Park, Kwon-Sam;Lee, Soo-Jae;Chung, Yong-Hyun;Iida, Tetsuya;Honda, Takeshi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권11호
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pp.1456-1463
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2009
Vibrio parahaemolyticus possessing urease-positive property is relatively rare, but such strains consistently exhibit the TDH-related hemolysin (TRH) gene. In this study, we examined the effects of incubation temperature on urease activity expression, using the TH3996 and AQ4673 strains where the enzyme activity is known to be temperature-dependent and -independent, respectively. In the TH3996 strain, $\beta$-galactosidase activity was 4.4-fold lower after $30^{\circ}C$ cultivation than after $37^{\circ}C$ in a ureR-lacZ fusion strain, but temperature dependency was not found in ureD- or nikA-lacZ fusion strains. However, ureR-, ureD-, and nikA-lacZ fusions of the AQ4673 strain was not influenced by incubation temperature. We compared the promoter sequences of ureR between the above two strains. Intriguingly, we detected mismatches of two nucleotides between the two strains located at positions -66 and -108 upstream of the methionine initiation codon for UreR. Additionally, urease activity was not affected by culture temperature at either $30^{\circ}C$ or $37^{\circ}C$ by allelic introduction of the AQ4673 ureR gene into the TH3996 ureR deletion mutant. Taken together, our study demonstrates that the transcriptional factor UreR is involved in the temperature dependency of urease activity, and two nucleotides within the ureR promoter region are of particular importance for the urease activity dependency of V. parahaemolyticus.
KSTAR (Korea Superconducting Tokamak Advanced Research) 전류전송계 (Current Feeder System)는 4.5 K의 저온에서 운전되는 초전도자석과 300 K의 실온에서 운전되는 전원장치 (Magnet Power Supply)를 전기적으로 연결하는 장치이다. 전류전송계는 최대 35 kA의 DC 전류가 인가되는 TF 자석용 및 350초간 20$\sim$26 ㎄의펄스 전류가 인가되는 PF 자석용으로 분리되어 있으며 리드박스 내부는 전류인입선, 초전도버스라인, 열차폐체 및 냉각라인 등이 설치되어 있다. 리드박스와 초전도버스라인 진공덕트는 KSTAR 주장치와는 별도로 진공배기 시스템이 구축되어있으며, 전체적으로 아령 형상을 하고 있는 진공공간을 효율적으로 진공배기하기 위하여 버스라인 덕트와 주장치 저온용기 사이에 진공 분리막 (Vacuum Separator)이 설치되어 있다. 진공배기를 위한 초벌배기계는 로터리펌프 및 부스터펌프 (Mechanical Booster Pump)로 구축되었으며 고진공 배기계는 4대의 크라이오펌프 (Cryo-pump)로 구축되었다. 진공장치 운전을 위해 PLC 기반의 로컬 제어시스템을 구축하였고 장치 안전을 위한 자체 인터록과 중앙인터록 시스템 및 중앙제어연계시스템이 함께 구축되어 있다. 전류전송계 설치완료 후 진공배기 시운전을 통해 배기시스템의 자가진단 및 리드박스 내부에 설치되어 있는 헬륨배관의 진공누설검사를 완료하였으며, 액체질소를 사용하여 전류인입선 냉각시험을 완료하였다.
Ha, Ngoc San;Le, Vinh Tung;Goo, Nam Seo;Kim, Jae Young
International Journal of Aeronautical and Space Sciences
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제18권2호
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pp.206-214
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2017
In this study, measurement of thermophysical properties of materials at high temperatures was performed. This experiment employed a heater device to heat the material to a high temperature. The images of the specimen surface due to thermal load at various temperatures were recorded using charge-coupled device (CCD) cameras. Afterwards, the full-field thermal deformation of the specimen was determined using the digital image correlation (DIC) method. The capability and accuracy of the proposed technique are verified by two experiments: (1) thermal deformation and strain measurement of a stainless steel specimen that was heated to $590^{\circ}C$ and (2) thermal expansion and thermal contraction measurements of specimen in the process of heating and cooling. This research focused on two goals: first, obtaining the temperature dependence of the coefficient of thermal expansion, which can be used as data input for finite element simulation; and second, investigating the capability of the DIC method in measuring full-field thermal deformation and strain. The results of the measured coefficient of thermal expansion were close to the values available in the handbook. The measurement results were in good agreement with finite element method simulation results. The results reveal that DIC is an effective and accurate technique for measuring full-field high-temperature thermal strain in engineering fields such as aerospace engineering.
