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Deinococcus radiodurans RecA 단백질의 외가닥 DNA-의존성 ATPase 활성 분석 (Characterization of Single Stranded DNA-Dependent ATPase Activities of Deinococcus radiodurans RecA Protein)

  • 김종일
    • 미생물학회지
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    • 제43권4호
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    • pp.250-255
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    • 2007
  • Deinococcus radiodurans recA는 이 미생물의 방사선 저항성을 나타내는 표현형에 필수적이며 재조합성 DNA 수선 과정에 관여한다. 이 과정에서 RecA 단백질은DNA와 결합하여 반응의 활성 종인 RecA nucleoprotein 필라멘트를 형성한다. DNA-의존성 ATPase 활성과 함께, RecA 단배질의 외가닥 DNA 혹은 이중가닥 DNA와의 상호작용은 RecA 단백질이 관여하는 반응의 중심과정으로 이에 관한 분석을 시도하였다. D. radiodurans RecA 단배질은 DNA에 결합한 DNA-단백질 복합체만이 ATPase 활성을 나타내므로, ATP (혹은 dATP) 가수분해를 측정함으로써 RecA와 외가닥 DNA와의 상호작용 정도를 분석하였다. D. radiodurans RecA 단백질은 외가닥 DNA의 염기 구성의 이질성에 영향을 받았으며, homopolymer인 poly(dT)와의 상호작용에서 가장 높은 가수분해 활성을 보였다. Homopolymer인 합성 DNA-의존성 ATP 및 dATP의 가수분해는 pH 6.0과 9.0의 범위에서 다소 일정한속도로 일어났으며 최적 pH는 7.0과 7.5 사이였다. 외가닥 DNA-의존성 ATPase 활성은 염의 존재에 영향을 받아 KCl이 존재하면 다소 억제되나, K-glutamate가 존재하면 오히려 촉진되었다. RecA 단백질과 외가닥 DNA의 상호작용을 ATP 가수분해로 분석하였을 때 2 mM 이상의 magnesium 이온이 DNA 결합반응에 필요하였으며, 비교적 넓은 범위의 pH에서 외가닥 DNA와의 결합반응이 일어나며, 이러한 결합반응은 당량적인 비(1:3, RecA protein: DNA nucleotide)로 일어났다.

Cu-9Fe-1.2X (X=Ag, Cr, Co)계 미세복합재료전선의 기계적 특성 및 전기전도도 (Mechanical Properties and Electrical Conductivities of In-Situ Cu-9Fe-1.2X(X=Ag, Cr, Co) Microcomposite Wires)

  • 송재숙;임문수;안장호;홍순익
    • 한국재료학회지
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    • 제10권1호
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    • pp.41-48
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    • 2000
  • 본 연구에서는 열가공공정을 거쳐 제조된 Cu-Fe-Xi(Xi=Ag, Cr 또는 Co) 미세복합재료의 미세구조와 기계적 특성 및 전기적 특성에 대하여 조사하였다. 냉각가공 중에 수지상정들은 인발 방향에 평행하게 배열되고 필라멘트 형태로 연산되었다. Ag를 첨가한 미세복합재료가 같은 가공율에서 Co나 Cr를 첨가하는 미세복합재료보다 미세조직이 더욱 미세하게 관찰되었다. 제3첨가원소로 Ag를 함유하고 있는 Cu-Fe-Ag 미세복합재료의 강도와 전도도는 Co나 Cr를 첨가하는 미세복합재료보다 높게 나타났다. Cu-Fe-Ag 미세복합재료의 우수한 기계적 성질과 전기적 특성은 Ag가 함유되어 있는 경우 필라멘트의 미세성과 균일성이 높게 관찰되는 것과 관련이 있다. Cu-Fe-Xi 미세복합재료의 강도는 Fe 필라멘트의 간격을 고려한 Hall-Petch 형태의 식과 일치한다. Cu-Fe-Xi 미세복합재료의 파괴는 연성파괴가 관찰되었다.

