Panax ginseng C.A. Meyer has been extensively used in the traditional oriental medicine as a restorative, tonic and prophylatic agent. This study was devised to develop a chemopreventive agent from panax ginseng to be able to suppress the genotoxicity and oxidative damage by ractive oxygen species, which are involved with cancer or aging. Ginseng petroleum ether extract (GPE) and one of its fraction, P2, showed an antioxidative effect on the lipid peroxidiphenyl-2-picryl hydrazil (DppH) radical generation. They also showed the suppressive effect of H2O2 or KO2 induced DNA damage by single cell gel electrophoresis (SCGE). Results from our study indicate that GPE and P2 are capable of protecting lipid peroxidation, and oxidative DNA damage. Therefore, GPE and P2 may be useful chempreventive agents which are involved with cancer and aging.
Circadian rhythms, time on a scale of about 24 hours, are present in a number of organisms including animals, plants, and bacteria. The control of the biochemical, physiological and behavioral processes is regulated by endogenous clocks in the suprachiasmatic nucleus (SCN). At the core of this timing mechanism is molecular machinery that are present both in the brain and in the peripheral tissues throughout the body, and even in a single cultured cell. In this study, we performed two-dimensional gel electrophoresis to figure out any correlation between protein expression patterns and the requirement of two canonical clock proteins, either mPER1 or mPER2, by comparing global protein expression profiles in livers from wildtype or mPer1/mPer2 double mutant mice. We could identify several differentially expressed protein candidates with respect to time and genotypes. Further analysis of these candidate proteins in detail in vivo will lead us to the better understanding of how circadian clock functions in mammals.
Human follicular fluid (HFF) is the in vivo microenvironment for oocyte maturation and includes a variety of proteins that could be involved in oocyte development and fertilization. We therefore used a proteomic approach to identify new HFF proteins. HFF from mature human follicles was obtained from five women following oocyte collection for in vitro fertilization (IVF). Ethanol-precipitated HFF run on two-dimensional gel electrophoresis (2DE) produced approximately 250 Coomassie brilliant blue-stained spots, 64 of which were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization-mass spectrometry (MALDIMS). In this study, several proteins including complement factor H, inter-${\alpha}$ (globulin) inhibitor H4, inter-${\alpha}$-trypsin inhibitor heavy chain H4 precursor, human zinc-${\alpha}$-2-glycoprotein chain B, PRO2619, PRO02044, and complex-forming glycoprotein HC were new proteins that have not been previously reported in HFF using proteomic methods. Additionally, we identified alloalbumin venezia for the first time from trichloroacetic acid (TCA)-precipitated HFF. These HFF proteins could serve as new biomarkers for important human reproductive processes.
To study the determinants which are involved in the loss of pathogenicity in wilt-inducing Pseudomoms solamcewum, several physlologica I functions were compared in a virulent P. solanacearum strain and an avirulent, spontaneously derived mutant strain. The polyacrylamide gel electrophoresis showed the distinction between two strains in the patterns and the relative intensity of proteins produced intracellularly or extracellularly. Enzyme assays showed that the level of polygalacturonase activity in the culture filtrate of the avirulent mutant was markedly reduced, while carboxymethylcellulase(rondoglucanase) activity in both strains were nearly negligible. These results suggest that the loss of pathogenicity in mutant strain is attributed in part to the reduced production of polygalacturonase. In audit ion, comparative analyses by agarose gel electrophoresis of DNA molecules isolated from both strains show that the pathogenicity genes of p. solanaceerum are not located on plasmid but are on chromosome.
Nuts are one of the most common sources of allergies in individuals of all ages. In order for a particular protein to render an allergic reaction, it must resist proteolytic digestion by intestinal enzymes. In this study, three well-known allergenic nuts, almonds, cashew nuts, and peanuts, were used as samples, and enzyme digestion with Bacillus protease and porcine pepsin was tested. A proteomic approach using two-dimensional gel electrophoresis and an MS/MS analysis was applied to visualize and identify the proteins that were resistant to enzyme digestion. Among the 150 protein spots tested, 42 proteins were assigned functions. Due to the lack of genomic databases, 41% of the identified proteins were grouped as hypothetical. However, 12% of them were well-known allergens, including AraH. The remainder were grouped as storage, enzymes, and binding proteins.
