This study was conducted to improve efficiency of a follicle culture system without reducing developmental competence of intrafollicular oocytes. Preantral follicles (100 to $125{\mu}m$ in diameter) of F1 hybrid (B6CBAF1) mice were cultured singly for 216 h in modified ${\alpha}$-MEM-glutamax medium, to which 2.5 IU/ml hCG and epidermal growth factor was added 16 h prior to the end of culture. Medium change was either performed three times (54 h interval), twice (72 h interval), once (108 h interval), or not at all (216 h interval). Maturation (progression to the metaphase II stage) of intrafollicular oocytes was detected from 4 days after culture in the three-times change treatment, while all treatments yielded mature oocytes from day 5 of culture. Compared with the three-times change, decreasing the change frequency to once did not reduce the capacity to begin maturation (germinal vesicle breakdown of 82 to 86%), to mature (78 to 79%) and to develop into blastocysts after parthenogenetic activation (29 to 32%). Morphological parameters were similar among these treatments. Except for the no medium change treatment, similar colony-forming activity of inner cell mass cells after culturing of blastocysts in leukemia inhibitory factor-containing medium was detected, while the morphology of the colony-forming cells deteriorated in the change-once treatment compared with the change twice or three-times. In conclusion, the efficiency of the preantral follicle culture system could be improved by reducing frequency of medium change up to a 72 h interval (three times in total 216 h culture) without decreasing developmental competence of oocytes.
Objectives: 1) To compare the efficacy of urofollitropin (Follimon) to that of recombinant human FSH (rhFSH) on the growth and maturation of mouse early preantral follicles in vitro, and 2) effect of vitrification on the growth and maturation of preantral follicles and oocytes . Methods: Isolated early preantra1 follicles (100-130 ${\mu}m$ diameter) were cultured for 12 days in 20 ${\mu}l$${\alpha}$-MEM media drop under the mineral oil. Follimon or rhFSH was added to the culture medium at various concentrations (0, 10, 100, and 1000 mIU/ml). Results: With Follimon, the dose of 10 mIU/ml showed the best follicle survival, growth, and MIl rate of oocyte than the other concentrations. Whereas the optimal dose of rhFSH was 100 mIU/ml. Despite the different optimal doses, the efficacy of two different FSHs on the follicle growth and maturation was similar. Isolated mouse preantral follicles were cryopreserved by vitrification and cultured in vitro for 12 days with 100 mIU/ml rhFSH. Despite the decreased follicular survival rate after thawing, the follicular growth and maturation rate of its oocyte were comparable to those of the fresh follicle. Conclusion: Results from the present study revealed that 1) the optimal doses of Follimon and rhFSH for in-vitro culture of mouse follicles are different, and 2) the frozen-thawed follicles develop normally after vitrification.
The purpose of this study was to determine the hair growth effects of lavender oil (LO) in female C57BL/6 mice. The experimental animals were divided into a normal group (N: saline), a vehicle control group (VC: jojoba oil), a positive control group (PC: 3% minoxidil), experimental group 1 (E1: 3% LO), and experimental group 2 (E2: 5% LO). Test compound solutions were topically applied to the backs of the mice ($100{\mu}L$ per application), once per day, 5 times a week, for 4 weeks. The changes in hair follicle number, dermal thickness, and hair follicle depth were observed in skin tissues stained with hematoxylin and eosin, and the number of mast cells was measured in the dermal and hypodermal layers stained with toluidine blue. PC, E1, and E2 groups showed a significantly increased number of hair follicles, deepened hair follicle depth, and thickened dermal layer, along with a significantly decreased number of mast cells compared to the N group. These results indicated that LO has a marked hair growth-promoting effect, as observed morphologically and histologically. There was no significant difference in the weight of the thymus among the groups. However, both absolute and relative weights of the spleen were significantly higher in the PC group than in the N, VC, E1, or E2 group at week 4. Thus, LO could be practically applied as a hair growth-promoting agent.
Estrus cycle of cow, season and follicldar stimulating treatment, having an effect on the number of follicle, are investigated for the oocyte recovery rate in ovum pick-up(OPU). The number of follicle aspirated and oocyte collected on the different days of estrus cycle(D 4~5, D 9~10 and D 14~15) were not significantly different among the groups. The higher number of viable oocytes were produced on Jan-May(79.0%) than Jun-Aug(33.3%) by OPU in cow. The number of follicle and aspirated oocyte in cows treated FSH or PMSG combined with bovine somatotropin(bST) were 1.2~1.5 times higher than in cows treated alone follicular stimulating hormone(FSH) or pregnant mare serum gonadotropin(PMSG). In conclusion, OPU can be repeatedly practiced 2 or 3 times in an estrus cycle. In addition, the high environmental temperature is not good for ovarian function of cow and the bST co-treatment with FSH or PMSG is increasing the number of aspiratable follicle.
