Escherichia coli O157:H7 and Salmonella ser. typhimurium are pathogens involved in food poisoning in numerous countries. This study aimed to obtain knowleges on the survival of E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typhimurium ATCC 14028 in fermentedmilk products which were on sale in Suwon Yakult supplier. To the final concentration of 103~104 cfu/$m\ell$ of E. coli O157:H7 KSC 109 or S. wer. typhimurium ATCC 14028 in the fermented milks, Metchnikoff, Ace, Yakult, Mastoni and Super 100 were inoculated with these pathogens and then were stored at 4$^{\circ}C$ and viable cells of these pathogens were periodically counted. The results showed that the survival of two pathogens differed in the different types of fermented milks tested. Number of suriviving E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typimurium ATCC 14028 cells (initial inoculum, 103~104 cfu/$m\ell$) were decreased to 101, 102 cfu/$m\ell$ in Ace after 100 hours, and were decreased gradually to 101 cfu/$m\ell$ in Yakult after 250 hours. In the other fermented milks, viable cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased but those of S. ser. typhimurium ATCC 14028 was decreased gradually to 102 (Mastoni), and to 101 cfu/$m\ell$ (Super 100) after 250 hours. It appeared that S. ser. typhimurium ATCC 14028 was more susceptible than E. coli O157:H7 KSC 109 at low pH. Vibale cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased in most of fermented milks tested except Ace and Yakult, but in general, S. ser. typhimurium ATCC 14028 was drastically decreased in most of the fermented milks. The major ingibition factor against these pathogens in the fermented milks during storage at 4$^{\circ}C$ appeared to be the acidity and the metabolites produced by the starters bacteria used in fermented milk products.
본 논문에서는 E. coli O157:H7, S. Typhimurium, S. aureus와 B. cereus에 대한 ddPCR의 검출 효율과 검출한계를 측정하였으며 동시 검출을 위한 multiplex 검출 가능성을 타진하였다. ddPCR은 PCR mix를 포함한 시료를 15,000-20,000개의 droplet으로 분할하여 PCR 하는 방법으로 droplet reader를 이용하여 droplet의 형광 신호를 계수하였다. 식중독 세균의 표적 DNA를 검출하기 위해 2가지 색의 형광 probe (TaqMan)를 제작하였다. ddPCR은 표적 유전자의 형광 신호를 $100fg/{\mu}L$부터 $10ng/{\mu}L$까지의 DNA를 검출 할 수 있었다. 이후에 두 종류의 식중독 세균에서 프라이머 농도를 달리하여 표적 DNA 증폭 크기의 분포가 서로 다르게 구별할 수 있음을 확인하여 multiplex PCR의 가능성이 있음을 알 수 있었다. ddPCR은 비교적 낮은 검출한계를 가지기 때문에 식품에 적은 농도로 존재하는 식중독 세균의 검출에 활용이 가능할 것으로 생각되었다. 또한 식품의 전처리 조건 확립과 반응조건 확립을 통하여 향후 복잡한 matrix effect를 가지는 식품에서 극 미량의 균 검출도 가능할 것으로 생각되었다.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 금은화를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 금은화를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methanol를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균(Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Salmonella paratyphimurium, Shigella flexneri, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 금은화 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 금은화의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Shigella dysenteriae가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 금은화의 ethyl acetate 추출물과 인진쑥의 ethyl acetate 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과, 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 금은화의 ethyl acetate 추출물이 식중독 유발세균의 성자에 미치는 효과를 검정하기 위해 Staphylococcus epidermidis 및 Shigella dysenteriae의 배양액에 금은화의 ethyl acetate 추출물을 각각 3,000ppm 농도로 첨가했을 시, Staphylococcus epidermidis의 생육이 12시간까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Shigella dysenteriae의 생육도 12시간까지 지연시킬 수 있었다. 이상의 결과 금은화의 ethyl acetate 추출물은 Staphylococcus epidermidis와 Shigella dysenteriae의 성장을 억제시킴을 알 수 있었다.
Trifoliate orange seed extracts (TSEs) were prepared from different solvents, water (TW), ethanol (TE), and n-hexane (TH), and assessed for their antimicrobial activities against six gram-negative food-borne pathogens (Escherichia coli KCTC 1039, Escherichia coli O157:H7 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 3311, Salmonella Typhimurium KCCM 11862, Shigella sonnei KCTC 2518, and Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802). Among the tested TSEs, TE and TH showed a slight inhibition activity on V. parahaemolyticus ATCC 17802, but a good growth inhibition activity on Sal. Typhimurium KCCM 11862. TH and TE showed steady growth inhibition activity with increasing growth time after 6 hr when compared to the control (p<0.05). From these results, we confirmed the possibility of TH and TE as antimicrobial materials.