DNA methyltransferase was purified 282.6-fold from Chlamydomonas reinhardtii 21gr (mt+) gametic cell to examine the effect of polyamine on the enzyme acctivity. Polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE) revealed at least three bands(1 major band, 2 minor bands). Among these, the major band represents DNA methyltransferase. Polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of 0.1% sodium dodecylsulfate(SDS-PAGE) revealed a major band with M.W. 60,000. DNA methyltransferase activity was inhibited more effectively by spermine than by spermidine, and the inhibition by putrescine was smaller than spermine and spermidine. DNA methyltransferase activity was inhibited by 40% and 53% at 5mM and 20mM spermine, respectively. In the case of spermidine, the inhibition was 35% at 10mM and 44% at 20mM. However, the inhibition by putrescine appeared only above 5mM and reached about 25% at 20mM.
The red cell X-protein, NADH-diaphorase 1, malic enzyme and serum arylesterase phenotypes of 50 Thai Longtail and 53 Cameroon X Thai Longtail ($F_1$) crossbred sheep were determined by horizontal starch gel electrophoresis. None of the economic traits was influenced by DIA1, ME and EsA phenotypes. However, XP phenotypes showed a highly significant association with body weight, body height, heart girth and back girth, with mean values of XP+ve phenotype greater than XP-ve. The $XP^+$ allele was associated with greater body weight, body height, heart girth and back girth.
Korean ginseng was purified to obtain radioprotective protein fractions by buffer extraction, ammonium sulfate fractionation, CM-cellulose column chromatography, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions, GI, GII and GIII were subjected to Disc-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-PAGE. The molecular weights(M.W.) of native and denatured proteins were estimated by using regression line equations obtained from the mobilities of standard proteins. As the results, in Disc-PAGE, the GI fraction showed two protein bands with M.W. of above 213, 000 and 55, 000, GII showed one band with M.W. of 44, 000 and GIII, also one band with M.W. of 19, 000. In SDS-PAGE, GI fraction gave four subunit bands with M.W. of above 114, 000, 27, 000, 24, 000 and 19, 000, GII gave two bands with M.W. of 46, 000 and 22, 000, and GIII, one band of 19, 000.
Staphylococcus aureus is an important animal and human pathogen implicated in a variety of disease including food-poisoning caused by staphyloccal enterotoxins (SEs). In order to investigate the difference in genomic types and to monitor the transmission of S. aureus isolates, a total of 25 S. aureus isolates from different sources were determined for their genotypic characteristics by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) in addition to their ability to enterotoxin production and antibiotic resistance patterns in this study. All the isolates were susceptible to amikacin, and the resistance pattern to ampicillin and penicillin were most common among 14 different patterns. Eleven of 24 isolates produced one of three SEs, SEA, SEC or SED. Sixteen representative PFGE patterns were obtained by Smal restriction fragments of S. aureus isolates. Analysis of dendrogram based on PFGE band patterns suggested that food-poisoning outbreaks be caused by the diverse sources of food, of which their raw materials were infected with S. aureus. Also, it could be concluded that PFGE was a powerful tool for epidemiological tracing of infection source for food-initiated outbreaks.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.19
no.4
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pp.335-341
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1990
Nuclei proteins were purified from chick liver to homogeneity by means of acid extraction CM Sephadex c 25 column chromatography and Bio Rex 70 column chromatography, The molecular weight of liver Nuclei proteins 1 and 2 as estimated by electrophoresis on SDS-polycrylamide gel are 29000 and 27,000 respectively. These molecular weights are identical with those of Nuclei Proteins 1 and 2 isolated from chick erythrocyte. The liver and erythrocyte Nuclei Proteins also co-migrated in acetic acid-urea gel electrophoresis. Furthermore the anti-sera raised against liver Nuclei Proteins 1 and 2 cross-reacted with erythrocyte Nuclei Proteins 1 and 2 respectively, However the amino acid compositions of liver Nuclei Prooteins 1 and 2 were found to be different from those of corresponding erythrocyte Nuclei proteins ; the contents of serine and proline in liver Nuclei proteins were higherocyte Nuclei proteins ; the contents of serine and proline in liver Nuclei protesins were higher than those in erythrocyte Nuclei proteins while the content of lycsine in liver Nuclei proteins was lower than the erythrocyte Nuclei proteins, These results suggest that in spite of similarities in many respects the liver and erythrocyte Nuclei proteins in chicks and different proteins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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