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후계(後谿), 위중(委中), 후계배위중(後谿配委中) 침자(鍼刺)가 백서(白鼠)의 신경병리성(神經病理性) 동통억제(疼痛抑制) 및 c-Fos 단백(蛋白) 발현(發顯)에 미치는 영향(影響) (Effects of Acupuncture at SI3, BL40, SI3·BL40 on Neuropathic pain control and c-Fos protein expression in rats)

  • 정정희;윤대환;나창수;유충열;윤여충;조명래
    • Journal of Acupuncture Research
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    • 제21권1호
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    • pp.240-251
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    • 2004
  • Objective: We have studied to know effects of acupuncture at SI3, BL40, SI3 BL40 on mechnical allodynia, cold allodynia and c-fos protein expression in a model of neuropathic pain of rat. Methods: A model of neuropathic pain was made by injuring tibial nerve and sural nerve while common peroneal nerve was maintained. after 2 weeks, we performed behavioral tests for 7 days to try out mechnical allodynia using von frey filament and cold allodynia using acetone, which are calculated by counting withdrawal response on foot. Rat brains removed and sliced on 8th days. Serial sections were immunohistochemically reacted with polyclonal c-fos antibody. The numbers of c-Fos protein immunoreactive neurons in the central gray were examined using scion image program. Results: Mechanical allodynia in the SI3, BL40, SI3 BL40 groups were diminished compared with the control group. Cold allodynia in the SI3, BL40, SI3 BL40 groups were diminished compared with the control group. c-Fos protein expression on the central gray in the SI3 group were lower than that of the control group. Conclusions: We have noticed that acupuncture at SI3, BL40, SI3 BL40 diminished mechanical allodynia and cold allodynia in a model of neuropathic pain compared with the control group. c- Fos protein expression in the central gray of that group was also decreased compared with the control group. pain control using acupunture was accumulated as time goes by. This study can be used as a basic resource on a study and a treatment of pain.

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건측(健測) 취혈(取穴) 다종(多種) 침자법(鍼刺法)이 백서(白鼠)의 신경병리성(神經病理性) 동통(疼痛)에 미치는 영향 (Effects of Acupuncture, Electro-acupuncture, Low Level He-Ne Laser Therapy at Oe-gwan($TE_5$) ${\cdot}$ Chogimup ($GB_{41}$) on L5 Spinal Nerve Ligation Model in Rats)

  • 정정희;조명래;위통순;류충열
    • Journal of Acupuncture Research
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    • 제24권5호
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    • pp.137-150
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    • 2007
  • Objectives : To find effects of acupuncture, electro-acupuncture, low level He-Ne laser therapy(LLLT) at $TE_5$, $GB_{41}$ in the neuropathic pain. We made experiment on rats ligated L5 spinal nerve like general herniation of nucleus pulposus(HNP). Methods : A model of neuropathic pain was made by isolating Left 5th lumbar spinal nerve of rats. Three days after the neuropathic surgery, acupuncture and LLLT, electro-acupuncture was injected at $TE_5$, $GB_{41}$ one time a day for a week. Each group was divided two. one is opposite side performed the surgery which is right, another is left side performed the surgery. After that, the author examined the withdrawal response of neuropathic rats' legs by van Frey filament and acetone stimulation. And also the author examined c-Fos, Nociceptin and KOR-3 in the midbrain central gray of neuropathic rats. Results : As we have observed the effect of mechanical allodynia, LT-R group were diminished on 6th day compared with control group, EA-L group, EA-R group and LT-L group were diminished on 7th day compared with control group. As we have observed the effect of cold allodynia, EA-R group were diminished on 6th day, 7th day compared with control group. As we have observed the effect of activity of c-Fos in the central gray part, EA-R group and LT-R group were diminished compared with control group. As we have observed the effect of activity of Nociceptin in the central gray part, EA-R group were a little increased compared with control group but it is not reliability. As we have observed the effect of activity of KOR-3 in the central gray part, EA-R group were significantly increased compared with control group. Conclusions : We have noticed that effect of acupuncture at opposite side of sickness and powerful stimulation could be more effective, because of EA-R group have more controllable effect all test we have done on the other hand EA-L group have only effect on mechanical allodynia. This study can be used in clinical therapy for neuropathic pain. But it is not reliability that Nociceptin have effectively to control pain. Therefore We have to follow up about that.

