• 한국양식학회지
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• 제11권2호
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• pp.271-278
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• 1998

전복의 난황단백질의 특성을 조사하기 위하여 성숙한 참전복 암컷의 난소난 추출물로부터 sepharose Cl-4B gel chromatography을 사용하여 난황단백질을 분리하였다. 암컷과 수컷의 혈청과 난소난 추출물에 대한 항혈청을 이용하여 암수혈청과 난소난 추출물을 면역전기영동과 Ouchterlony 면역확산을 한 결과, 성숙한 암컷 혈청에는 암컷 특이 혈청 단백질(female specific serum protein) 이 존재하였으며, 이것은 난소난 추출물과 동일한 항원성을 가지고 있었다. 한 종류의 난황단백질이 난소난 추출물로부터 분리되었으며, 이 난황단백질은 SDS 전기영동에 의해 분자량이 각각 181kDa과 113kDa이 되는 2개의 subuit로 구성되어 있었다. 이들 난황단백질에 대한 항혈청은 성숙한 암컷 특이 혈청단백질과 간췌장 추출액과 침강반응을 보였으며 서로 교차반응이 일어났으나, 성숙한 수컷 간췌장 추출물에 대해서는 반응이 일어나지 않았다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제29권6호
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• pp.569-577
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• 1996

This study was performed to determine the effect of maternal protein intake on 1) the concentration of immune substances in milk 2) degree of passive immunity to pups via lactation, and 3) specific antibody production to a specific antigen, $\beta$-lactoglobulin(BLG). 4) the effect of passive immunity that pups received from mother during lactation on the production of antibodies when the pups were challenged to the same antigen. Part of the female rats were immunized with BLG before and during pregnancy. The pregnant rats were placed into either 25% or 10% isolated soy protein diet throughout gestation and lactation. After weaning, pups from each group continued to be fed the same diet. At 18 weeks of age, all the pups were challenged with BLG. Total IgA and IgG, lysozyme, BLG-specific IgA and IgG were measured in dam's serum, dam's milk, and pup's serum. Total IgG, and lysozyme in dam's serum and milk were higher in high protein group. Total IgA and IgG in pup's serum remained higher in high protein group from 5 to 18 weeks of age. BLG-specific antibodies were found in the milk and serum of immunized dams, and in serum of pups born to immunized dams but not in the non-immunized group. BLG-specific IgA and IgG were again higher in high protein group and declined with time. The concentration decreased faster in the low proetein group than in the high protein groups. After immunization the pups with LBG, serum BLG-specific antibodies were not differ between rats born to immunized dams and those born to non-immunized dams. Therefore passive immunity rats received via milk as a pup had no effect on the BLG-specific antibody production later in life. This study shows the importance of protein status of mother and strongly support to the endorsement of breast feeding.

• 한국수산과학회지
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• 제25권5호
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• pp.432-442
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• 1992

동남참게, Eriocheir japonicus의 난황단백전구체 합성부위를 면역조직화학적인 방법으로 구명하기 위하여, 난황단백질을 정제하고, 이 단백질에 대한 항혈청을 제작하여 난황단백질에 대한 면역학적인 성질을 밝힌 후, 난황단백전구체의 항체가 존재하는 항 난황단백혈청을 사용하여 PAP(peroxidase-antiperoxidase)법으로 생식소, 간췌장, 근육조직을 대상으로 면역조직화학 반응을 시켰다. 성숙한 암, 수혈청에 대한 면역전기영동과 Ouch-terlony 면역확산 실험에 의하여 암혈청내에는 암 특이성혈청단백질이 있음이 밝혀졌다. 암, 수혈청에 대한 항혈청과 난황형성중인 암혈청에 대한 조난황단백추출액에 대하여 면역전기영동과 Ouchte-rlony 면역확산 실험을 행한 결과, 암 특이성혈청 단백질은 난황단백전구체임이 밝혀졌다. 조난황단백추출액으로 부터 DEAE 이온교환 chro-matography와 sepharose CL-4B gel 여과법에 의하여 난황단백질을 정제하였으며, 이 난황단백질의 분자량을 sepharose CL-4B gel 여과법에 의하여 추정한 결과 분자량은 약 245,000 dalton이었다. 또한 난황단백질은 면역학적인 분석에 의하여 난황 단백질에 대한 항혈청에는 난황단백전구체에 대한 항체가 존재하고 있음이 증명되었다. 난황단백질에 대한 토끼 항혈청을 이용하여 PAP법에 의한 면역조직화학반응을 시킨 결과, 난황형성중인 난모세포와 성숙한 암참게의 간췌장은 양성반응이 나타는데 반하여 난소내의 여포세포층과 난황형성전 난모세포, 근육층 그리고 성숙한 수참게의 간췌장은 전혀 양성반응이 나타나지 않았다. 따라서 본 종의 난황단백전구체의 합성부위는 간췌장임을 알 수 있다.