여포세포에서 합성된 난황단백질이 난모세포로 이동하는 동안에 난황체가 이 두 종류의 세포사이에 형성되었다가 결국은 난황막으로 전환한다. 단계7까지는 뚜렷하게 보이던 난모세포막과 여포세포막이 소멸되고 그 자리에 전자 밀도가 높은 난황체 물질이 산만하게 축적된다. 난황체는 단계9에서 막성 구조의 일종인 linkage bridge로 둘러싸여 단계11까지는 두께가 5∼7um가 되리 만큼 성숙한다. 단계13에서 난황체는 비로소 난황막으로 전환되는데, 이때 난황막의 두께는 겨우 1 U m에 지나지 않는다. 이러한 두깨의 감소는 난황체 물질이 다량 난모세포 쪽으로 이동한 것으로 생각 되었다. coated vesicle을 포함한 다양한 종류의 과립이 난황체 양쪽에서 관찰되었는데, 난모세포쪽에 출현한 과립은 난황체 물질이 난모세포로 이동되는 구조로 해석되었고 여포 세포쪽에서 관찰된 과립은 주로 난황체의 전자밀도와 동일한 점으로보아 여포세포에서 합성되어 난황체를 형성하는 물질로 이루어진 구조로 해석되었다. As yolk proteins are transported from !he follicle cells into oocvtes, vitelline body forms and changes into a vitelline membrane between the ko celt types during the vitellogenic period. Cell membranes of oocyte and follicle cells surrounding the oocyte disappear at stage 7 and high electron-dense substance of vitelline body simultaneously accumulates sporadically between the cell types. The vitelline body becomes surrounded by linkage bridge, a membranous structure, at stage 9 and greatly increases in thickness to be 5-7 U m thick at stage 11. At stage 13 the vitelline body becomes vitelline membrane, which is now only 1 U m thick, suggesting that much of the substance of the vitelline body has been transported into oocyte. Various types of vesicles including coated vesicles were observed at both sides of th vitelline body. The vesicles occurred at the side of oocyte were interpreted to be structures transported from the vitelline body into oocyte, whereas those found at the side of the follicle cells were thought to be structures made in the follicle cells and fused into the vitelline body.
The ovaries of 178 Holstein heifers or cows (heifer; 41, 1 parity; 72, 2$\leq$ parity; 65) on Day 6 or 7 (Day 0=day of estrus) were examined by transrectal ultrasonography. Diameter of corpus luteum (CL) and large follicle ( $\geq$ 10 mm), and luteal tissue area were determined by ultrasound system with a 5 MHB rectal probe. Blood samples were taken to progesterone analysis. After selection of recipients, frozen Holstein embryos were thawed and directly transferred to recipients non-surgically. The diameter of CL and luteal tissue area was greater (P<0.01) on Day 7 than on Day 6 in heifers, 1 parity or 2 $\leq$ parity cows, respectively, although progesterone concentrations were not different. The presence of fluid-filled luteal cavitied or multiple CL (2 or more) did not affect serum progesterone concentration. A large follicles were observed in 67.4% of heifers or cows and the average diameter was 14.1 mm. Greater luteal tissue area attributed higher pregnancy in heifers, but not in cows, although there were no difference on pregnancy rate according to progesterone concentration in heifers or cows. The pregnancy rate of recipients contained a large follicle at embryo transfer was lower than that of recipients not contained. These results show ultrasonic assessment of ovaries in Holstein recipients is a reliable tool to determine the follicle and CL for recipient selection.
Objective: The aim of the present study was to investigate the relationship between ovarian follicle count and volume on ultrasonography and serum hormone levels including the levels of the anti-$M\ddot{u}llerian$ hormone (AMH) and gonadotropin in women with the polycystic ovary syndrome (PCOS). Methods: A total of 118 Korean women aged 18-35 years who were newly diagnosed with PCOS at a university hospital were included in this study. Serum LH, FSH, and AMH levels were measured in the early follicular phase, and the total antral follicle count (TFC) and the total ovarian volume (TOV) were assessed by ultrasonography. The correlations between serum hormonal parameters and ultrasonography characteristics in women with PCOS were evaluated using Pearson's correlation coefficients and a linear regression analysis. Results: Serum AMH levels were significantly correlated with serum LH levels and LH/FSH ratios, and TFC and TOV were significantly correlated with each other on ultrasonography. Serum AMH and LH levels and the LH/FSH ratio were significantly correlated with TFC. Statistically significant correlations between TOV and the LH level (r=0.208, p=0.024) and the LH/FSH ratio (r=0.237, p=0.010) were observed. However, the serum AMH level was not significantly correlated with the ovarian volume, and this result did not change after adjusting for age and body mass index. Conclusion: Serum AMH is not related to the ovarian volume in women with PCOS. My results suggest that serum LH level and the LH/FSH ratio may be more useful than the serum AMH level for representing the status of the ovarian volume in women with PCOS.