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Effects of Tiam 1 on Invasive Capacity of Gastric Cancer Cells in vitro and Underlying Mechanisms

  • Zhu, Jin-Ming;Yu, Pei-Wu
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제14권1호
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    • pp.201-208
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    • 2013
  • Objective: To investigate changes in the invasive capacity of gastric cancer cells in vitro after expression inhibition of T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1 (Tiam 1) and underlying mechanisms. Methods: Using adhesion selection, two subpopulations with high ($M_H$) or low ($M_L$) invasive capacity were separated from the human gastric cancer cell line MKN-45 ($M_0$). Tiam 1 antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) was transfected into $M_H$ cells with liposomes, and expression of Tiam 1 mRNA and protein was determined by RT-PCR and quantitative cellular-ELISA. Changes in the cytoskeleton, invasive capacity in vitro and expression of ras-related $C_3$ botulinum toxin substrate 1 (Rac 1), integrin ${\beta}1$ and matrix metalloproteinase 2 (MMP 2) between Tiam 1 ASODN transfected $M_H$ cells and non-transfected cells were observed by HE staining, cytoskeletal protein staining, scanning electron microscopy, Boyden chamber tests and cyto-immunohistochemistry. Results: A positive correlation existed between the expression level of Tiam l mRNA or protein and the invasion capacity of gastric cancer cells. After ASODN treatment ($0.43{\mu}M$ for 48 h), Tiam 1 mRNA transcription and protein expression in $M_H$ cells were decreased by 80% and 24% respectively (P < 0.05), compared with untreated controls, while invasive capacity in vitro was suppressed by 60% (P < 0.05). Morphologic and ultrastructural observation also showed that ASODN-treated $M_H$ cells exhibited smooth surfaces with obviously reduced filopodia and microspikes, which resembled $M_0$ and $M_L$ cells. Additionally, cytoskeletal distribution dramatically altered from disorder to regularity with reduced long filament-like structure, projections, pseudopodia on cell surface, and with decreased acitn-bodies in cytoplasm. After Tiam 1 ASODN treatment, the expression of Rac 1 and Integrin ${\beta}1$ in $M_H$ cells was not affected (P > 0.05), but that of MMP 2 in $M_H$ cells was significantly inhibited compared with untreated cells (P < 0.05). Conclusion: Over-expression of Tiam-1 contributes to the invasive phenotype of gastric cancer cells. Inhibition of Tiam 1 expression could impair the invasive capacity of gastric cancer cells through modulating reconstruction of the cytoskeleton and regulating expression of MMP 2.

장신구 활용에 적합한 3D프린팅 방법론 비교 연구 (Comparative Study on the 3D Printing Methodology suitable for Jewelry)

  • 장진희;고승근
    • 한국융합학회논문지
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    • 제11권2호
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    • pp.225-230
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    • 2020
  • 3D프린팅의 활용은 매우 혁신적이면서 유용한 기술이다. 하지만 장신구 분야에서는 3D프린팅 기술은 제작방법의 한 분야로서 한정적 으로 사용되는 기술이다. 이러한 3D프린팅의 한계를 극복하기 위해 3D프린팅 출력방식 중 가장 대중적이며 조형활동에 적합한 출력방식을 선정하고 출력시간, 조건을 한정하여 장신구에 적용 가능성을 알아보기 위해 비주조과정과 주조과정 각각의 방법을 통해 시제품까지 완성하고 이를 비교해 보았다. 그 결과, FDM출력 방식은 비용과 시간적인 측명에서 매우 긍정적인 장점이 있지만 표면에 적층구조가 지워지지 않으며 출력과정시 발생되는 필라멘트의 잔여물로 인해 선 조형을 표면시 완성도가 떨어지는 단점이 있었다. DLP출력방식은 표면처리가 고르며 완성도가 높은 반면, 비용과 시간적인 측면에서 효율성이 떨어지는 단점이 있었다. 하지만 두 출력방법 모두 장신구 활용 가능하며 향후 디자인에 맞는 다양한 출력방법연구가 이루어져 장신구에 3D 작품연구가 활발히 수행되기를 바란다.

