• 한국수정란이식학회지
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• 제9권1호
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• pp.127-137
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• 1994

This study was carried out to investigate the inhibiting or promoting effect of fetal bovine serum fractionated by the molecular weight and to examine the effect of reconstruction of serum fractions on the development of 1- and 2-cell mouse embryos fertilized in vitro (IVEE) . The serum was separated by ultrafiltration or gel filtration methods and added in m-KRB medium for culture of IVFE. The developemental ability(cavitation and hatching) of embryos following culture of day 4 and 6 was compared among fractions. Small molecular weight fraction( <3 kDa) significantly inhibited the development of 1-and 2-cell IVFE to the blastocyst stages, compared with other fractions. One-cell IVFE were more sensitively damaged than 2-cell embryos by that fraction and arrested mainly at 2~4 cell stages. Moreover, small amount(<3%,v /v) of the inhibiting fraction acted even with protein rich fraction(100~30 kDa) and arrested the embryonic development. On the other hand, 100~30 kDa fraction promoted the embryonic development and no inhibiting effect was observed at the level of 50%(v /v) in culture medium In the experiment of gel filtraton, =30 kDa fraction showed the highest promoting effect on the embryonic development, but <4 kDa fraction inhibited significantly the development. These results suggest that serum contains not only small molecular weight inhibitory component(s) but also promoting one rather than albumin on embryonic development. And serum can be more effectively used in the IVF program after removal of inhibitory component(s) by one of above separation methods.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
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• 제15권1호
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• pp.1-9
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• 1997

본 실험에서는 한우초유를 33% ammonium sulfate 포화용액으로 처리하여 조면역글로블린을 얻은 후 gel filtration, ion-exchange chromatography를 이용하여 조면역글로블린의 분리 정도를 조사하고 affinity chromatography column을 이용하여 조면역글로블린으로 부터 Ig G의 결합정도를 알아보고 Protein G Sepharose fast flow system을 이용하여 신속하게 대량으로 Ig G의 분리를 꾀하여 얻어진 Ig G를 이용하여 ELISA방법으로 항체 생성유무를 측정하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 1. HPLC상에서 Superose 12 column을 이 용하여 한우초유의 조면역글로블린을 분리한 결과 Holstein초유의 조면역글로블린과 유사한 분리정도를 나타냈지만 약 84%의 Ig G를 한우초유의 조면역글로블린으로 부터 분리할 수 있었다. 2. Mono Q를 이용하여 HPLC에서 한우초유의 조면역글로블린을 gel filtration방법보다 짧은 시간에 분리할 수 있었지만 그다지 분리 정도가 좋지 않은 것으로 나타났다. 3. Hi-trap protein G column이 protein A sepharose CL-4B column보다 더 많은 양의 Ig G를 한우초유의 조면역글로블린으로 부터 얻을 수가 있었다. 4. Protein G Sepharose fast flow system을 이용하여 20mg의 sample양을 주입하여도 충분히 Ig G를 분리할 수 있었으며, ml 당 약 1.25mg의 Ig G를 얻을 수가 있었다. 5. ELISA방법을 이용하여 한우초유의 Ig G에 대한 항체 생성 유무를 측정한 결과, 면역화된 토끼에서 정상 토끼의 혈청에서보다 titer가 높게 나타났으므로 항체생성이 확인되었다.