• 한국양식학회지
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• 제8권1호
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• pp.1-19
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• 1995

난황형성 중인 암 참돔의 혈청 내에는 암 특이혈청단백질이 존재하고 있음이 Ouchterlony의 면역확산 검정과 면역 전기영동에 의하여 밝혀졌으며, 이러한 암 특이혈청단백질은 암 $\cdot$수 혈청과 난추출액의 면역학적인 조사에 의해 난황단백 전구체임이 밝혀졌다. 또한 난추출액으로부터 정제된 난황단백질은 난황전구체와 공통의 항원성이 있음도 면역학적인 조사에 의하여 알 수 있었다. 변형한 효소면역측정법의 타당성을 조사하였다. 일정 비율로 희석한 성숙중인 암 혈청의 흡광도 곡선은 난황단백질의 표준곡선과 평행하였다 본 효소면역측정법의 평균 회수율은 $109\pm5.6\%$이었으며, $10\%$ 이내의 assay내 변동계수 범위는 $31\~1,000ng/ml$이었다. 생식소의 성숙 단계에 대한 혈장내의 난황단백전구체의 양과의 관계를 조사하기 위하여 휴지기후기(1월)부터 난황형성기(4월)까지 난황단백질에 대한 항체를 이용한 효소면역측정법에 의하여 혈장 난황단백전구체의 양을 측정하였다. 난황단백전구체의 양은 난황형성 전기인 2월부터 증가하기 시작하여, 난황형성기(3월부터 4월) 동안에는 난이 성장하면서 계속 증가하였다 2월부터 혈장내의 난황단백전구체의 양이 암$\cdot$수에 따라 현저하게 차이가 났다. 따라서 참돔 친어의 성 구분은 효소면역 측정법에 의하여 2월부터는 명확히 할 수 있다

• Animal cells and systems
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• 제15권2호
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• pp.147-154
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• 2011

Animal cell cultures generally require a nutrient-rich medium supplemented with animal serum. Adult bovine serum contains a variety of nutrients including inorganic minerals, vitamins, salts, proteins and lipids as well as growth factors that promote animal cell growth. To evaluate the potential use of gender-specific bovine serum (GSBS) for cell culture, the biochemical properties of male serum (MS), female serum (FS) and castrated-male serum (CMS) were investigated. Overall, the chemical profile of GSBS was similar to that of bovine references except for glucose, creatine kinase, lactate dehydrogenase and potassium. FS showed elevated total protein and sodium concentrations compared to MS and CMS. Proteins present in MS, FS and CMS but absent in fetal bovine serum (FBS) were selected by two-dimensional gel electrophoresis and identified by peptide mass fingerprinting. Some of the identified proteins are known to be involved in immune responses and the others have unknown physiological roles. Moreover, it was found that some proteins such as alpha-2-macroglobulin appeared to be gender-specific with higher contents in FS. Insulin and testosterone was significantly higher in MS, and $17{\beta}$-estradiol and estrone were higher in FS, as compared to the other sera. Taken together, the results indicate that each GSBS has a different ratio of components. Differences in serum constituents may affect cell cultures in a different manner and could be beneficial, depending on the specific aim of cell cultures.