마약류 및 산업환경화학물질에 의한 GFAP의 신경독성표지물질화에 관한 유용성 (The Neurotoxicological Alterations Induced by Narcotic Drugs and Industrial Chemicals in the Rat are Associated with Quantitative Changes in Glial Fibrillary Acidic Protein)

  • 조대현;정용;김준규;이봉훈;황세진;이원용;김정구;조태순;김진석;문화회
    • Toxicological Research
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    • 제11권2호
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    • pp.315-327
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    • 1995
  • Diverse neurotoxic insults result in proliferation and hypertrophy of astrocytes, a subtype of glia in central nervous system. The hallmark of this response, often terms "reactive gliosis", is the enhanced expression of the major intermediate filament protein of castrocytes, glial fibrillary acidic protein (GFAP). These changes in the astrocytes suggest that GFAP may be a useful biochemical indicator of neurotoxicity. To investigate this possibility, we administered intra-peritoneally prototype nerotoxicants, metharnphetamine (MAP, 5 mg/kg), cocaine (30 mg/kg), N-buthyl benzenesulfonamide (NBBS, 300 mg/kg) and trimethytin (TMT, 8 mg/kg) to Wistar Rats and then assessed the effects of these agents on content of GFAP, which were determined by Sandwish ELISA and evaluated with neurotoxic symptoms, and quantitative changes of imrnunoreactivity of GFAP by light microscopic image analysis in specific regions. We found that assay of GFAP revealed time- and region-dependant patterns of neurotoxicity. The GFAP immunoreactivity of rat brain was increased in substantia nigra and hippocampus by MAP, NBBS and TMT; in roedial septal nucleus and nucleus accurnbens, it was also increased by RrBBS. Sandwich ELISA showed that GFAP levels of cerebrum in all groups on days 3 and 7 and that of brainstem(including cerebellum) in MAP, NBBS groups on day 1 and 3 were increased. A review of the background, design and results of these experiments are presented in this paper. Our findings indicate that GFAP is a sensitive and specific biomarker of neurotoxicity.otoxicity.

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동부(Vigna sesquipedalis)에 발생하는 Blackeye Cowpea Mosaic Virus와 Cucumber Mosaic Virus에 관한 연구 (Blackeye Cowpea Mosaic Virus and Cucumber Mosaic Virus Causing Mosaic Disease on Asparagus Bean (Vigna sesquipedalis) in Korea)

  • 윤태규
    • 한국식물병리학회지
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    • 제3권4호
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    • pp.291-298
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    • 1987
  • 모자이크, 엽맥록대, 퇴록반점 등의 병징을 나타내고 있는 동부 (Vigna sesquipedalis)를 진주에서 채집하였다. 전자현미경에 의해 2종의 바이러스가 분리되어 이들의 기주범위, 조즙액중의 부활성화한계, 감염엽세포에 있어서 입자의 소재양식에 의하여 2종의 바이러스를 동정하였다. Blackeye cowpea mosaic virus (BICMV). 이 바이러스는 즙액접종에 의해 2과 7종의 검정식물에 감염이 확인되었다. 그러나 전신감염은 두과식물에 한했다. 내열성은 $50-60^{\circ}C$, 내희석성은 $10^{-4}-10^{-5}$, 내보존성은 1-6일이었다. 바이러스 입자의 형태는 길이 약 750nm의 사상형이다. 병엽 절편의 전자현미경적 관찰에서는 엽육세포의 세포질에서 사상 입자와 풍차상 및 환상의 봉입체가 확인되었다. Cucumber mosaic virus(CM V), 이 바이러스는 즙액접종에 의해 3과 9종의 검정식물에 감염이 확인되었다. 다른 CM V계와 달리 두과식물에도 전신감염을 했다. 이 바이러스 임자의 형태는 직경약 30nm의 입자이다. 감염엽의 전자현미경적 관찰에서는 엽육세포의 세포질 및 액포내에서 바이러스 입자의 응집상이 확인되었다.

