Fusobacterium animalis (예전에 Fusobacterium nucleatum subsp. animalis으로 알려짐)는 그람 음성이면서, 혐기성 및 선형의 세균이다. F. animalis는 사람 구강 내 정상 세균총의 하나이며 치주질환원인균이라 여겨지고 있다. F. animalis KCOM 1280 (= ChDC F318) 균주는 사람 치주질환 병소에서 분리되었다. 본 논문에서 F. animalis KCOM 1280 균주 유전체 염기서열을 해독하여 보고하고자 한다.
최근 Fusobacterium nucleatum subsp. vincentii는 average nucleotide identity 및 genome-to-genome distance 분석법에 의해 Fusobacterium vincentii로 재분류 되었다. F. vincentii는 그람 음성이면서, 혐기성 및 가는 섬유 모양의 세균이다. F. vincentii는 사람의 구강 내 정상세균총의 하나이고, 치주질환에 중요한 역할을 한다. F. vincentii KCOM 2931 균주가 사람 치주염 병소에서 분리되었다. F. vincentii KCOM 2931 균주 유전체 염기서열을 해독하여 보고한다.
최근 Fusobacterium nucleatum subsp. polymorphum는 average nucleotide identity 및 genome-to-genome distance 분석법에 의해 Fusobacterium polymorphum로 재분류 되었다. F. polymorphum 그람 음성이면서, 혐기성 및 가는 섬유 모양의 세균이다. F. polymorphum은 사람의 구강 내 정상세균총의 하나이고, 치주질환의 원인 인자이다. F. polymorphum KCOM 1001 (= ChDC F119) 균주가 사람 치은염 병소의 치은연하치면세균막에서 분리되었다. F. polymorphum KCOM 1001 균주 유전체 염기서열을 해독하여 보고한다.
구취를 일으키는 구강 내 혐기성 세균 일종인 Fusobacterium nucleatum은 유황 성분이 함유된 배지에서 $H_2S$와 같은 휘발성 유황화합물을 생성하고 철 성분과 결합하면 FeS를 형성한다. 구강내 여러 인자에 의하여 Fusobacterium nucleatum에 의하여 생성되는 유황화합물 농도가 달라진다. 본 연구에서는 Fusobacterium nucleatum의 유황화합물 생성시 영양 물질과 pH의 영향을 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 배지에 sodium thiosulfate가 1.0% 되도록 첨가하면 배지의 흡광도는 $0.817{\pm}0.032$로, L-cysteine hydrochloride를 0.05% 되도록 첨가하면 $1.297{\pm}0.024$가 되었다. 2. 배지에 자일리톨을 첨가하면 배지의 흡광도는 $0.799{\pm}0.032$인데 반하여 포도당과 병합으로 첨가하면 $1.775{\pm}0.003$으로, 과당과 병합으로 첨가하면 $1.648{\pm}0.022$로 증가하였다. 3. 배지의 pH가 5.5 이상이면 휘발성 유황화합물 농도는 20,000 ppb이상이었다. 배지의 흡광도는 배지 내 L-cysteine hydrochloride 농도가 높을수록 높았으며, 배지의 pH가 산성으로 갈수록 낮았다. 4. 배지 위에 증류수나 식염수가 있을 때, 그리고 그 양이 적을수록 휘발성 유황화합물 농도는 높았다. 이상의 결과를 종합하면 Fusobacterium nucleatum에 의한 유황화합물 생성 이 자일리톨과 산에 의하여 억제되었다.
Fusobacterium nucleatum는 그람 음성이면서, 절대 혐기성 및 막대 또는 가는 섬유 모양의 세균이다. F. nucleatum는 사람의 구강 내 정상세균총의 하나이고, 치주질환의 원인인자이면서 다양한 전신질환과도 연관성이 있다. F. nucleatum KCOM 1323 (= ChDC F317) 균주가 사람 치주질환 병소의 치은연하치면세균막에서 분리되었다. F. nucleatum KCOM 1323 균주 유전체 염기서열을 해독하여 보고한다.
본 연구는 Balb/c mice를 이용하여 Porphyromonas gingivalis 381(Pg)로 면역하기 전에 Fusobacterium nucleatum ATCC 10953(Fn)로 면역한 Group 1(N=10)과 Pg 로만 단독 면역을 시행한 Group 2(N=10)로부터 채취한 혈청의 Pg에 대한 식균능력을 비교하는 데 그 목적이 있다. 면역 후 혈청항체는 Pg에 대해 현저히 상승하였으나, 두 그룹간의 평균 항체역가는 통계적으로 차이가 없었다. 식균능력을 비교한 결과, Pg로만 단독 면역한 경우 식균능력이 Fn으로 먼저 면역한 Group 1의 경우보다 현저히 높았으며, 혈청항체역가와 식균지수와는 긴밀한 상관관계를 보였다. 결론적으로 치주세균의 사전 감염은 후속적인 세균감염에 대한 숙주 면역기능(식균능력)에 교란을 가져 올 수 있다.
