• Journal of Plant Biology
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• 제38권1호
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• pp.19-24
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• 1995

The vir genes expression of Ti plasmid is induced by a family of related phenolic compounds. We investigated the effects of various phenolic compounds, Ti plasmids and hosts on the expression of the vir genes in the same type of octopine Ti plasmids, pTiKU12, pTiAch5 and pTiA6. The vir gene induction of pTiKU12 was remarkably stimulated by p-coumaric acid in relation to acetosyringone, but those of pTiAch5 and pTiA6 were more stimulated by acetosyringone than by p-coumaric acid. The effect of phenolic compound on the vir gene induction was different according to the kind of Ti plasmids. Also, the vir gene expression of A. tumefaciens KU913, which has pTiKU12 was about 6.2 times as much as that of A. tumefaciens KU915, which has pTiKU12 in KU12 host, in the presence of ferulic acid. But no difference was shown in the presence of p-coumaric acid. The vir gene induction abilities of phenolic compounds are different according to the kinds of phenolic compounds, Ti plasmids and hosts.

• KSBB Journal
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• 제5권1호
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• pp.49-58
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• 1990

대장균으로부터 alpha interferon의 생산과 분비를 유도하기 위해 대장균의 lipoprotein promoter, lactose promoter 및 operator와 lipoprotein의 signal seqquence를 가지는 vector에 alpha-IFN유전자를 cloning하여 발현 vector pIF-III-B와 vector pIF-III-C를 제작하였다.

• 한국정보통신학회논문지
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• 제15권4호
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• pp.1000-1006
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• 2011

본 연구에서는 vir유전자의 발현에 있어서 페놀화합물, Ti 플라스미드들의 종류(cctopine, nopaline), A. tumefaciens 들의 영향에 대해서 조사하였다. 9종류의 페놀화합물들을 3종류의 A. tumefaciens들과 3종류의 Ti 플라스미드들을 대상으로 조사하였다. Nopaline Ti 플라스미드를 포함하는 A. tumefaciens MW107에 존재하는 vir유전자는 4-hydroxyacetophenone, phenol, catechol, resorcinol, acetosyringone과 vanillin등 6종류의 페놀화합물들에 의해서 상대적으로 높게 발현되었다. Octopine Ti 플라스미드들을 포함하는 A. tumefaciens MW105와 MW108의 vir유전자들은 acetosyringone에서만 발현되었다. 따라서 vir유전자의 발현을 유도시키는 요인들은 Ti 플라스미드 종류, A. tumefaciens와 페놀화합물들의 종류에 따라서 서로 다르다는 결과를 얻었다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제14권2호
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• pp.1067-1072
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• 2013

Hiwi, a human homologue of the Piwi family, plays an important role in stem cell self-renewal and is overexpressed in various human tumors. This study aimed to determine whether an RNA interference-based strategy to suppress Hiwi expression could inhibit tumor growth in a xenograft mouse model. A rare population of $SSC^{lo}\;Alde^{br}$ cells was isolated and identified as lung cancer stem cells in our previous study. Plasmids containing U6 promoter-driven shRNAs against Hiwi or control plasmids were successfully established. The xenograft tumor model was generated by subcutaneously inoculating with lung cancer stem cell $SSC^{lo}\;Alde^{br}$ cells. After the tumor size reached about 8 mm in diameter, shRNA plasmids were injected into the mice via the tail vein three times a week for two weeks, then xenograft tumor growth was assessed. In nude mice, intravenously delivery of Hiwi shRNA plasmids significantly inhibited tumor growth compared to treatment with control scrambled shRNA plasmids or the vehicle PBS. No mice died during the experiment and no adverse events were observed in mice administered the plasmids. Moreover, delivery of Hiwi shRNA plasmids resulted in a significant suppressed expression of Hiwi and ALDH-1 in xenograft tumor samples, based on immunohistochemical analysis. Thus, shRNA-mediated Hiwi gene silencing in lung cancer stem cells by an effective in vivo gene delivery strategy appeared to be an effective therapeutic approach for lung cancer, and may provide some useful clues for RNAi gene therapy in solid cancers.

• 미생물학회지
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• 제27권2호
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• pp.85-91
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• 1989

조직특이적 및 일반적 유전자 발현에 미치는 SV40와 murine cytomegalovirus (MCMV) enhancer의 영향을 조사하였다. 이를 위하여 chloramphenicol acetyl transferase (CAT) 유전자의 아래쪽에 이들 enhancer들을 삽입한 재조합 플라스미드 들을 제조하였다. 원숭이세포(CV1PO)와 HeLa 세포에 이들 플라스미드들을 이입시킨 후, CAT 유전자가 발현되는 정도를 조사하였다. Enhancer가 없는 플라스미드에 비해 SV40와 MCMV enhancer는 CAT의 발현을 각각 20배와 150배로 가중시켰다. CAT 유전자의 앞에 있는 SV40 프로모터를 2.2kbp의 소성장호르몬(bGH) 유전자의 조절부위로 치환한 경우는 enhancer가 있어도 전혀 CAT 의 말현이 검출되지 않았다. 조절부위을 230 bp 로 짧게 하여 치환한 경우는, SV 40 enhancer 가 있을 때, CAT의 말현이 매우 증가하였다. 이와는 내조적으로 더 강한 MCMV enhancer는 bGH 특이적인 발현을 별로 증가시키지 못하였다.

