In order to obtain a regulatory mutant strain with high cellulase activity, a newly isolated Penicillium verrculosum, strain F-3 was used as parental strain since it was proved to be an efficient cellulase producer. A number of experiments were conducted to determine the optimum conditions to in-duce mutagenesis and isolate the desirable mutant strains. Out of several restriction compounds tested, 1.5% oxgall was found to be most effective to restrict the colony size by suppressing overgrowth. Derepression of catabolites was employed as a criterion in selecting mutant strains with high cellulase productivity. Production of cellulase by Penicillium venculosum F-3 was suppressed when cultured on the media with more than 1% of glucose or glycerol. It was found that either irradiation with UV light for 19 mins or treatment with nitrosoguanidine at 200$\mu\textrm{g}$/m1 for 60 mins, induced mutagenesis at desired level, when the survival rate of the spore was 0.2% and 48%, respectively. Three mutant strains of F-3, UV-9, UV-10, and NTG-3 that had the highest cellulase productivity were finally selected, based on filter paper degradation rate, size of clearing zone on the screening plate and cellulase activity in the medium containing cellulose powder. When the mutant strains were compared with parental strain F-3, on the KC-M-W medium containing cellulose powder, the filter paper activities of UV-9, UV-10, and NTG-3 were increased by 34%, 55%, and 41%, respectively. However, the assimilation of cellobiose octaacetate by UV-9 or NTG-3 was markedly reduced. When the mutant UV-10 was grown on cellobiose octaacetate medium (CCA-4) in shaking flasks, the cellulase activities of the mutant increased by 20 to 50% compared to the parental strain. Excreation of soluble protein from the mutant also elevated up to 30%. The mutant also constitutively produced both CMCase and $\beta$-glucosidase, though at relatively low level, in the presence of glucose or cellobiose as carbon sources.
Park, Woo-Young;Seo, Dong-Cheol;Lim, Jong-Sir;Park, Seong-Kyu;Cho, Ju-Sik;Heo, Jong-Soo;Yoon, Hae-Suk
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.27
no.3
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pp.217-224
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2008
To obtain optimum configuration, depth and load of constructed wetlands(CWs) for treating of hydroponic waste solution(HWS) which was produced in greenhouses, the study was conducted with 4 kinds of combined systems such as Vertical flow(VF)-Horizontal flow(HF), VF-VF, HF-VF and HF-HF CWs. In four configurations of CWs, the treatment efficiency of pollutants from HWS under depth of HF and VF beds, HWS loading and HWSs were investigated. Removal rate of pollutants under different depth of VF and HF in 2-stage hybrid CWs was in the order of 50 cm < 70 cm regardless of CWs configuration. Removal rate of pollutants under HWS loading in 2-stage hybrid CWs was in the order of $150L\;m^{-2}\;day^{-1}{\fallingdotseq}300L\;m^{-2}\;day^{-1}\;>\;450L\;m^{-2}\;day^{-1}$. The optimum depth and HWS loading were 70 cm and $300L\;m^{-2}\;day^{-1}$ in four configurations of CWs, respectively. Using this optimum condition, for various HWSs (cucumber, paprika and strawberry HWS), removal rate of pollutants in HF-HF CWs was higher than that in HF-VF CWs. Optimum configuration of 2-stage hybrid CWs for treating hydroponic waste solution in greenhouses was found out to be HF-HF CWs. Therefore, under the optimum conditions, removal rate of BOD, COD, SS, T-N and T-P in HF-HF CWs were 84, 81, 84, 51 and 93%, respectively.
Seo, Dong-Cheol;Park, Mi-Ryoung;Kim, Hyung-Jun;Cho, In-Jae;Lee, Hong-Jae;Sung, Sun-Jin;Cho, Ju-Sik;Heo, Jong-Soo
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.25
no.3
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pp.202-210
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2006
To develop small-scale sewage treatment apparatus for detached house of agricultural village, a small-scale sewage treatment apparatus by natural purification method that consisted of packaged form of aerobic, anoxic and anaerobic bed was constructed. The efficiency of sewage treatment according to the sewage treatment method, sewage loading, and the injection method of sewage were investigated for small-scale sewage treatment apparatus of packaged form of aerobic, anoxic and anaerobic bed. The removal rate of pollutants according to the sewage treatment method for small-scale sewage treatment apparatus was high in the order of aerobic-anoxic-anoxic bed < aerobic-anoxic-anaerobic bed. The optimum filter media in small-scale sewage treatment apparatus was a broken stone. The removal rate of pollutants according to sewage loading in small-scale sewage treatment apparatus was high in the order of $1,200L/m^2{\cdot}day\fallingdotseq900L/m^2{\cdot}day\fallingdotseq600L/m^2{\cdot}day$. The removal rate of pollutants according to injection method of sewage in small-scale sewage treatment apparatus was high in the order of continuous injection $\fallingdotseq$ intermittent injection. When loaded under the optimum conditions, removal rate of BOD, COD, SS, T-N and T-P were 99, 95, 99, 83 and 96%, respectively, through this 3-stepped small-scale treatment apparatus arrayed with the order of aerobic, anoxic and anaerobic bed.
