Park, Jung-Ryeol;Kim, Sung-Woo;Kim, Jae-Bum;Jung, Woo-Hyuk;Han, Myung-Wan;Jo, Young-Bae;Jung, Joon-Ki
KSBB Journal
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v.21
no.3
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pp.204-211
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2006
For the production of the recombinant human interferon-gamma(rhIFN-${\gamma}$) in Escherichia coli, human glucagon and ferritin heavy chain were used as fusion partners. Even though rhIFN-${\gamma}$ is expressed as an inclusion body form in E. coli because of strong hydrophobicity of itself, over 50% of fused rhIFN-${\gamma}$ was expressed as soluble form in E. coli $Origami^{TM}$(DE3) harboring pT7FH(HE)-IFN-${\gamma}$ which encodes ferritin heavy chain-fused rhIFN-${\gamma}$. In the case of using glucagon-ferritin heavy chain hybrid mutant as a fusion partner, 6X His-tag was additionally introduced to N-terminus of GFHM(HE)-IFN-${\gamma}$ for enhancing purification yields of rhIFN-${\gamma}$. Fusion protein HGFHM(HE)-IFN-${\gamma}$ with two 6X His-tag was more effectively bound to Ni-NTA agarose bead than GFHM(HE)-IFN-${\gamma}$ with a 6X His-tag. rhIFN-${\gamma}$ was completely purified from enterokinase-treated HGFHM(HE)-IFN-${\gamma}$ by Ni-NTA affinity column. For high-level production of rhIFN-${\gamma}$, glucose was used as the sole carbon source with simple exponential feeding rate($2.4{\sim}7.2g/h$) in fed-batch process. The effective lactose concentration for the expression of the rhIFN-${\gamma}$ was $10{\sim}20mM$. Under the fed-batch culture conditions, rhIFN-${\gamma}$ production yield reached 11 g DCW/L for 6 hours after lactose induction.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.36
no.5
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pp.563-568
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2007
We report that the gamma linolenic acid content of pork is higher in finishing pigs fed diets containing hemp seed oil, evening primrose oil or borage oil as the sources of gamma linolenic acid. Thirty-six three crossing swines ($Landrace{\times}Yorkshire{\times}Duroc$), 80 kg in body weight, were randomly separated into four treatment groups with three pens per treatment and three animals per pen. The finishing swines were fed the experimental diets for 35 days until they reached the market weight of 110 kg. The animals were assigned to the four experimental diets: control diet containing 5.00% tallow, T1 containing 5.00% hemp seed oil (hemp seed oil 40:soybean oil 60), T2 containing 5.00% evening primrose oil (primrose oil 40:soybean oil 60) and T3 containing 5.00% borage oil (borage oil 40:soybean oil 60). The plasma triacylglycerol and total cholesterol content of the swine in the gamma fatty acids-fed groups were significantly (p<0.05) lower than those in the control group. No gamma linolenic acid was detected in the plasma of the control group, while tile level of gamma linolenic acid treatment groups was significantly (p<0.05) higher than the control in the order of T3, T2 and T1. Moreover, the level of gamma linolenic acid increased with increasing number of feeding days. There was a significant difference between the treatment groups (p<0.05). There was a difference in the amount of saturated fatty acid and polyunsaturated fatty acid accumulated in the pork according to the treatment groups or the parts of the pork meat. The level of n-3 fatty acid of pork was highest in T1, which had been fed the hemp seed oil, followed in order by T3 and T2 (p<0.05). The content of gamma linolenic acid in pork was highest in T3, which had been fed the borage oil, followed in order by T2 and T1 (p<0.05). In particular, the level of gamma linolenic acid in pork increased in the order of the back fat, pork belly, ham and loin.