• BMB Reports
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• 제31권5호
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• pp.503-507
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• 1998

To investigate the effects of the Vitreoscilla hemoglobin (VHb) gene on the production of a heterologous protein, a comparative expression system for VHb and ferritin was constructed. First, the VHb gene was inserted into the downstream and upstream regions of the ferritin gene to construct pHF2 and pHF3, respectively. Next, the two plasmids pACHB1 and pVUTFH10, having the VHb gene and the ferritin gene respectively, were constructed in order to express the two genes in different plasmids by using a coplasmid expression system. It was observed that the cell growth was improved in all strains containing the VHb gene. Furthermore, in our coplasmid expression system, the presence of the VHb gene increased production of the ferritin by 1.8 times, as much as that in a strain not having the VHb gene.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권6호
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• pp.637-641
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• 1992

한국 재래식 된장.간장 발효균 Bacillus sp. SSA3 균주의 expression vector를 개발하기 위해 Bacillus sp. SSA3의 chromosomal DNA로부터 유전자의 promoter 부위를 cloning 하였다. Recombinant plasmid를 제작하기 위하여 Bacillus sp. SSA3의 chromosomal DNA을 HindIII로 절단한 단편을 pGR71 plasmid의 CAT gene과 pUC18 plasmid의 $\beta$-galactosidase gene의 전방에 삽입시킨 후, E.coli JM109에 형질전환하였다.E. coli JM109의 chloramphenicol 내성 clones으로부터 6 recombinant plasmid를 선별하였다. 이들 선별된 plasmid는 Bacillus sp. SSA3의 expression vector로 사용시 각 재조합 plasmid 중에 삽입된 promoter의 염에 대한 영향의 정도를확인하기 위해 10% NaCl이 첨가된 LB medium상에서 배양하였을 때, 이들 중 Bacillus sp. SSA3의 4 clones은 융합 CAT gene의 발현이 강하게 감소되었으나 2 clones은 약하게 저해되었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제35권4호
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• pp.227-231
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• 1992

식물병원성 사상균에 대해 길항력을 갖는 그람음성 Pseudomonas fluorescens KR164의 chromosome에 그람 양성인 Bacillus thuringiensis(BT)의 HD-1 toxin gene을 삽입하기 위하여 이 유전자를 갖는 plasmids pSUPBT과 pSUPBTR을 작성하였다. Conjugation을 이용한 transposition으로 P. fluorescens KR164의 chromosome에 이 plasmids를 삽입시켜 BT toxin 유전자를 갖는 P. fluorescens KR164의 변이균주를 조제하였다. Southern blotting으로 균주의 cellular DNAs를 조사한 결과 모든 변이균주에서 한 개 이상의 BT toxin gene의 삽입이 확인 되었으며 독소단백질의 존재 역시 SDS-PAGE에 의해서 확인되었으며 이러한 독소단백질의 결정 생성은 전자현미경에서도 확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권6호
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• pp.575-582
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• 1991

글루타치온 생산증대를 도모하기 위하여 글루타치온 합성에 관여하는 효소들인 GSH-I 및 GSH-II 유전자들 pBR322 벡터에 클로닝하였다. gshI 유전자를 클로닝하기 위하여 GSH-I 효소활성이 결여된 GS903 균주를 분리하였다. E. coli K-12 염색체 DNA로부터 분리된 3.6Kb PstI DNA 절편을 pBR322 벡터에 클로닝하였다. gshII 유전자는 2.2Kb PstI-BamHI DNA 절편내에 존재하며 이 절편을 pUC13 벡터에 클로닝하였다. 플라스미드의 copy number와 gsh 유전자들을 포함하고 있는 삽입 DNA의 크기의 차이에 의한 gsh 유전자들의 발현 정도를 조사하기 위하여 pGH1090, pGH101, pGH200, pGH201, pLF4, pLF6 그리고 pGH300같은 여러 플라스미드를 사용함으로써 gshI 유전자의 발현이 의해 2배이상 증가하였다. 그러나 벡터 플라스미드내에 존재하는 gsh 유전자들을 포함하는 삽입 DNA의 크기의 차이에 의해서는 gsh 유전자들의 발현이 영향을 받지 않았다.

• KSBB Journal
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• 제11권4호
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• pp.504-509
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• 1996

Promoters which are useful for constructing expression vectors for lactic acid bacteria were obtained from the chromosomal DNA of Lactococcus lactis ssp. lactis MG1363. pBV5030, a promoter-selection vector, replicates in L. lactis and Escherichia coli and carries a promoterless chloramphenicol acetyltransferase gene (cat-86). After examining E. coli transformants which grew on LB media containing chloramphenicol (Cm, 20$\mu\textrm{g}$/mL) , many MG1363 derived DNA fragments which encompass promoter sequences were identified. Some recombinant E. coli cells can grow at the Cm concentration of 1,000$\mu\textrm{g}$/mL. When plasmids from those highly resistant E. coli cells were purified and introduced into L. lactis ssp. lactis MG1614 cells by electroporation, lactococcal transformants showing Cm resistance were obtained. So far, five plasmids with different promoter inserts were introduced into L. lactis MGl614 cells. The maximum level of Cm resistance in L. lactis MG1614 transformants was quite low (20$\mu\textrm{g}$/mL) when compared with that observed in recombinant E. coli cells harboring the same plasmids.