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3D 프린터 빌드시트용 무용제 UV 경화형 아크릴 점착제의 제조 (Solvent-free UV-curable Acrylic Adhesives for 3D printer build sheet)

  • 이배화;박동협;김병직
    • 접착 및 계면
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    • 제21권3호
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    • pp.93-100
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    • 2020
  • 적층제조법 기반의 3D 프린팅 기술은 사용자가 원하는 상품을 출력하여 제공하지만 고온의 사용 환경 및 용융된 필라멘트 수지의 냉각 과정에서 변동적 수축현상이 발생하여 상품의 출력편차를 야기한다. 본 연구에서는 출력물의 들뜸과 뒤틀림을 방지하고 정밀한 형상의 고품질 출력물을 제작하기 위하여 3D 프린터 빌드시트용 아크릴 점착제를 연구하였다. 고온에서 점착특성이 유지되고 점착제로부터 출력물의 안착과 원활한 탈거를 위해 부착성과 강인성이 우수하고 높은 유리전이온도를 갖는 4-acryloylmorpholine (ACMO)를 첨가하여 무용제 타입의 점착제 조성물을 설계하였다. 단량체의 후첨가방식을 사용하여 두 단계를 통해 아크릴 조성물을 합성하였고, 합성된 조성물로 코팅한 점착제 필름을 다각도에서 분석하였다. 그 결과 제조된 점착제는 높은 유리전이온도를 보이고 열처리 전/후에 따른 박리강도 차이가 보이지 않았으며, 유변학적 물성 분석을 통해 점착제의 우수한 접착력 뿐만 아니라 변형 없이 탈착이 가능한 물성을 갖음을 확인하였다. 본 연구에서 제조된 점착제를 3D 프린터의 빌드시트로 활용하였을 때 안착성 및 작업성이 양호하고 출력편차가 적은 출력물을 얻었다. 기존 판매중인 빌드시트와 비교하였을 때 본 연구에서 제조한 점착제 위에서는 출력물이 원활하게 탈거가 가능하기 때문에 FDM 방식 3D프린터의 사용자들에게 작업 편의성을 제공할 수 있을 것으로 기대된다.

단기배양한 중피세포의 면역세포화학적 연구 (Immunocytochemical Characteristics of the Short-term Cultured Mesothelial Cells)

  • 전호종;이미자;이미숙;정유경;이영미;최형호
    • 대한세포병리학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.106-115
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    • 1995
  • Reactive humsn mesothelial cells were examined by immunocytochemical stain with intermediate filaments (cytokeratin [CK1, CK7, CK8, CK18, CD19), vimentin, desmin, actin), epithelial membrane antigen, carcinoembryonic antigen (CEA), MHC class II antigen (HLA-DR), LeuM-1 (CD15), $\alpha1-antitrypsin$(ACT), $\alpha1-antichymotrypsin$ (ACHT), CD68(KP-1) and FcyRIII(CD16). The mesothelial cells were isolated from patients with liver cirrhosis and pleural effusion, and short-term cultured in RPMI 1640 media containing 10% heat inactivated fetal calf serum and 1% identical supernatant fluid of the patients' transudates. The results obtained are as follows 1. The cultured-reactive mesothelial cells were positive for the protein of cytoskeleton such as cytokeratin and vimentin, but negative for desmin and actin. The resting mesothelial cells showed positive reactions for cylokeratin, but negative for vimentin, desmin and actin. 2. The primary antibodies to the cytokeratin were strongly reactive for CK1, CK8 and CK18 but negative for CK7 and CK19 in both reactive and resting mesothelial cells. 3. Resting mesothelial cells showed negative reactions for CEA, but strong positive reactions in cultured-reactive mesothelial cells. 4. The markers for the monocytes/histiocytes(CD11b, CD14, CD16, CD68, Iysozyme and $\alpha1-antitrypsin$ and $\alpha1-antichymotrypsin$) were nonreactive in resting mesothelial cells, but lysozyme and $\alpha1-antitrypsin$ were weakly reactive in reactive and proliferative mesothelial cells. 5. MHC Class II molecule(HLA-DR antigen) was negative in both resting and reactive mesothelial cells. These results suggest that the short-term cultured, reactive mesothelial cells show a newly aberrant expression of the vimentin and calcine-embryonic antigen. The reason of the aberrant expression of the intermediate filament and oncofetal antigen in reactive and proliferative mesothelial cells should be further evaluated.

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