Kang, Young Eun;Choi, Kyeong-Mi;Park, Eunjin;Jung, Won-Beom;Jeong, Heejin;Yoo, Hwan-Soo
Journal of Life Science
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v.27
no.3
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pp.289-294
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2017
Diabetes mellitus is associated with insulin resistance, which leads to down-regulation of insulin signaling and the decreased glucose uptake. Adipocytes are sensitive to insulin, and closely implicated in insulin resistance and diabetes. Insulin stimulates differentiation of preadipocytes to adipocytes, and increases glucose transport. Allium species have been used as traditional medicine and health-promoting foods. Allium hookeri (A. hookeri) is reported to improve the pancreatic ${\beta}-cell$ damage and exhibit pancreatic anti-inflammatory activity in streptozotocin-induced diabetic rats. We investigated whether A. hookeri extract (AHE) may stimulate glucose uptake in adipocytes through increasing insulin sensitivity. AHE enhanced fat accumulation, a differentiation biomarker, under the partial induction of differentiation by insulin. $PPAR{\gamma}$, a transcription factor highly expressed in adipocytes, promotes adipocyte differentiation and insulin sensitivity. AHE increased the differentiation of preadipocytes through up-regulation of $PPAR{\gamma}$. The activation of $PPAR{\gamma}$ increases the GLUT4 expression during adipocyte differentiation. GLUT4 is responsible for glucose uptake into the adipocytes. AHE increased the expression of GLUT4 in adipocytes, and subsequently enhanced the insulin-stimulated glucose uptake. These results suggest that AHE promotes adipocyte differentiation through activation of $PPAR{\gamma}$, and leads to enhance glucose uptake in adipocytes along with GLUT4 up-regulation. Thus, AHE may be effective for the insulin-sensitizing and anti-diabetic activities.
Korean Marine Plants (KMU-4, 6, 7) obtained from an herb which widely used in medicine for the treatment of a variety of pathologies. In this study, using mouse peritoneal macrophages, we have examined whether KMU-4, 6, 7 affects nitric oxide (NO) and COX-2 induced IFN-$\gamma$ and LPS and cell viability. KMU-6 inhibits IFN-$\gamma$ and LPS-induced NO. We found that KMU-6 had a little effect on COX-2 expression. These finding means that KMU-6 can be used in controlling macrophages mediated inflammatory disease. The present results indicate that KMU-6 has an inhibitory effect on the production of NO through down-regulation of COX-2 expression in LPS stimulated mouse peritoneal macrophages.
The present study was attempted to investigate the mechanism of oxidative cellular injuries which occur in diabetic rats by determining changes of antioxidant enzymes activity in the lung of alloxan-induced diabetic rats, the contents of glutathione in the lung, liver, blood samples, and ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activities in the liver. Superoxide dismutase activities (SOD), including Cu, Zn-SOD and Mn-SOD, decreased in the lung of diabetic rats compared with those of normal control rats. However, activities of catalase and glutathione peroxidase(GPX) activities were not affected in the lung of diabetic rats. In diabetic rats, glutathione contents in the lung, liver, and blood samples, as well as the activities of ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase in the livers which is known to be the key enzyme of glutatione biosynthesis, decreased significantly. From these experimental results, it is thought that the decrease in SOD activities in the lung, glutathione contents and ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activities in some tissues in alloxan-induced diabetic rats may be the crucial cause of vullnerability to oxidative cellular injuries.
Chang, Hye Jin;Lee, Jae Hoon;Kim, Mi Ran;Hwang, Kyung Joo;Park, Dong Wook;Min, Churl K.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.33
no.2
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pp.105-113
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2006
Objective: To investigate the role of ERK and $PPAR{\gamma}$ on the $TGF-{\beta}1$ induced human endometrial stromal cell decidualization in vitro. Method: Endometrial stromal cells are cultured under the following condition: DMEM/F12 (10% FBS, 1 nM E2 and 100 nM P4). $TGF-{\beta}1$ (5 ng/ml), Rosiglitazone (50 nM), and PD98059 ($20{\mu}M$) were added according to experimental purposes. Trypan-Blue and hematocytometer were utilized to count cell number. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and western blotting were utilized to detect proteins. Result: $TGF-{\beta}1$ inhibited proliferation of cultured human endometrial stromal cells and induced expression of PGE2 and prolactin. This effect was mediated by Smad and ERK activation. Administration of rosiglitazone, $PPAR{\gamma}$ agonist, prevented $TGF-{\beta}1$ effect on cell proliferation. Furthermore, Rosiglitazone inhibited $TGF-{\beta}1$ induced activation of ERK, consequently reduced PGE2 and prolactin production. Conclusion: $TGF-{\beta}1$ induced decidualization of endometrial stromal cell through Smad and ERK phosphorylation. $PPAR{\gamma}$ acts as a negative regulator of human ndometrial cell decidualization in vitro.
