The DNA sequence immediately following the xynA gene of Bacillus stearothermophilus 236 [about l-kb region downstream from the translational termination codon (TAA) of the xynA gene]was found to have an ability to enhance the xylanase activity of the upstream xynA gene. An 849-bp ORF was identified in the downstream region, and the ORF was confirmed to encode a novel protein of 283 amino acids designated as XaiF (xylanase-activity-increasing factor). From the nucleotide sequence of the xaiF gene, the molecular mass and pI of XaiF were deduced to be 32,006 Da and 4.46, respectively. XaiF was overproduced in the E. coli cells from the cloned xaiF gene by using the T7 expression system. The transcriptional initiation site was determined by primer extension analysis and the putative promoter and ribosome binding regions were also identified. Blast search showed that the xaiF and its protein product had no homology with any gene nor any protein reported so far. Also, in B. subtilis, the xaiF trans-activated the xylanase activity at the same rate as in E. coli. In contrast, xaiF had no activating effect on the co-expressed ${\beta}-xylosidase$ of the xylA gene derived from the same strain of B. stearothermophilus. In addition, the intracellular and extracellular fractions from the E. coli cells carrying the plasmid-borne xaiF gene did not increase the isolated xylanase activity, indicating that the protein-protein interaction between XynA and XaiF was not a causative event for the xylanase activating effect of the xaiF gene.
Bonavides, Krishna B.;Pelegrini, Patricia B.;Laumann, Raul A.;Grossi-De-Sa, Maria F.;Bloch, Carlos Jr.;Melo, Jorge A.T.;Quirino, Betania F.;Noronha, Eliane F.;Franco, Octavio L.
BMB Reports
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v.40
no.4
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pp.494-500
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2007
The endophytic bruchid pest Callosobruchus maculatus causes severe damage to storage cowpea seeds, leading to economical losses. For this reason the use of $\alpha$-amylase inhibitors to interfere with the pest digestion process has been an interesting alternative to control bruchids. With this aim, $\alpha$-amylase inhibitors from baru seeds (Dipteryx alata) were isolated by affinity chromatographic procedures, causing enhanced inhibition of C. maculatus and Anthonomus grandis $\alpha$-amylases. To attempt further purification, this fraction was applied onto a reversed-phase HPLC column, generating four peaks with remarkable inhibition toward C. maculatus $\alpha$-amylases. SDS-PAGE and MALDI-ToF analysis identified major proteins of approximately 5.0, 11.0, 20.0 and 55 kDa that showed $\alpha$-amylase inhibition. Results of in vivo bioassays using artificial seeds containing 1.0% (w/w) of baru crude extract revealed 40% cowpea weevil larvae mortality. These results provide evidence that several $\alpha$-amylase inhibitors classes, with biotechnological potential, can be isolated from a single plant species.
This study was conducted to investigate the genetic analysis of esterase isozymes in maize with tillers. The materials used for the study were stele tissue for five day old seedlings of IK inbred line with tiller and A-type inbred line with no tiller, their Fl and F,. The methods employed for the study were same as previous report by Lee and Choe. A total of thirteen isoesterase enzyme bands were identified and five zones were distinguised according to both migration distance and genetic segregation patterns. The E$\sub$0.3/, E$\sub$0.4/ and E$\sub$0.5/ loci appeared from orgin to 0.5cm migration distance were controlled by the two alleles in (IK/A-type)F$_2$ and the E$\sub$0.3/+E$\sub$0.4/ of variants was controlled by codominant alleles. The E$\sub$1.0/, E$\sub$1.2/, E$\sub$1.5/ and E$\sub$1.8/ loci appeared from 1.0cm to 1.8cm were also controlled by the two alleles. However, the null band was functioned alleles. The E$\sub$2.8/, E$\sub$3.0/ and E$\sub$3.5/ loci appeared from 2.8cm to 3.5cm migration distance were very active and near location. A total of individuals with two paried bands of these loci were more than those of three paired bands(x$^2$=0.327$\^$**/). The activity of bands appeared over 3.8cm were very low and these were controlled by the two alleles. In above results, genetic segregations of stele tissue of maize with tillers were suggested to be controlled by Mendelian genetic laws.