There are normal inhabitants doing medically useful functions in the body. There are many kinds of bacteria performing specific functions in the oral cavity. Two strains of lactic acid bacteria were isolated from normal inhabitants of children 's oral cavity, which inhibited the the production of halitosis by anaerobic bacteria. The authors identified the isolates by the lest using API 50 CHL medium kit. 1. Two isolates were Gram-positive bacilli and produced hydrogen peroxide. 2. The optical density was 1.286 in the supernatant of Fusobacterium nucleatum after vortexing for 30 minutes, whereas in the supernatant of combined Fusobacterium nucleatum and each isolate, they were reduced to 0.628 and 0.497, which the percentages of coaggregation between them were 29.4% and 57.8%, respectively. 3. The optical density of Fusobacterium nucleatum precipitate was 1.794 in the culture media containing cysteine and $FeSO_4$, being reduced to 1.144 and 0.915 in the coaggregated precipitates of Fusobacterium nucleatum and each isolate. 4. The optical density of Porphyromonas gingivalis precipitate was 1.932 in the culture media, being reduced to 1.170 and 1.266 in the coaggregated precipitates of Porphyromonas gingivalis and each isolate. 5. When two isolates were tested with API 50 CHL medium kit, those were identified as Lactobaciallius salivarius and Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis.
This study aimed to develop strain-specific polymerase chain reaction (PCR) primers to detect Fusobacterium hwasookii KCOM 1249T, F. hwasookii KCOM 1253, F. hwasookii KCOM 1256, F. hwasookii KCOM 1258, and F. hwasookii KCOM 1268 on the basis of nucleotide sequences of a gene specific to each strain. The unique genes for each F. hwasookii strain were determined on the basis of their genome sequences using Roary. The strain-specific PCR primers based on each strain-specific gene were designed using PrimerSelect. The specificity of each PCR primer was determined using the genomic DNA of the 5 F. hwasookii strains and 25 strains of oral bacterial species. The detection limit and sensitivity of each strain-specific PCR primer pair were determined using the genomic DNA of each target strain. The results showed that the strain-specific PCR primers correspond to F. hwasookii KCOM 1249T, F. hwasookii KCOM 1253, F. hwasookii KCOM 1258, F. hwasookii KCOM 1256/F. nucleatum subsp. polymorphum KCOM 1260, or F. hwasookii KCOM 1268/Fusobacterium sp. oral taxon 203 were developed. The detection limits of these strain-specific PCR primers ranged from 0.2 to 2 ng of genomic DNA for each target strain. The results suggest that these strain-specific PCR primers are valuable in quality control for detecting specific F. hwasookii strains.
The GroEL heat-shock protein from Fusobacterium nucleatum, a periodontopathogen, activates risk factors for atherosclerosis in human microvascular endothelial cells (HMEC-1) and ApoE-/- mice. In this study, we analyzed the signaling pathways by which F. nucleatum GroEL induces the proinflammatory factors in HMEC-1 cells known to be risk factors associated with the development of atherosclerosis and identified the cellular receptor used by GroEL. The MAPK and NF-${\kappa}B$ signaling pathways were found to be activated by GroEL to induce the expression of interleukin-8 (IL-8), monocyte chemoattractant protein 1 (MCP-1), intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1), E-selectin, and tissue factor (TF). These effects were inhibited by a TLR4 knockdown. Our results thus indicate that TLR4 is a key receptor that mediates the interaction of F. nucleatum GroEL with HMEC-1 cells and subsequently induces an inflammatory response via the MAPK and NF-${\kappa}B$ pathways.
This study was designed to examine the specificities of the designed primers for F. nucleatum and F. necrophorum and to compare the PCR results using clinical samples with those of the anaerobic culture method. F. nucleatum and F. necrophorum spp. are frequently isolated in infected root canals, and they are related to periapical diseases. F. nucleatum(VPI 10197) and F. necrophorum(ATCC 25286) were used as references for PCR reaction, and thirty five teeth with one canal and periapical lesion were used. The samples were cultured anaerobically and identified using Rapid ID 32A(BioMerieux Vitek, Inc., France) as biochemical battery. In the GenBank database, species-specific PCR primers(nuc1/nuc2 primers for F. nucleatum and nec1/nec2 primers for F. necrophorum) were designed from the 16S ribosomal DNA(rDNA) sequences of F. nucleatum(accession number M58683) and F. necrophorum(accession number AF044948). PCR procedures of F. nucleatum(VPI 10197) and F. necrophorum (ATCC 25286) were simulated on a computer software. Amplify(v.1.2${\beta}$ for Macintosh). 820 bps and 817 bps of nucleotides were expected, respectively. Using extracted DNAs with QiaAmp tissue kit(Qiagen co., Germany), PCR was done. The results were as follows : 1. The nuc1/nuc2 primers produced an amplicon of 820 bps and the nec1/nec2 primers produced an amplicon of 817 bps. 2. The nuc1/nuc2 primers and the nec1/nec2 primers were specific and did not react with species other than the designated ones(i.e. nuc1/nuc2 primers did not produce amplicons for F. necrophorum, and vice versa.). And the PCR products of Porphyromonas endodontalis(ATCC 35406), Porphyromonas gingivalis(ATCC 33277), Prevotella intermedia(ATCC 25611), and Prevotella nigrescens(ATCC 33563), frequently isolated in infected root canals and periapical lesions, were not amplified by the primers specific for Fusobacterium nucleatum and Fusobacterium necrophorum. 3. This method utilizing PCR could detect F. nucleatum and F. necrophorum in clinical samples, while anaerobic culture method could detect neither.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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