The objective of this study was to determine the best representative synthetic unit hydrograph that is applicable to ungaged small watershed. A typical unit hydrograph was established with the actual data from a small watershed. Four currently well-known methods for analyzing ungaged small watershed, including Snyder's, Clark's S.C.S. and Nash methods, were evaluated with the data from the same small watershed. The following observations were noted from the analysis of four methods. The Snyder's method yielded the similar peak discharge value as the typical unit hydrograph. With co-ordinates of three discharge values, i.e. 25%, 50% and 75% of peak discharge, were not adequate for deriving a typical unit hydrograph in ungaged small watershed. With Clark's method there shall be some way of obtaining the exact base length of time area diagram and isochrone of each reach of the stream. With Nash method peak discharge and base flow time are affected by the storage constant and gamma function argument; therefore, for deriving a more reliable and workable unit hydrograph one needs to select for the better estimation of storage constant and gamma function argument. In S.C.S. method peak discharge is directly related to the watershed area and inversely related to the time of peak diacharge. Therefore area with faster peak discharge yielded the higer peak discharge value. Although the peak discharge value obtained frome the S.C.S. method higher than the value obtained from the unit hydrograph developed from the actual data, this method contains a number of advantageous factors. The peak discharge value and the time of peak discharge can be claculated easity from the morphological characteristics of the watershed, and in S.C.S method co-ordinates of the unit hydrograph can be calculated easily from that of the dimensionless unit hydrograph. When the four currently used methods were evaluated with a typical unit hydrograph obtained from the actual data, the S.C.S method was show to be the best method in deriving a synthetic unit hydrograph for ungaged small watershed.
Background : Interleukin-18 (IL-18) is one of the principal inducers of interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) in lymphocytes. Materials and Methods : The effect of IL-18 on the expression of chemokine IP-10(CXCL10) mRNA in C57BL/6 mouse peritoneal macrophages was studied by using Northern blot analysis, enzyme linked immunosobent assay and electrophoretic mobility shift assay. Results : IL-18 was determined to exert no direct effect on the expression of IP-10(CXCL10) mRNA. However, IL-18 pretreatment was determined to play a cooperative role in the synergistic induction of LPS-induced IP-10(CXCL10) mRNA expression. The effect associated with IL-18 pretreatment with regard to the synergistic induction of LPS-induced IP-10 (CXCL10) mRNA expression was detected after 16 hr of IL-18 pretreatment, administered prior to LPS stimulation. The pattern of NF-${\kappa}B$ binding activity during IL-18 pretreatment with LPS stimulation was found to coincide with the expression of IP-10(CXCL10) mRNA. Conclusion : Although IL-18 alone exerts no direct effect on the expression of chemokine IP-10(CXCL10), a definite period of IL-18 pretreatment induces the synergistic expression of LPS-induced IP-10(CXCL10) mRNA. NF-${\kappa}B$ activation is a component of this synergistic effect of IL-18 pretreatment. These results provide useful information, which may facilitate the elucidation of the action mechanisms underlying IL-18 effect on the expression of IP-10(CXCL10) mRNA.
In order to evaluate the antifungal activity of bacteria against plant pathogenic fungi, 8 bacteria were isolated from mushroom compost hot spring, seaweed, and forest soil and mutants from them were induced by $LD_{95}$ gamma radiation($^{60}Co$). Bacillus circulans K1, Burkholderia gladioli K4 and Bacillus subtilis YS1 showed wide antifungal spectrum against 12 kinds of plant pathogenic fungi. From the radiation sensitivity test, B. gladioli K4 was very sensitive to gamma radiation and its $D_{10}$ value was 0.11 kGy. Antifungal activities of B. circulans Kl-1004 and B. subtilis YS1-1009, which were induced by the radiation of $^{60}Co$ increased against Botryosphaeria dothidea. The mutant strains, B. subtilis YS1-1006 and B. subtilis YS1-1009 were resistant to tebuconazole and copper hydroxide. SAR535, SAR5108, and SAR5118 mutated from Streptomyces sp. SAR01 were antifungal activity deficient mutants against 5 kinds of plant pathogenic fungi compared to wild strain, so that they could be supposed to be model strains far studying antifungal mechanism. It is suggested that various functional types of mutants could be induced by gamma radiation and applied usefully.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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