• Journal of Dairy Science and Biotechnology
• /
• 제25권2호
• /
• pp.11-16
• /
• 2007

The nomenclature of genetic variants of casein which is major protein in milk have had a lot of confusion, but now have established. Genetic variants of ${\alpha}_{s1}-CN,\;{\alpha}_{s2}-CN,\;{\beta}-CN,\;{\kappa}-CN$ have reported 8 variants(A, B, C, D, E, F, G, H), 4 variants(A, B, C, D), 13 variants ($A_1,\;A_2,\;A_3,\;A_4$, B, C, D, E, F, G, $H_1,\;H_2$, I), 11 variants(A, B, C, E, $F_1,\;F_2,\;G_1,\;G_2$, H, I, J), respectively. Their data detailed have introduced in several web sites including www.uniprot.org. The studies on genetic variants of casein from Korean native cattle have been reported only ${\beta}-casein\;A_4$ but still not established the protein sequence. The classification and distinct nomenclature of genetic variants of bovine casein were required because the development of milk science and technology have been focused in the region that have to studied biochemically such as functional foods, EMC and GMO et al.

• 약학회지
• /
• 제45권3호
• /
• pp.293-301
• /
• 2001

Genetically modified organism (GMO) using recombinant DNA technique has been exponentially increased, however there are still arguments for the safety of GM foods. The objective of this research was to compare the allergens of GM soybean(Roundup Ready$^{TM}$) with conventional soybeans. Each soybean extracts were prepared as crude extracts, heated extracts, and as heated and simulated gastric quid (SGF)-digested samples to characterize the stability of allergens to physicochemical treatment. Positive sera from 20 soybean-sensitive patients and control sera from 5 normal subjects were used to identify the endogenous allergens in soybeans. Specific-IgE binding activities to each soybean preparations were evaluated by ELISA and immunoblot technique. In ELISA result, IgE binding activities of positive sera to soy crude extracts generally showed two fold higher mean value than those of control sera, how-ever there was no significant difference between GM soybean and natural soybean varieties. Extracted proteins form each of the soybean preparations were separated with SDS-PAGE. The band pattern of GM soybean was very similar to those of natural soybean varieties. Immunoblots for the different soybeans revealed no differences in IgE-binding protein patterns, moreover, disclosed five prominent IgE-binding bands (75, 70, 50, 44 and 34 kDa) in crude extracts, four (75, 70, 44 and 34 kDa) in heated preparations, one (50 kDa) in heated and SGF-digested preparations. These IgE binding bands were consistent with previously reported results on the soybean. These results indicate that GM soybean (Roundup Ready$^{TM}$) is no different from natural soybean in terms of its allergen.gen.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제48권1호
• /
• pp.77-81
• /
• 2005

GM 콩으로 제조된 두부와 비지 등 콩 가공제품들의 효율적인 모니터링을 위하여 GM 콩이 0%, 1%, 3%, 5%, 100% 함유된 두부와 비지를 제조하여 이들의 삽입유전자인 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase(epsps)를 검출하기 위한 PCR 방법과 EPSPS 발현 단백질 검출을 위한 western blotting과 lateral flow strip을 사용하여 검출 감도를 비교하였다. PCR 결과 산물의 크기가 큰 600 bp의 증폭에서 두부의 경우에는 100% GM으로 제조된 두부에서만 확인이 가능하였고, 비지에서는 5%, 100%에서 확인이 되었다. 크기가 작은 123 bp가 생성되는 실험에서는 0%를 제외한 모든 두부와 비지에서 검출되었다. Western blot 결과는 100% 두부, 비지에서만 검출이 되었고, lateral flow strip test에서는 100% 비지에서만 검출되었다. 이러한 결과로부터 GM 콩 가공식품 검출은 면역학적 방법보다는 PCR이 더 높은 민감도가 나타내는 것을 확인하였고, 또한 가공식품에서 효율적인 GMO 검출을 위해서는 100 bp 정도의 작은 크기의 PCR 산물을 이용해야 민감한 검출 결과를 보여주는 것을 확인하였다.

• 한국식품위생안전성학회지
• /
• 제33권3호
• /
• pp.193-199
• /
• 2018

본 연구에서는 유전자 변형 옥수수(GM 옥수수)에 특이한 단크론성 항체를 개발하고 이에 대한 특성을 확인하는 연구를 수행하고자 하였다. 먼저 형질전환 대장균으로부터 PAT 단백질을 발현시킬 수 있는 시스템을 확립하였고, 재조합 PAT 단백질을 대량 생산하여 항원으로 사용하였다. 준비된 항원을 면역한 결과 재조합 PAT 단백질의 항원성은 매우 높은 것으로 확인되었으며, 세포융합과 클로닝을 통해 12 종의 hybridoma를 확립하였고 western blot 결과 10 종의 hybridoma가 재조합 PAT 단백질과 강한 반응성을 나타내었다. 10종의 hybridoma가 생산하는 항체가 실제 GM 옥수수에 반응하는지를 추가의 western blot으로 분석한 결과 2종의 단크론성 항체(PATmAb-7 and PATmAb-12)가 재조합 PAT 단백질뿐만 아니라 실제 GM 옥수수 중 PAT와 반응하는 것으로 확인되었다. 항체를 대량 생산하고 정제한 후 2종의 항체는 SDS-PAGE 상에서 대표적인 항체의 분리패턴(heavy와 light chain)을 나타내었고, 전형적인 $IgG_1$과 ${\kappa}$ type으로 확인되었다. 정제된 단크론성 항체는 특성을 조사한 결과 다른 GMO에서 발현될 수 있는 재조합 단백질과 non-GM 옥수수 추출물에는 반응성이 없고 PAT 단백질에만 특이적으로 반응하는 것을 확인할 수 있었다. PATmAb-7 를 이용한 간접효소면역분석법의 검출한계는 0.3 ng/mL 수준으로 기준의 유전자변형 콩 면역분석법과 비교했을 때 높은 민감도를 나타내었다. 이상의 결과로 볼 때 개발된 2종의 항체(PATmAb-7 and PATmAb-12)는 GM 옥수수에서 발현되는 PAT 단백질에 특이적으로 반응하는 항체로 확인되었고, 2종의 항체를 이용한 면역분석법과 바이오센서의 개발 가능성을 제시할 수 있었다.