Objectives: For our survey of the incidence of norovirus infections and the genogroup distribution of norovirus in Seoul, Republic of Korea, we evaluated through regular surveillance the prevalence of norovirus infections in patients with acute gastroenteritis occurring in Seoul from January 2007 to July 2011. Methods: For norovirus detection, we conducted epidemiological analyses on the basis of the junction of ORF1 and ORF2 (approximately 314 bp). 11,202 fecal specimens were collected from patients in Seoul with acute gastroenteritis between January 2007 and July 2011 and then tested for the presence of NoV via reverse transcription (RT) - polymerase chain reaction (PCR). Results: 16.6% (1,861/11,202) of the fecal specimens were determined to be positive for noroviruses. The incidences of norovirus infection in Seoul in the case of acute gastroenteritis with regular surveillance were 28.0% in 2007, 14.6% in 2008, 9.1% in 2009, 14.1% in 2010, and 12.9% in 2011, which shows that noroviruses constituted a major causative agent of acute gastroenteritis. Also, the incidence of noroviral infection in patients with acute gastroenteritis increased after the large-scale new influenza in 2009. Conclusions: The genetic characteristics of norovirus and the epidemiologic patterns of a viral pathogen in acute gastroenteritis patients may provide potentially effective data for epidemiological studies in Seoul, Korea.
RT-PCR method was applied to detect and clone the nucleocapsid protein (N) gene and glycoprotein (G) gene for sequencing 5 Korean VHSV isolates from cultured olive flounder, Paralichthys olivaceus. Phylogenetic analysis was performed to investigate their relationship with the VHSV strains described previously and isolated from different geographical area. Generally, VHSV strains were separated phylogenetically according to the major geographical area of isolation: Genogroup I (American type), Genogroup Il (British Isles) and Genogroup ill (European type). This study revealed that all 5 Korean VHSV isolates were belonged to Genogroup I and closely related to Japanese Obama25 type.
노로바이러스는 국내에서도 지속적으로 유행성 바이러스성 위장염을 일으키고 있다. 노로바이러스 저감화사업단(NOROTECL)의 1중 2세부과제에서는 농산물의 노로바이러스 오염 원인을 추적조사하여 노로바이러스 전파를 예방하고 저감화하기 위한 과제를 수행하였다. 2015년 1월부터 11월 사이에 노로바이러스와 관련이 있을 것으로 추정되는 80개 농산물, 80개 토양, 78개 인체분변, 3개 가축분변, 80개 농업용수, 80개 하천수 시료를 대상으로 노로바이러스, Male specific coliphage (MSC), 위생지표세균(Coliform, E. coli) 세 가지 검사를 통해 오염현황을 조사하였다. Semi-nested PCR과 DNA sequencing을 통해 18개의 Genogroup I과 3개의 Genogroup II 노로바이러스가 총 18개의 시료에서 발견되었다. Genogroup이 확정된 노로바이러스에 대하여 RT-PCR을 진행하였다. 대장균군과 대장균은 농산물에서 68%와 1%, 토양에서 88%와 7.5%, 인체분변에서 44%와 12.8%, 가축 분변에서 67%와 67%, 농업용수에서 74%와 30%, 하천수에서 96%와 51%의 검출율을 각각 나타냈다. MSC 결과에서는 14개의 시료가 양성으로 나타났다.
Kim, Sung Jae;Kim, Cheongung;Chung, Hee Chun;Park, Yong Ho;Park, Kun Taek
Journal of Veterinary Science
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제22권3호
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pp.32.1-32.8
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2021
Feline calicivirus (FCV) is a highly infectious pathogen in cats and widely distributed worldwide with high genetic variation. Full-length open reading frame 2 of 5 from recently isolated Korean FCV isolates were sequenced and compared with those of global isolates. The results of phylogenetic analysis supported dividing global FCV isolates into two genogroups (type I and II) and demonstrated the presence of genogroup II in Korea, indicating their geographic spread in East Asia. High sequence variations in region E of the FCV isolates emphasizes that a novel vaccine needs to be developed to induce protective immunity against various FCV strains.