In this study, Perilla frutescens wh~ch has been used as a folk remedy was investigated its antimicrobial activity. First, the Perilla frutescens was extracted with methanol at room temperatures, and fractionation of the methanol extracts from Perilla frutescens was carried out by using petroleum ether, chloroform, and ethyl acetate, respectively. The antimicrobial activity. of the. Perilla frutescens extracts was determined using a paper disc method and the growth inhibition curve was determined using methanol extracts of Perilla frutescens against Salmonella enteritidis and Bacillus cereus. The methanol extract of Perilla frutescens showed strong antimicrobial activity against Bacillus cereus at the concentration of 1.000 ppm. The 4,000 ppm of methanol extract from Perilla frutescens. retarded the growth of S. enteritidis and Bacillus cereus up to 72 hours.
예측식품미생물학(PFM)은 1980년대 후반 이후 식품미생물학 분야에서 새롭게 발생한 신학문 분야이다. PFM은 특별한 환경적 요인에 따른 미생물 특히, 병원성미생물의 반응(사멸과 생존)을 예측하기 위하여 수학적인 모델을 이용한 것이다. 현재까지 개발된 PFM모델중 완전한 것은 없지만, 어떤 특정 조건하에서는 신속하고 객관적으로 미생물의 반응을 예측하는데 이용될 수 있다는 장점 때문에, HACCP시스템, Risk Assessment 등에서 응용 가능성이 커지고 있다. 본 연구는 PFM 모델중 PMPwin5.1을 이용하여, 우유 저장에 대한 HACCP시스템 중 미생물학적 위해요소 분석, CCP 및 CL설정에 대한 방법론적 예를 제시하였다. 모델에 대한 초기조건으로 우유와 동일한 물리화학적 조건인 pH 6.7, Aw 0.993, NaCl 1.3%을 고정변수로 하고, 저장온도(4~15$^{\circ}C$)를 변이변수로 선정하여, 온도에 따른 주요 병원성미생물의 generation time, lag phase duration, infective dose에 도달하는데 걸리는 시간을 산출하였다. 이 결과를 바탕으로 온도의 변화에 따른 각 병원성미생물의 성장을 안전정도에 따라 “안전온도범위(Safe temperature zone)”, “주의온도범위(Caution temperature zone)”, “위험온도범위(Danger temperatue zone)”로 분류하였으며, 이들 분류는 우유의 유통기간인 5일을 기준으로 각 병원성미생물의 lag phase duration, infective dose에 도달하는 시간에 따라 결정하였다. 이러한 결과는 우유의 HACCP시스템에 있어, 위해요인 분석시 위해요인의 분류 및 위해요소간의 위해 정도의 우선순위 부여에 보조적인 수단으로 이용될 수 있다. 또한 유통.저장단계에서 병원성미생물의 상징에 대한 온도수준을 나타내므로, 이 단계를 CCP로 설정할 수 있고, CCP에 대한 CL은 주위온도범위내에서 설정할 수 있다. 그리고 허용수준에 대한 온도의 범위를 제시하므로 모니터링이나 검증에서도 이용할 수 있다.
시중에서 판매되는 양념갈비의 식품매개 병원성 미생물의 오염정도를 확인하였으며, 포장방법을 달리하여 포장하여 감마선 조사한 후 저장기간에 따른 갈비의 미생물 안전성 및 조사선량에 따른 소비자 기호도를 조사하였다. 식품매개 병원성 미생물의 오염은 B. cereus, S. typhimurium, E. coli 및 S. aureus는 모두 3-4 log cycle정도로 검출되어 시중에서 판매되는 갈비의 식품매개 병원성 미생물의 오염정도가 심각한 것으로 나타났다. 갈비의 조사선량에 따른 변화는 7.5 kGy로 감마선 조사할 경우 B. cereus를 제외하고 S. typhimurium 및 S. aureus는 검출되지 않았으며, E. coli는 0일째에 1.47 log cycle정도 검출되었으나 $4^{\circ}C$ 저장 중에는 검출되지 않았다. 멸균된 갈비와 양념갈비의 방사선 감수성은 B. cereus가 방사선 조사에 대한 내성이 가장 강한 균주로 나타났다. 감마선 조사에 따른 갈비의 관능 특성은 조리되지 않은 갈비의 경우 항은 비조사구가 높은 선호도를 보였으며 색은 조사구가 높은 평가를 받았다. 조리된 갈비의 경우 함기포장한 갈비는 조직감, 맛 및 전체적인 기호도에서 유의차를 나타내지 않았고, 진공포장한 시료의 경우 맛은 7.5kGy로 조사한 갈비를 제외한 0. 2.5 및 5.0kGy로 조사된 갈비는 높은 평가를 받았으며 전체적인 기호도는 0 및 2.5kGy로 조사된 갈비가 가장 높은 선호도를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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