Watermelon plants grafted with the root-stock of wild-cucumber (Sicyos angulatus) were not infected by Fusarium oxysporum f.sp. niveum in pot inoculation and infected fields tests. Controlling efficacy of the root-stock grafting with S. angulatus on Fusarium wilt of watermelon was more excellent than that of the root-stock grafting with Lagenaria siceraria. The isolates of Fusarium oxysprum from cucurbitaceae plants had a certain host-specific pathogenicity, but they did not express the absolute one forma specialis-one host-plant phenomenon by the root dipping inoculation. The pathogenic isolates of Fusarium oxysproum from cucurbitaceae crops did not infect the root-stock plant such as S. angulatus, L. siceraria and Cucurbita ficifolia. The fast-wilting of watermelon caused by uncertain agents was observed in watermelon plant grafted with L. siceraria in the continuously cropping fields, but it was not observed in watermelon plants grafted with S. angulatus in the same fields.
Randomly chosen recombinant clones of Fusarium oxysporum were analysed to select useful probes for relatedness analysis of Fusarium oxysporum. Genomic DNA of F. oxysproum f. sp. cubense, digested with HindIII, was ligated to pUC118 and used to transform Escherichia coli strai DH5$\alpha$. Three clones were identified that hybridized to mutiple restriction fragments of some formae speciales of F. oxysporum. These probes detected repetitive sequences in HindIII or EcoRI digested DNAs. Repeated copy clone pFC46, pFC52 and pFC54 showed evident polymorphisms among ten formae speciales of this fungus. Since clone pFC 52 strongly hybridized to multiple EcoRI-digested restriction fragments of f. sp. cubense, it may be useful as a probe for analysis of other genetic characteristics of this forma specialis. The results suggest that our clones might be very useful as probes for relatedness analysis between or within formae speciales of Fusarium oxysporum.
병원성 Fusarium에 의한 아스파라거스 감염은 비병원성 Fusarium을 5일과 7일 전에 접종하였을 때 방제효과가 있었다. 비병원성 F. oxysporum은 F. moniliforme에 대하여 방제효과가 있었고, F. solani는 F. oxysproum에 대하여 방제효과가 있음이 밝혀졌다. 실험에 사용된 Fusarium 균들은 모두 주근과 측근의 말단 부위, 상처부위, 그리고 표피의 세포벽 사이를 통하여 감염하였다. 경우에 따라 감염하는 동안 appressorium과 유사한 구조를 형성하기도 하였고, 직접 감염하는 경우도 있었다. 병원성 그리고 비병원성 Fusarium 균 모두 공통적으로 생장점 부위를 통하여 감염하였다. 병원성이 강한 Fusarium 균의 경우 비병원성 균들보다 감염의 속도가 빨랐고 더욱 생장이 왕성하였다. F. solani는 생장속도나 기주 조직 침입속도가 매우 느렸다. 기주 감염의 결과 처음에는 cortical rot을 유발시켰고 나중에는 tracheary elements를 감염하고 결국은 조직의 괴사를 유발하는 것이 관찰되었다. 비병원성 F. oxysporum은 표피조직에 두터운 균사층을 형성하였고, 이는 병원성 Fusarium 균에 대한 방제효과를 나타내는 원인을 제공한 것으로 여겨진다. F. solani는 측근의 생성을 촉진시켜 표면적을 증대시킨 것으로 여겨진다. 결론적으로 AVFO와 F. solani를 이용하여 아스파라거스에 발생하는 병원성 Fusarium균의 침입을 저지할 수 있는 생물적 방제가 가능함이 밝혀졌다.
Fusarium oxysporum은 하나의 종내에 많은 formae speciales(분화종)과 races 등이 분화되어 있다. 그 중에서 10균주에 대하여 균사 내에서의 영양핵의 분열상을 찾아 Giemsa staining 용액으로 염색하여 그들의 염색체 수를 비교 관찰하였다. 균주에 따라 염색체 수에 차이가 있었으며 2균주(F. oxysporum f. sp. lycoperici, F. oxysporum Kangnung D2)는 n=4, 2균주(F. oxysporum S Sachun 3, F. oxysporum S Kohung 2)는 n=5, 5균주(F. oxysporum S Kohung 3, F. oxysporum CS Hongchun D16, F. oxysporum S Bosung 5, F. oxysporum S Sunchun 4, F. oxysporum S Haenam 4)는 n= 7개를 관찰할 수 있었고 Australia의 Sydney 대학에서 분양받은 F. oxysporum 14-39는 n=8개로 전체로 보아 4-8개의 염색체를 관찰할 수 있었다. 본인의 앞서 본문의 결과와 종합하여 고찰할 때 F. oxysporum의 기본염색체 수는 반수체가 4개로 추론되며 여기에서부터 여러가지 요인으로 인하여 diploidy, aneuploidy가 되어 다양한 염색체 수를 가진 것으로 사료된다.
여러 식물의 근권에서 세균 균주들을 분리하여 이들의 항진균성 물질 생성능을 조사하였다. 분리균주 중 Fusarium oxysproum을 포함한 5가지 주요 식물병원성 진균에 대한 생장저해가 우수한 7개 균주를 16S rRNA 유전자 염기서열로 동정하였다. 이들 중 Paenibacillus peoriae RhAn32, Pseudomonas otitidis TK1과 Bacillus cereus TK2가 가장 넓은 생장 저해범위를 나타내었으며 항진균성 물질 중 siderophore 생성능은 P. otitidis TK1이 3.21 mM/ml로 가장 높았고 HCN은 Pseudomonas koreensis Rh2와 Rh7 균주만이 생성하였으며 Brevibacterium frigoritolerans EnA9와 P. peoriae RhAn32는 각각 1558.9와 $1436.7{\mu}M$ glucose/min/mg protein의 높은 chitinase 활성을 나타내었다. P. otitidis TK1과 P. peoriae RhAn32의 항진균능을 진균과의 공동배양을 통해 정량분석한 결과 세 종류의 Fusarium oxysproum의 생장을 유의성 있게 저해하였다. P. otitidis TK1은 식물생장을 촉진하는 호르몬인 auxin의 생성능도 가장 높았는데 이 균주를 4주 자란 토마토 유묘에 F. oxysporum f. sp. lycopersici와 동시에 접종하여 8주간 재배하였을 때 줄기와 뿌리 길이 및 습윤 중량이 비접종 대조군에 비해 각각 45.7, 64.9와 118%로 유의성 있게 증가하였다. 따라서 이 균주들은 유기합성농약을 대체하면서 식물생장을 촉진하는 미생물제로서의 적용이 가능할 것으로 기대된다.
An antimicrobial chitinase was purified from grapefruit extract and its properties were characterized. The chitinase was purified with a single step chromatography on regenerated chitin affinity gel column. The molecular weight of the purified chitinase was 29 kDa. The grapefruit extract contained the chitinase protein more than 50% of its total soluble proteins measured by coomassie stained protein bands. When the purified chitinase was incubated with polymers of N-acetylglucosamine (NAG), such as mycelia of Fusarium oxysproum and swollen chitin, they were degraded to oligosaccharides, and the oligosaccharides were then further hydrolyzed by the same enzyme to monomer and dimer of NAG. This result suggests that the chitinase contained both endo- and exo- chitinase activities. The chitinase was stable to heat and pH treatment; its activity was not diminished by the heat treatment upto 7$0^{\circ}C$ for 1 hr, and it showed a pH stability in the range of pH 4.0 to 12.0.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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