Purpose: To elucidate the effects of the irradiation and calcium-deficient diet on expression of interleukin (IL)-1 during tooth formation of rat molar. Materials and Methods: The pregnant three-week-old Spague-Dawley rats were used for the study. The control group was non-irradiation/normal diet group, and the experimental groups were irradiation/normal diet group and irradiation/calcium-deficient diet group. The abdomen of the rats on the 9th day of pregnancy were irradiated with single dose of 350 cGy, The rat pups were sacrificed on the 14th day after delivery and the maxillae tooth germs were taken. The specimen were prepared to make sections for light microscopy, and some of tissue sections were stained immunohistochemically with anti-IL-l antibody. Results: In the irradiation/normal diet group, dental follicle showed fewer blood vessels, mononuclear cells, and fusions of mononuclear cells than in non-irradiation/normal diet group. Alveolar bone showed a few osteoblasts and osteoclasts. Periodontal ligament showed collagen fibers and fibroblasts with irregularity. Weak immunoreactivity for IL-l was shown in dental follicle, alveolar bone, and periodontal ligament. In the irradiation/calcium-deficient diet group, dental follicle showed sparse cellularity. Alveolar bone showed diminished number of osteoblasts. Periodontal ligament showed irregular collagen fibers and atrophy of cementoblasts and fibroblasts. No immunoreactivity for IL-1 was shown in dental follicle, alveolar bone, and periodontal ligament. Conclusion: Irradiation and calcium-deficient diet seems to cause disturbance of the expression of interleukin-l during tooth formation of rat molar.
Golestanpour, Hossein;Javadi, Gholamreza;Sheikhha, Mohammad Hasan
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.47
no.3
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pp.207-212
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2020
Objective: Glutamate ionotropic receptor AMPA type subunit 1 (GRIA1) is a subunit of a ligand-gated ion channel that regulates the secretion of follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) by controlling the release of gonadotropin-releasing hormone. Few studies have investigated the association between the GRIA1 gene and human infertility. This study evaluated the association of the GRIA1 rs548294 C > T and rs2195450 G > A polymorphisms with the ovarian response to human menopausal gonadotropin (HMG) in Iranian women. Methods: One hundred women with histories of at least 1 year of infertility were included. On the second day of menstruation, patients were injected with HMG; on the third day, blood samples were collected. After hormonal analysis, the GRIA1 rs548294 C > T and rs2195450 G > A genotypes of samples were identified via the restriction fragment length polymorphism method, and on day 9, the number of follicles was assessed via ultrasound. Results: For the GRIA1 rs548294 C > T and rs2195450 G > A single nucleotide polymorphisms, the subjects with CT and GG genotypes, respectively, displayed the highest mean FSH level, LH level, and number of follicles on day 9 of the menstrual cycle (p< 0.05). Significant positive correlations were observed between LH and FSH (p< 0.01), LH and follicle count (p< 0.01), FSH and age (p< 0.05), follicle count and age (p= 0.048), and FSH and follicle count (p< 0.01). Conclusion: This study showed a significant relationship between GRIA1 polymorphisms and ovarian response to the induction of ovulation. Therefore, determining patients' GRIA1 genotype may be useful for improving treatment and prescribing suitable doses of ovulation-stimulating drugs.
The localization of worm antigen of Neodiplostomum seoulere was examined by immuno-electronmicroscopic observation. Not only the immunized serum of mice with crude worm extract of N. seoulene but also serum of infected mouse were reacted to the worm section. Using immunized serum as primary antibody. the gold particles were deposited on the rough endoplasmic reticulum of the cell of tribocytic organ, spermatozoa in the seminal vesicle, microvilli of the caecum and vitelline follicle. Using infected serum, gold particles were deposited only on the vitelline follicle prominently. This finding suggested that the tribocytic organ, seminal vesicle, caeca and vitelline follicles may play a role of antigen to immunized serum with crude worm extract of N. seoulense, whereas the vitelline follicle, to the infected serum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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