• 한국양식학회지
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• 제9권1호
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• pp.83-92
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• 1996

농어목 어류, C. diagramma 암컷의 vitellogenin과 난황단백의 면역화학적 특성을 서로 비교하였다. 면역화학적 방법에 의해 C. diagramma 암컷의 혈청에서 vitellogenin 1 (VTG1)과 vitellogenin 2 (VTG2)를 동정하였으며, sephacryl S-300 gel 여과법에 의하여 측정된 분자량은 각각 560,000과 410,000이었다. 암컷의 난소 추출액에서는 두 가지 형태의 난황단백인 E2와 E3가 분리되었으며, 이들의 분자량은 각각 410,000과 170,000이었다. $17\beta$-estradiol ($E_2$)을 주사한 수컷의 혈청과 간조직을 abidine-biotin complex (ABC) 방법으로 분석한 결과, vitellogenin과 유사한 물질이 검출되었다. 이상의 결과로 부터, 외인성 $E_2$ 에 의해 간에서 합성된 vitellogenin은 혈액 속으로 방출된 후 난소로 이동되는 것으로 추정되었다. 암컷의 $E_2$, 혈중농도는 산란기인 6월에 최고치를 나타내었고, vitellogenin 상대농도도 $5\~6$월에 최고치를 나타내었다. $E_2$와 vitellogenin의 변화는 본 종의 난소성숙과 밀접한 관계가 있으며, 난황형성에 있어서도 중요한 역할을 하고 있음을 알 수 있었다. 암컷 혈청 VTG2와 난소추출액 E2의 분자량이 서로 같고, vitellogenin이 간에서 합성되어 난소내로 이동하는 점으로 보아, 난소내 난황단백 성분의 전구물질은 혈청내의 vitellogenin인 것으로 추정되었다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제29권9호
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• pp.971-980
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• 1996

The soluble transferrin receptor(TfR) in human serum has been shown recently to be a truncated form of intact membrane bound receptor containing most of the extracellular domain. We purfied the transferin-free TfR from human serum by immounoaffinity chromatography which produced the single protein identity in high resolution gel chormatography. The monoclonal antibodies(MAb) against purifed serum TfR were produced by fusion of spleen cells o fimmunized Balb/c mice and SP2 cells. Ten hybrids producing MAb specific for serum TfR were identifed and determine their iostypes. A immunoraddiometric assay (IRMA) for serum TfR was established using two monoclonal IgG1 antibodies as the coating and indicator antibodies on the bosis of their suitability in sandwich IRMA of serum TfR. The mean serum TfR levels in the 15 normal male, 15 normal female, and 19 iron-deficient subjects were 5.4$\pm$0.98, 4.6$\pm$0/76, and 18.0$\pm$12.8mg/1, respectively, and the difference in mean values between normal and iron deficient subjects was significant(p=0.0005). There existed the inverse logarithmic relationship(r=-0.9336, p<0.0001) between the serum TfR and ferritin levels.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제2권4호
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• pp.167-172
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• 1969

