• 제목/요약/키워드: Extracellular adenine deaminase

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세포의 Adenine Deaminase를 생산하는 방선균의 분리 및 Adenine Deaminase의 생산조건 (Isolation of an Actinomycetes Producing Extracellular Adenine Deaminase and Cultural Conditions of the Isolated Strain for the Enzyme Production)

  • 전홍기;이상옥;박정혜
    • 미생물학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.212-220
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    • 1987
  • 토양으로 부터 분리된 세포의 adenine deaminase를 생산하는 방선균인 J-275L 균주의 분류학적 특성 및 효소생산 조건이 검토도었다. J-275L 균주는 균사가 간상 또는 구상의 절편으로 단절되며, 세포벽의 아미노산 성부능로서 LL-diaminopimelic acid를 함유하고 mycolic acid를 함유하지 않아TEk. 분류학적 검색 결과 분리균 J-275L을 Nocardiovides sp. J-275L로 명명하였다. Nocardioides sp. J-275에 의한 세포외 adenine deaminasem이 생산조건을 검토한 결과, 효소생산을 위한 최적배지는 0.5% dextrin, 0.5% peptone, 1% yeast extract 및 0.2% $K_{2}HPO_{4}$로 설정되었으며, 배지의 최적 pH는 7.5이었다.

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Streptomyces sp. J-350P가 생산하는 세포외 Adenine Deaminase의 부분정제 및 성질 (Purification and Characterization of Extracellular Adenosine Deaminase from Streptomyces sp. J-350P)

  • 박정혜;전홍기
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권5호
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    • pp.306-311
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    • 1987
  • 황산암모늄 분획, 2차례의 DEAE-Cellulose, DEAE-Sephadex A-50 및 Sephacryl S-200 superfine gel filtration으로 정제한 결과 Streptomyces sp. J-350P의 세포외 adenine deaminase는 0.3%의 수율로서 1764배로 정제되었다. Streptomyces sp. J-350P의 세포외 adenine deaminase는 pH6.5~8.5 사이에서 안정하였고, pH7.0에서 10분간 열처리하였을 때 5$0^{\circ}C$까지는 안정하였다. 효소 활성 최적 pH와 온도는 pH6.5와 35$^{\circ}C$ 였다. Sephacryl S-200 superfine gel filtration 의한 분자량의 측정 결과 본 효소의 분자량은 약 36,000이었다.

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Streptomyces sp. J-350P가 생산하는 세포외 Adenine Deaminase의 효소학적 성질 (The Enzymatic Properties of Extracellular Adenine Deaminnse from Streptomyces sp. J-350P)

  • 전홍기;박정혜;김태숙
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권5호
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    • pp.312-318
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    • 1987
  • Streptomyces sp. J-350P가 생산하는 세포외 adenine deaminase의 adenine에 대한 Km 값은 5.8$\times$$10^{-5}$M로 측정되었으며 Arrhenius plots에 의한 효소의 활성화 에너지는 3.13 Kcal/mole로 측정되었다. 검토된 purine analogue중에서 6-chloropurine, 2,6-diaminopurine, 6-bromopurine, 4-aminopyrazolo (3,4-d) pyrimidine, 6-iodopurine, 그리고 8-bromoadenine은 본 효소에 의해 기질로 이용되었으며, 6-dimethylaminopurine은 adenine에 대한 경쟁적 저해제로 작용하였다. 본 효소는 0.1mM의 Fe$^{3+}$, Ag$^+$ 등에 의해 저해되었으며, 1mM의 $\alpha$, $\alpha$'-dipyridyl, Pentachiorophenol, p-CMB 등에 의해 저해되었다.

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Nocardioides sp. J-275L이 생산하는 세포외 Adenine Deaminase의 정제 및 성질 (Purification and Properties of Extracellular Adenine Deaminase from Nocardioides sp. J-257L)

  • 전홍기;박정혜;김태숙
    • 미생물학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.221-228
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    • 1987
  • Nocardioides sp. J-275L이 생산하는 세포의 adenine deaminase를 황산 암모늄 분획 , DEAE- Cellulose column c chromatography, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography 및 Sephacryl S-200 superfine gel filtration 등의 파 정에 의해 5.2%의 수율로서 3889.5배로 부분정제하였으며, 본 효소의 분자량은 Sephacry] S-200 superfine gel에 의해 39, O 000 부근으로 측정되었다. 본 효소의 안정 pH와 온도는 pH7.와 $40^{\circ}C$로 나타났으며, 15%의 glycerol이 효소를 안정화시키는데 효과적이었다. 효소의 활성 최적 pH와 온도는 pH 7. 5 $40^{\circ}C$였다. 효소의 ademne에 대한 Km 값은 $7.4\times 10^{-5}$M로 측정되었으며, 검토된 punne a analogue 중에서 6-chloropurine. 2,6-diaminopurine, 6-bromopurine, 4-aminopyrazolo[3,4-dJ pyridine, 8-azaadenine 이 기질로 이용되었다. 본 효소는 0.1mM의 $Cu^{2+}, Fe^{3+}, Pb^{2+}, Hg^{2+}, Ag^{+}$ 등에 의해 활성이 크게 저해되었으며, $Pb^{2+}, Hg^{2+}, Ag^{+}$에 의해 저해된 효소의 활성은 EDTA에 의해 회복되었다. 검토된 일반적인 효소 저해제 중에서 1mM의 $\alpha$,$\alpha$'-dipyridyl, pentachlorophenol, and pCMB 등에 의해 효소의 활성 이 크게 저해되는 것으로 나타났다.

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