Ha, Sook-Hee;Woo, Gun-Jo;Hwang, In-Gyun;Choi, Weon-Sang
Food Science and Biotechnology
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제18권5호
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pp.1150-1154
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2009
Low levels of virus contamination and naturally occurring reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) inhibitors restrain virus detection in oysters. A rapid and efficient oyster-processing procedure that can be used for sensitive virus detection in oysters was developed. Poliovirus type 1 Sabin strain was used to evaluate the efficacy of virus recovery. The procedure included (a) acid-adsorption and elution with buffers (0.25M glycine-0.14 M NaCl, pH 7.5; 0.25M threonine-0.14M NaCl, pH 7.5); (b) polyethylene glycol (PEG) precipitation; (c) resuspension in Tween 80/Tris solution and chloroform extraction; (d) the second PEG precipitation; (e) viral RNA extraction with TRIzol and isopropanol precipitation; and (f) RT-PCR combined with semi-nested PCR. The overall recovery of elution/concentration was 19.5% with poliovirus. The whole procedure usually takes 19 hr. The overall detection sensitivity was 4 RT-PCR units of genogroup I norovirus (NoV) and 6.4 RT-PCR units of genogroup II Nov/25 g of oysters initially seeded. The virus-detecting method developed in this study should facilitate the detection of low levels of NoV in oysters.
본 연구에서는 RT-nested PCR을 수행하여 부산 도심의 하천 중 동천에 존재하는 노로바이러스를 검출하고자 하였다. 기존에 보고되어진 노로바이러스의 capsid protein의 염기서열을 비교하여 노로바이러스 genogroup I,II (GI,II) 를 검출하기 위한 새로운 degenerated primer sets (PNK, KGIF/KGIR and KG2F/KG2R) 를 제작하였으며, 채수한 동천 시료를 초고속원심분리기를 통해 농축 후 물 속에 존재하는 노로바이러스의 검출을 시도하였다. 노로바이러스를 검출하기 위해 PCR primer를 비교한 결과 본 연구에서 제작한 capsid protein gene을 target으로 하는 primer set가 기존에 보고되어 있는 primer set보다 동일 시료에 대한 검출빈도가 우수하였다. 동천에 존재하는 노로바이러스의 오염 수준은 GI과 GII가 각각 76.47% (13/17), 70.59% (12/17) 로 나타났다. 그러나 기존에 알려진 primer와 본 연구에서 제작한 primer를 사용하였을 때 검출된 양성비율이 차이가 나지 않았다. 검출된 노로바이러스를 염기서열 비교를 통한 계통 발생학적 분석 결과, 동천에서 검출된 GI의 경우 1/2/4/5/9/10의 genotype이 GII의 경우 3/4/5/11/13의 genotype으로 분류되었다. 그리고 본 연구에서 검출된 major type 중 GII/4의 경우, 최근 아시아 각국에서 많은 문제를 일으키고 있는 major genotype으로 알려져 노로바이러스에 대한 위험성을 제고하게 하였다. 또한, 이러한 결과는 국내의 강, 호수, 하천 등이 비슷한 노로바이러스의 GI,II의 genotype으로 오염되어 있음을 암시하며 수계환경 중 미생물의 질을 개선하기 위한 지속적인 노로바이러스의 모니터링이 요구된다.
노로바이러스는 전 세계적으로 산발적인 발병 관련 비세균성 위장염의 주요 원인 물질이다. 노로바이러스 검출을 위해 역전사 실시간 PCR (RT qPCR)이 그 민감도와 특이성으로 인해 주요 수단으로 빠르게 자리 잡았다. 그러나 RT qPCR 분석을 위해서는 정확한 바이러스 RNA 추출방법이 필수적이다. TRIzol 시약은 생물학적 물질로부터 RNA의 추출에 이용되고 따라서 노로바이러스 RNA 추출에도 널리 사용된다. 이 연구에서는 인체 노로바이러스 유전체 그룹 I (GI) 및 유전자 그룹 II (GII)와 생쥐 노로바이러스(GV) 중에서 GII로부터의 TRIzol 을 이용한 바이러스 RNA의 추출률이 바이러스 시료 용액의 pH에 의존했다는 내용이 다루어졌다. 실시간 PCR의 Ct값으로 비교한 RNA 추출 수율은 산성 영역보다 알칼리성 pH에서 높았다. 이 연구 결과로 부터 TRIzol을 이용하여 GII RNA를 추출하여 노로바이러스를 정량적으로 분석할 때 pH조건이 대단히 중요하다는 것을 알 수 있었다.
