK 801 binding sites were increased without changes in its affinity. Also, the specific binding sites of $[^3H]$MK801 were increased in frontal cortex but not in hippocampus. These results indicate that the glutamatergic nervous activities were altered with the infusion of AF64A into lateral ventricle. Furthermore, it suggest that the decreased levels of glutamate after AF64A treatment may affect the change in the other parameters of glutamatergic neuronal activities.
Glutaminase production in Zygosaccharomyces rouxii by solid-state fermentation (SSF) is detailed. Substrates screening showed best results with oatmeal (OM) and wheatbran (WB). Furthermore, a 1:1 combination of OM:WB gave 0.614 units/gds with artificial sea water as a moistening agent. Evaluation of additional carbon, nitrogen, amino acids, and minerals supplementation was done. A central composite design was employed to investigate the effects of four variables (viz., moisture content, glucose, corn steep liquor, and glutamine) on production. A 4-fold increase in enzyme production was obtained. Studies were undertaken to analyze the time-course model, the microbial growth, and nutrient utilization during SSF. A logistic equation ($R^2$=0.8973), describing the growth model of Z. rouxii, was obtained with maximum values of ${\mu}_m$ and $X_m$ at $0.326h^{-1}$ and 7.35% of dry matter weight loss, respectively. A goodfit model to describe utilization of total carbohydrate ($R^2$=0.9906) and nitrogen concentration ($R^2$=0.9869) with time was obtained. The model was used successfully to predict enzyme production ($R^2$=0.7950).
The effects of herbicides on biochemical processes in soil environment were studied by examining the effects of the chemical structure of each herbicides on soil enzyme activities and pesticides residue revealed when soil treated with urea was incubated at $28{\pm}1^{\circ}C$ for 56 days. The inhibition effects of herbicides on soil enzyme activites in soil decreased in the order of urea group>dinoseb>propanil>diphenyl eter group>acid amide group for urease, and dinoseb>urea group>diphenyl ether group>acid amide group for L-glutaminase and protease, dinoseb>diphenyl ether group>urea group>acid amide group for phosphatase. Herbicides inhibited the activities of soil enzyme in the early stage of treatment but increased the activities of urease, L-glutaminase and protease in the late stage. When herbicides were treated in soil together with urea the degradation of insecticides was accelerated.
The effects of insecticides on biochemical precesses in soil were studied by determining the effects of the chemical structure of each insecticides on enzyme activities, pesticide residue and total number of bacteria revealed when soil treated with urea was incubated at $28{\pm}1^{\circ}$ for 56 days. The inhibition effects of insectides on enzyme activites in soil decreased in the order: dithiophosphoric acid > thiophosphhoric acid > phosphoric acid > carbamate insecticides for urease and phosphatase, thiophosphoric acid > dithiophosphoric acid > phosphoric acid > carbamate insecticides for L-glutaminase and protease. The inhibition effects of organophophorus insecticides on enzyme activities in soil were maintained longer than those of carbamate insecticides. Carbamate insecticides increased the activities of protease and L-glutaminase at 56 days. When insecticides were treated in soil together with urea, the degradation of insecticides was accelerated. By treatment of insecticides, the total number of bacteria was decreased at the early stage of treatment but thereafter increased according to phosphoric acid and carbamate insecticides.
Attempts were made if diol and triol fractions of ginseng saponin affect on glutamine transport into rat renal cortical mitochondria, swelling, phosphate dependent glutaminase activity, and consumption of oxygen. The following results were obtained. When mitochondrial preparation from rat renal cortex was incubated in medium containing 14C-glutamine and either triol or diol fractions, radioactivity was shown to increase at both 10-6% and 10-5% triol fractions of ginseng saponin, but reduce in case of diol fraction. The remarkable acceleration of the rate of swelling of renal cortical mitochondria was observed in the presence of 10-1% trios and diol fractions but no accerelation at lower concentrations. The activity of phosphate dependent glutaminase from renal cortical mitochondria was slightly activated at 10-2% of triol fraction. However, there was no effect in case of diol fraction. Oxygen consumption by mitochondria from renal cortex was remarkably increased at concentrations of 10-5% and 10-6% triol fractions, but reduced in the case of diol fractions. On the basis of these observations it was concluded that triol fraction of ginseng saponin might increase the transport of glutamine into mitochondria by accelerating the respiratory chain and supplying additional energy to mitochondria, and physiological role of triol fraction was entirely different from that of diol fraction of ginseng saponin.
Cerebellar granule and glial cells prepared from 7 day-old rat pups were used to investigate the effects of sub-acute nicotine exposure on the glutamatergic nervous system. These cells were exposed to nicotine in various concentrations for 2 to 10 days in situ. Nicotine-exposure did not result in any changes in cerebellar granule and glial cell viability at concentrations of up to 500 $\mu\textrm{M}$. In cerebellar granule cells, the basal extracellular levels of glutamate, aspartate and glycine were enhanced in the nicotine-exposed granule cells. In addition, the responses of N-methyl-D-aspartate (NMDA)-induced glutamate release were enhanced at low NMDA concentrations in the nicotine-exposed granule cells. However, this decreased at higher NMDA concentrations. The glutaminase activity was increased after nicotine exposure. In cerebellar glial cells, glutamate uptake in the nicotine-exposed glial cells were either increased at low nicotine exposure levels or decreased at higher levels. The inhibition of glutamate uptake by L-trans-pyrollidine-2,4-dicarboxylic acid (PDC) was lower in glial cells exposed to 50 $\mu\textrm{M}$ nicotine. Glutamine synthetase activity was lower in glial cells exposed to 100 or 500 $\mu\textrm{M}$ of nicotine. These results indicate that the properties of cerebellar granule and glial cells may alter after subacute nicotine exposure. Furthermore, they suggest that nicotine exposure during development may modulate glutamatergic nervous activity.
L-Asparaginase (E.C. 3.5.1.1) is an enzyme involved in asparagine hydrolysis and has the potential to effect leukemic cells and various other cancer cells. We identified the L-asparaginase gene (L-ASPG86) in the genus Mesoflavibacter, which consists of a 1,035 bp open reading frame encoding 344 amino acids. Following phylogenetic analysis, the deduced amino acid sequence of L-ASPG86 (L-ASPG86) was grouped as a type I asparaginase with respective homologs in Escherichia coli and Yersinia pseudotuberculosis. The L-ASPG86 gene was cloned into the pET-16b vector to express the respective protein in E. coli BL21 (DE3) cells. Recombinant L-asparaginase (r-L-ASPG86) showed optimum conditions at 37-40℃, pH 9. Moreover, r-L-ASPG86 did not exhibit glutaminase activity. In the metal ions test, its enzymatic activity was highly improved upon addition of 5 mM manganese (3.97-fold) and magnesium (3.35-fold) compared with the untreated control. The specific activity of r-L-ASPG86 was 687.1 units/mg under optimum conditions (37℃, pH 9, and 5 mM MnSO4).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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