Elastin-like polypeptides (ELPs) undergo a reversible inverse phase transition upon a change in temperature. This thermally triggered phase transition allows for a simple and rapid means of purifying a fusion protein. Recovery of ELPs-tagged fusion protein was easily achieved by aggregation, triggered either by raising temperature or by adding salt. In this study, levansucrase has been used as a model enzyme in the development of a simple one-step purification method using ELPs. The levansucrase gene cloned from Pseudomonas aurantiaca S-4380 was tagged with various sizes of ELPs to functionally express and optimize the purification of levansucrase. One of two ELPs, ELP[V-20] or ELP[V-40], was fused at the C-terminus of the levansucrase gene. A levansucrase-ELP fusion protein was expressed in Escherichia coli $DH5{\alpha}$ at $37^{\circ}C$ for 18 h. The molecular masses of levansucrase-ELP[V-20] and levansucrase-ELP[V-40] were determined as 56 kDa and 65 kDa, respectively. The phase transition of levansucrase-ELP[V-20] occurred at $20^{\circ}C$ in 50 mM Tris-Cl (pH 8) buffer with 3 M NaCl added, whereas the phase transition temperature ($T_t$) of levansucrase-ELP[V-40] was $17^{\circ}C$ with 2 M NaCl. Levansucrase was successfully purified using the phase transition characteristics of ELPs, with a recovery yield of higher than 80%, as verified by SDS-PAGE. The specific activity was measured spectrophotometrically to be 173 U/mg and 171 U/mg for levansucrase-ELP[V-20] and levansucrase-ELP[V-40], respectively, implying that the ELP-tagging system provides an efficient one-step separation method for protein purification.
In this paper, a three-dimensional hydrogen desorption model is applied to a thin double-layered annulus ZrCo hydride bed and validated against the temperature evolution data measured by Kang et al. The present model reasonably captures the bed temperature evolution behavior and the 90% hydrogen discharging time. In addition, the performance of thin double-layered annulus bed is evaluated by comparing with a simple cylindrical bed using hydrogen desorption model. This study provides multi-dimensional contours such as temperature and H/M atomic ratio in the metal hydride region. This numerical study provides fundamental understanding during hydrogen desorption process and indicates that efficient design of the metal hydride bed is critical to achieve rapid hydrogen discharging performance. The present three-dimensional hydrogen desorption model is a useful tool for the optimization of bed design and operating conditions.
Hong, In-Seok;Lee, Hwa-Ryun;Trinh, Tu Anh;Cho, Yong-Sub
Nuclear Engineering and Technology
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제41권5호
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pp.709-714
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2009
An ion implanter, which can serve as a metal-ion supply, has been constructed and performance tested. Copper ions are generated and extracted from a Bernas ion source with a heating crucible that provides feed gases to sustain the plasma. Sable arc plasmas can be sustained in the ion source for a crucible temperature in excess of $350^{\circ}C$. Stable extraction of the ions is possible for arc Currents less than 0.3 A. Arc currents increase with the induced power of a block cathode and the transverse field in the ion source. $Cu^+$ ions in the extracted beam are separated using a dipole magnet. A $20{\mu}A$$Cu^+$ ion current can be extracted with a 0.2 A arc current. The ion current can support a dose of $10^{16}ions/cm^2$ over an area of $15\;cm^2$ within a few hours.