Norovirus (NoV) is a major cause of food poisoning outbreaks in Korea. Most NoV outbreaks originate from environmental contamination, but bivalves such as oysters are also important vectors. Oyster Crassostrea gigas contamination by NoV has been reported in Korea, but no quantitative analyses of NoV have been performed. We investigated the NoV concentration in 21 oyster samples from a Korean commercial oyster-growing area with confirmed fecal contamination from January to December 2012, using real-time reverse transcription-polymerase chain reaction. Additionally, we assessed the NoV concentration after heating to investigate the effects of heat treatment on NoV-infected oysters. In NoV-positive samples, the cycle threshold (Ct) values were 37.43-39.41 and 36.77-39.30, while viral concentrations were $8.97{\times}10^2-2.24{\times}10^2$ and $3.05{\times}10^2-7.47{\times}10^1$ copies/g for genogroups I and II, respectively. After heat treatment, NoV genogroup I decreased by 83.4%, 88.0%, 89.4% and 100% at $60^{\circ}C$, $68^{\circ}C$, $70^{\circ}C$, and $100^{\circ}C$, respectively, for 15 min, while genogroup II respectively decreased by 67.3%, 76.3%, 80.1%, and 89.8% under the same conditions.
해수 환경 중의 VHSV 분포 조사를 위하여, 2003년 2월에서 5월까지 동해 및 남해안 인근 해역에 서식하는 자연산 해수 어류를 채집하였다. 바이러스 분리용 시료는 9종의 해수 어류로서 42개의 시료를 분석하였다. 각 시료의 조직여과액을 Epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells에 접종한 결과, 고등어 Scomber japonicus와 숭어 Mugil cephalus에서 바이러스가 분리되었으며 이들 바이러스는 RT-PCR법을 이용하여 VHSV로 동정할 수 있었다. 고등어에서 VHSV가 검출되었다는 기보고는 있지만, 숭어에 대해서는 본 연구에서 처음으로 VHSV를 분리하였다. 자연산 어류에서 유래된 세 개의 VHSV isolates에 대한 glycoprotein gene을 분석한 결과, 이들 바이러스는 양식 넙치에서 질병을 유발하는 VHSV isolates와 유사하며 모두 genogroup I (American type)에 속하는 것으로 밝혀졌다.
The occurrence trends and moleculargenetic characteristics of noroviruses detected from gastroenteritis patients in Jeju from 2008 to 2010 were investigated. In addition, the norovirus contamination and its characteristics of groundwaters in Jeju were examined. The incidence caused by norovirus in viral gastroenteritis patients has increased every year and was higher in male than in female. The patients caused by norovirus occurred throughout all months. The incidences started to increase from November, were very high from December to February, started to decrease from March, and were very low from June to September. The patients caused by norovirus occurred throughout all ages, however, the infants below 5 years were the most susceptible to norovirus infection and the age group from teens to forties were the most insensitive to norovirus infection. The sequencing analysis showed that 18 genotypes (8 genogroup I (GI) and 10 genogroup II (GII)) were detected, the incidences caused by GI and GII were 11.5% and 88.5%, respectively, and predominant genotype was GII-4 (70.5%), which was the major genotype giving rise to norovirus incidences in Jeju, together with GII-3 (6.1%) and GI-4 (4.1%). Among 20 groundwaters sampled at 9 wells (4 non-drinking water wells and 5 drinking water wells), noroviruses were detected from 2 groundwaters sampled at one non-drinking water well and their genotypes were GI-5 and GI-8.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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