The full-length cDNA of the lumbrokinase fraction 6 (F6) protease gene of Lumbricus rubellus was amplified using an mRNA template, sequenced and expressed in E. coli cells. The F6 protease gene consisted of pro- and mature sequences by gene sequence analysis, and the protease was translated and modified into active mature polypeptide by N-terminal amino acid sequence analysis of the F6 protease. The pro-region of F6 protease consisted of the 44 residues from methionine-1 to lysine-44, and the mature polypeptide sequence (239 amino acid residues and one stop codon; 720 bp) started from isoleucine-45 and continued to the terminal residue. F6 protease gene clones having pro-mature sequence and mature sequence produced inclusion bodies in E. coli cells. When inclusion bodies were orally administrated rats, generated thrombus weight in the rat' venous was reduced by approximately 60% versus controls. When the inclusion bodies were solubilized in pepsin and/or trypsin solutions, the solubilized enzymes showed hemolytic activity in vitro. It was concluded the F6 protease has hemolytic activity, and that it is composed of pro- and mature regions.
Journal of the Society of Naval Architects of Korea
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v.42
no.6
s.144
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pp.631-636
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2005
One and three dimensional whipping response analyses of a naval surface combatant subjected to an underwater explosion bubble pulse were carried out to compare the efficiency and accuracy according to the modeling methods. In 1-D analysis, program UNDEXWHIP developed by KIMM was used, which is based on the thin-walled Timoshenko's beam theory and on the modal analysis method using wetted vibratory modes of the hull girder. In 3-D analysis, three finite element models were suggested using LS-DYNA/USA code, such as 3-D beam model considering geometric shape of wetted side shell, coarse and fine 3-D F.E. models. Through the comparison of results from the 1-D and 3-D analyses, it could be confirmed that 1-D analysis result is in good agreement with 3-D analysis ones, and that fine 3-D F.E. model, shock analysis one, is also used both in the shock response and whipping response analyses for the analyst effort and time savings.
Objective: This study was conducted to investigate basic information on genetic structure and characteristics of Limousin population in Hungary. Obtained results will be taken into consideration when adopting the new breeding strategy by the Association of Hungarian Limousin and Blonde d'Aquitaine Breeders (AHLBB). Methods: Genetic diversity and phylogenetic relationship of 3,443 Limousin cattle from 16 different herds were investigated by performing genotyping using 18 microsatellite markers. Amplified DNA was genotyped using an automated genetic analyzer. Results: Mean of effective alleles ($n_e$) of the populations was 3.77. Population C had the lowest number of effective alleles (3.01) and the lowest inbreeding coefficient ($F_{IS}$) value (-0.15). Principal component analysis of estimated genetic distance ($F_{ST}$) values (p<0.000) revealed two herds (C and E) distinct from the majority of other Limousin herds. The pairwise $F_{ST}$ values of population C compared to the others (0.066 to 0.120) fell into the range of moderate genetic distance: 0.050 to 0.150, while population E displayed also moderate genetic distance ($F_{ST}$ values in range 0.052 to 0.064) but only to six populations (G, H, J, L, N, and P). $F_{ST(C-E)}$ was 0.148, all other pairs -excluding C and E herds- displayed low genetic distance ($F_{ST}$<0.049). Population D, F, I, J, K, L, N, O, and P carried private alleles, which alleles belonged to 1.1% of the individuals. Most probable number of clusters (K) were 2 and 7 determined by Structure and BAPS software. Conclusion: This study showed useful genetic diversity and phylogenetic relationship data that can be utilized for the development of a new breeding strategy by AHLBB. The results presented could also contribute to the proper selection of animals for further whole genome scan studies of Limousins.