Yoon, Younghan;Lim, Hyun Man;Kim, Weon Jae;Jung, Jin Hong;Park, Jae-Roh
Ecology and Resilient Infrastructure
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v.3
no.4
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pp.221-230
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2016
Multi-functional floating wetland island (mFWI) was developed in order to prevent algal bloom and to improve water quality through several unit purification processes. A test bed was applied in the stagnant watershed in an urban area, from the summer to the winter season. For the advanced treatment, an artificial phosphorus adsorption/filtration medium was applied with micro-bubble generation, as well as water plants for nutrient removal. It appeared that the efficiency of chemical oxygen demand (COD) and total phosphorus (T-P) removal was higher in the warmer season (40.9%, 45.7%) than in the winter (15.9%, 20.0%), and the removal performance (suspended solid, chlorophyll a) in each process differs according to seasonal variation; micro-bubble performed better (33.1%, 39.2%) in the summer, and the P adsorption/filtration and water plants performed better (76.5%, 59.5%) in the winter season. From the results, it was understood that the mFWI performance was dependent upon the pollutant loads in different seasons and unit processes, and thus it requires continuous monitoring under various conditions to evaluate the functions. In addition, micro-bubbles helped prevent the formation of anaerobic zones in the lower part of the floating wetland. This resulted in the water circulation to form a new healthy aquatic ecosystem in the surrounding environment, which confirmed the positive influence of mFWI.
Kim, Seong-Im;Bae, In-Ha;Kim, Hae-Kwon;Kim, Sung-Rye
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.26
no.3
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pp.407-417
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1999
Objective: Mammalian follicle cells are the most important somatic cells which help oocytes grow, mature and ovulate and thus are believed to provide oocytes with various functional and structural components. In the present study we have examined whether cumulus or granulosa cells might playa role in establishing the plasma membrane structure of mouse oocytes during meiotic maturation. Design: In particular the differential resistances of mouse oocytes against chymotrypsin treatment were examined following culture with or without cumulus or granulosa cells, or in these cell-conditioned media. Results: When mouse denuded oocytes, freed from their surrounding cumulus cells, were cultured in vitro for $17{\sim}18hr$ and then treated with 1% chymotrypsin, half of the oocytes underwent degeneration within 37.5 min ($t_{50}=37.5{\pm}7.5min$) after the treatment. In contrast cumulus-enclosed oocytes showed $t_{50}=207.0$. Similarly, when oocytes were co-cultured with cumulus cells which were not associated with the oocytes but present in the same medium, the $t_{50}$ of co-cultured oocytes was $177.5{\pm}13.1min$. Furthermore, when oocytes were cultured in the cumulus cell-conditioned medium, $t_{50}$ of these oocytes was $190.0{\pm}10.8min$ whereas $t_{50}$ of the oocytes cultured in M16 alone was $25.5{\pm}2.9min$. Granulosa cell-conditioned medium also increased the resistance of oocytes against chymotrypsin treatment such that $t_{50}$ of oocytes cultured in granulosa cell-conditioned medium was $152.5{\pm}19.0min$ while that of oocytes cultured in M16 alone was $70.0{\pm}8.2min$. To see what molecular components of follicle cell-conditioned medium are involved in the above effects, the granulosa cell-conditioned medium was separated into two fractions by using Microcon-10 membrane filter having a 10 kDa cut-off range. When denuded oocytes were cultured in medium containing the retentate, $t_{50}$ of the oocytes was $70.0{\pm}10.5min$. In contrast, $t_{50}$ of the denuded oocytes cultured in medium containing the filtrate was $142.0{\pm}26.5min$. $T_{50}$ of denuded oocytes cultured in medium containing both retentate and filtrate was $188.0{\pm}13.6min$. However, $t_{50}$ of denuded oocytes cultured in M16 alone was $70.0{\pm}11.0min$ and that of oocytes cultured in whole granulosa cell-conditioned medium was $156.0{\pm}27.9min$. When surface membrane proteins of oocytes were electrophoretically analyzed, no difference was found between the protein profiles of oocytes cultured in M16 alone and of those cultured in the filtrate. Conclusions: Based upon these results, it is concluded that mouse follicle cells secrete a factor(s) which enhance the resistance of mouse oocytes against a proteolytic enzyme treatment. The factor appears to be a small molecules having a molecular weight less than 10 kDa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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