(1) 농(農), 어(漁), 화전부락민(火田部落民)의 영양섭취상태(營養攝取狀態)를 조사(調査)하여 총섭취열량(總攝取熱量)과 총섭취단백량(總攝取蛋白量)은 어촌부락민(漁村部落民)의 경우가 가장 많았다는 사실(事實)을 알았다. (2) 총섭취단백량중(總攝取蛋白量中) 동물성단백(動物性蛋白)(육류단백)(肉類蛋白)의 찾이하는 비(比)는 화전민(火田民)이 가장 낮았다. (3) 혈액비중(血液比重), 혈청(血淸) tryptohane양등(量等)은 화전부락민(火田部落民)이 가장 낮은 값이였다. 특(特)히 혈청단백량(血淸蛋白量)과 혈청(血淸) tryptophane양(量)과의 관계(關係)에서는 유의성(有意性)인 낮은 값을 나타내고 있다. (4) 혈청단백분획(血淸蛋白分劃)에서 어촌부락민(漁村部落民)의 경우(境遇)는 Albumin, Globulin 비(比)가 매우 낮은 값을 보이고 있다. (5) Plasma Vitamine A 함량(含量)의 경우(境遇) 농재부락(農材部落)의 20세(歲) 미만 여성(女性)이 그의 결핍증세(缺乏症勢)를 보이는 사실(事實)은 지속적(持續的)인 연구(硏究) 과제(課題)라 생각(生覺)된다. 그러나 Plasma Carotene값은 오히려 높은 경향(傾向)을 보이는 것은 혈중(血中)에서 Carotene이 Vitamine A로 전환(轉換) 이용(利用)되는 일이 힘든다는 것을 의미(意味)한다. (6) 화전부락민(火田部落民)의 Urine thiamine의 양(量)이 많은 것은 저단백식(低蛋白食)과 관계(關係)가 있는 것으로 생각(生覺)된다.

• 대한지역사회영양학회지
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• 제10권3호
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• pp.264-270
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• 2005

Breastfeeding has been known as the best feeding practice to prevent allergies including atopic dermatitis (AD) However, the benefit on the prevention of allergic disease is still controversial. The objectives of this study were to examine the rate of sensitization to the protein of eggs, cow's milk and soy in exclusively breastfed infants and to evaluate antigen-antibody reaction between breast milk and serum of AD infant. Data on feeding and food hypersensitivity were obtained for 62 AD infants (32 male, 30 female) aged < 6 month who had visited Samsung Medical Center from September 2001 to May 2003. Food hypersensitivity was determined by measuring specific IgE to egg, cow's milk and soy. Specific IgE levels > 0.7 kU/L by CAP assay (Pharmacia, Uppsala, Sweden) were considered positive. The rates of sensitization in breastfed infants were $41.9\%$ (26/62) to egg, $30.6\%$ (19/62) to milk and $18.0\%$ (11/62) to soy. Immunoblotting analyses were performed using breast milk with the matched serum of seven AD infants (4 male/3 female). Binding patterns of AD infant's IgE to breast milk extract showed visible specific band for immunoglobulin, especially in case of a lactating mother who did not completely restricted ingestion of egg, milk and soy. These results indicate that sensitization to food allergen develops via breast milk feeding. Breast milk feeding should be recommended in infants at risk of developing allergic disease, but maternal intake of highly allergenic food might be restricted for prevention and treatment of food allergy among the babies with AD.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제17권6호
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• pp.743-749
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• 2004

The gene encoding human serum albumin (HSA) was cloned from human liver cDNA library by PCR. The HSA cDNA in size of 2,176 bp, including 1,830 bp of open reading frame, was cloned into the plasmid carried with the 5'flanking sequence of goat $\beta$-casein gene (-4,044 to +2,025 bp) to get a tissue specific expression vector in mammary gland named pGB562/HSA (12.5 kb). A 9.6 kb DNA fragment in which the sequence is in order of goat $\beta$-casein gene regulatory sequence, HSA cDNA and SV40 polyadenylation signals was isolated from the pGB562/HSA by SacI and DraIII cutting, and used to microinject into the pronuclei of mouse fertilized eggs to produce transgenic mice. Three transgenic mice (2 female and 1 male) were identified by PCR and dot Southern blot analysis. The copy numbers of integrated transgene were more than 10 copies in line #21 and #26 as well as over 50 copies in line #31 of transgenic mice. HSA protein collected from the milk of lactating transgenic mice was confirmed by immuno-detection of Western and slot blot. The concentrations of HSA in the milk were from 0.05 to 0.4 mg/ml. An obvious antigen and antibody conjugate could be observed in immunohistochemical stain of mammary gland tissue from lactating day 11 of HSA transgenic mice. The transmission of transgene and its expression was recognized according to the results of RT-PCR and sequences analyses of their progeny.