An, Hye Jung;Nam, Yun Min;Yang, Byung Wook;Park, Jong Dae;Yook, Chang Soo;Kim, Hyoung Chun;Ko, Sung Kwon
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.48
no.1
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pp.5-9
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2017
This study was carried out to obtain the basic information that can be used to index Acanthopanax in eleven species of China and Korea. The phytochemical components from the berry of Acanthopanax species, were measured by the HPLC analysis. Protocatechuic acid, eleutheroside B, eleutheroside E, scopolin, rutin, hyperoside, chiisanoside, oleanolic acid were found in ethanol extracts from the berry of Acanthopanax species. Total phenolic compound of Acanthopanax sessiliflorum f. chungbuensis berry (0.682%) was about seven times higher than those of Acanthopanax divaricatus f. distigmatis berry (0.091%). As a result, the order of the eleutheroside E content was 1) Acanthopanax sessiliflorum f. chungbuensis (0.554%), 2) A. divaricatus var. albeofructus (0.501%), 3) A. divaricatus f. flavi-flos (0.452%). And also, the order of the chiisanoside content was 1) Acanthopanax senticosus var. subinermis (8.434%), 2) A. seoulense (0.94%), 3) A. divaricatus f. flavi-flos (0.798%).
Soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed weight is a important trait in cultivar development. Objective of this study was to identify and confirm quantitative trait loci (QTLs) for seed weight variation in the F2 and F2:3 generations. QTLs for seed weight were identified in F2 and F2:3 generations using interval mapping (MapMaker/QTL) and single-factor analysis of variance (ANOVA). In the F2 plant generation (i.e., F3 seed), three markers, OPL9a, OPM7a, and OPAC12 were significantly (P<0.01) associated with seed weight QTLs. In the F2:3 plant row generation (i.e., F4 seed), five markers, OPA9a, OPG19, OPL9b, OPP11, and Sat_085 were significantly (P<0.01) associated with seed weight QTLs. Two markers, OPL9a and OPL9b were significantly (P<0.05) associated with seed weight QTLs in both generations. Two QTLs on USDA soybean linkage group C1 and R were identified in both F2 and F2:3 generations using interval mapping. The linkage group C1 QTL explained 16% of the variation in seed weight in both generations, and the linkage group R QTL explained 39% and 41% of the variation for F2 and F2:3 generation, respectively. The linkage group C2 QTL identified in F2:3 generation explained 14.9% of variation. Linkage groups C1, C2 and R had previously been identified as harbouring seed size QTLs. The consistency of QTLs across generations and populations indicates that marker-assisted selection is possible in a soybean breeding program.
We investigated the effects of sodium butyrate, a histone deacetylase inhibitor, on the cell cycle progression in human monocytic leukemia U937 cells. Exposure of U937 cells to sodium butyrate resulted in growth inhibition, G1 arrest of the cell cycle and induction of apoptosis in a dose-dependent manner as measured by MTT assay and flow cytometry analysis. The increase in G1 arrest was associated with the down-regulation in cyclin D1, E, A, cyclin-dependent kinase (Cdk) 4 and 6 expression, and up-regulation of Cdk inhibitors such as p21 and p27. Sodium butyrate treatment also inhibited the phosphorylation of retinoblastoma protein (pRB) and p130, however, the levels of transcription factors E2F-1 and E2F-4 were not markedly modulated. Furthermore, the down-regulation of phosphorylation of pRB and p130 by this compound was associated with enhanced binding of pRB and E2F-1, as well as p130 and E2F-4, respectively. Overall, the present results demonstrate a combined mechanism involving the inhibition of pRBjp130 phosphorylation and induction of Cdk inhibitors as targets for sodium butyrate that may explain some of its anti-cancer effects in U937 cells.
Let $f:f(z)=z+{\sum^{{\infty}}_{n=2}}a_nz^n$ be analytic in the open unit disc E. Then f is said to belong to the class $M_{\alpha}$ of alpha-convex functions, if it satisfies the condition ${\Re}\{(1-{{\alpha})}{\frac{zf^{\prime}(z)}{f(z)}}+{{\alpha}}{\frac{(zf^{\prime}(z))^{\prime})}{f^{\prime}(z)}}\}$ > 0, ($z{\in}E$). In this paper, we introduce and study q-analogue of the class $M_{\alpha}$ by using concepts of Quantum Analysis. It is shown that the functions in this new class $M(q,{\alpha})$ are q-starlike. A problem related to q-Bernardi operator is also investigated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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