In order to evaluate the cryogenic fracture characteristics of structural steels for superconducting magnets of fusion reactor, small punch (SP) testing was performed on austenitic stainless steel (JN1 base metal) and its TIG weldments at 293K, 77K and 4K. The mechanical properties with respect to the extracted location of the weld metal, on the effects of welding heat cycle about base metal near fusion line in TIG weldments were investigated. The mechanical property of the weld metal in TIG weldments depends on distance from welding root, root region of weldments having the lowest mechanical property. The base metal near fusion line showed degradation of mechanical property caused by cyclic heating during the TIG welding. Based on the test results, HAZ was found to be up to 5mm from the fusion line. It is shown that SP testing is a useful tool to evaluate the mechanical properties with respect to the microstructures changes such as HAZ as well as weld metal in TIG weldments at cryogenic temperature.
.betha.-galactosidase activity of Escherichia coli cells containing operon fusion nhaA'-'lacZ was monitored to study the regulation of expression of nhaA gene under various conditions. The expression of the fusion was enhanced only by chemicals containing Na$^{+}$ or Li$^{+}$. This Na$^{+}$ or Li$^{+}$. This Na$^{+}$(Li$^{+}$)-specific enhancement of .betha.-galactosidase activity represented the increase in the rate of synthesis of .betha.-galactosidase rather than the decrease in the breakdown rate. The induction pattern was influenced by copy numbers of the gene. Induction by Na$^{+}$ or Li$^{+}$ was concentration and time dependent, reaching maximum 5-6 fold induction after 2 hours at 0.4-0.5 M for Na$^{+}$ or at 0.25-0.35 M for Li$^{+}$, Although the expression was induced at much lower concentration of Na$^{+}$ at alkaline pH values than at neutral pH in the presence of Na$^{+}$, alkaline pH itself did ot induced the expression of the fusion in the absence of Na$^{+}$. Temperature shift and growth phase of culture did not affect the level of induction.he level of induction.
Park, Dae-Wook;Kim, Sang-Soo;Nam, Min-Kyung;Kim, Goo-Young;Kim, Jung-Ho;Rhim, Hyang-Shuk
BMB Reports
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제44권4호
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pp.279-284
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2011
The glutathione S-transferase (GST) system is useful for increasing protein solubility and purifying soluble GST fusion proteins. However, purifying half of the GST fusion proteins is still difficult, because they are virtually insoluble under non-denaturing conditions. To optimize a simple and rapid purification condition for GST-pyruvate kinase muscle 2 (GST-PKM2) protein, we used 1% sarkosyl for lysis and a 1 : 200 ratio of sarkosyl to Triton X-100 (S-T) for purification. We purified the GST-PKM2 protein with a high yield, approximately 5 mg/L culture, which was 33 times higher than that prepared using a conventional method. Notably, the GST-high-temperature requirement A2 (GST-HtrA2) protein, used as a model protein for functional activity, fully maintained its proteolytic activity, even when purified under our S-T condition. This method may be useful to apply to other biologically important proteins that become highly insoluble in the prokaryotic expression system.
The current establishment of city gas piping polyethylene (PE) tube used as bonding state or part of the health or safety of fusion is very important. A part of these fusion methods to determine the soundness of the short-term trials and long-term tests can be largely classified. Typical tests include short-term strength, tensile strength, impact strength, compressive strength, resiliency and compression. Polyethylene (PE) pipes installed in the domestic terms of overall penetration rate of 45% has been used. However, polyethylene (PE) pipes have reliability problems, and these occurs mostly in part by defective welding. Therefore, the test is necessary for safety. Non-destructive methods (ultrasonic testing) are difficult to be used. Therefore, Polypropylene copolymer (PP-C), polypropylene homopolymer (PP-H), and polyethylene (PE) pipe are used. Fusion of these materials is necessary in these field however, its technical, and basic research has not been studied well. In this research, short-term strength of welding parts, its tensile strength, hardness, fatigue, and microstructure have been analyzed to find the optimum process conditions to improve mechanical properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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