본 실험에서는 MRF가 다량 존재하는 RBL-2H3 세포주에 다양한 PKC isotype별 억제제를 처리하여 in vitro상에서 Na, K-ATPase $\alpha$1L3를 이용한 pull-down assay와 RBL-2H3 세포를 이용한 membrane fractionation을 실시하였다. 그 결과 HRF는 in vitro에서 $\alpha$1L3와 결합한다는 사실을 재확인 할 수 있었고 실제 세포주 내에서 Na,K-ATPase와 결합한다는 것을 알 수 있었다. 사용한 약물로부터 PKC $\alpha,\;\beta,\;\delta$뿐 아니라 protein phosphatase 2B(PP2B)도 HRF와 $\alpha$1L3의 결합에 관여한다는 사실을 알 수 있었다. 또한 이들 PKC, PP2B에 의해 인산화된 HRF 분자는 cytosolic fraction으로 이행할 수 있으며 이러한 결과는 탈인산화된 HRF가 Na,K-ATPase와 결합하여 Na, K-ATPase의 기능을 조절한다고 추정할 수 있다. 그러나 약물자체가 histamine 분비에 영향을 미칠 수 있으며 cytosolic HRF보다 exocytosis된 HRF가 histamine를 더 분비하도록 할 수 있으므로, 약물을 전처리한 세포에 외부에서 HRF를 첨가하여 histamine이 유리되는 정도가 어떻게 변화하는지를 HRF를 가하지 않은 결과와 비교해야 할 것이다.
침자시 해당부위에서 발현되는 특수한 수용체에 대한 반응을 형태학적으로 연구하고자 흰쥐의 족삼리(足三里) 부위에 침자를 한 다음 경혈부위 조직내의 비만세포의 변화와 침자주변 세포의 미세구조 변화를 관찰하였다. 침자시 형성된 진피층의 동공주변에서는 비만세포들이 정상군에 비하여 유의성있는 종가(p<0.01)를 하였다. 비만세포의 세포질에는 전자밀도와 형태가 다른 과립들이 충만되어 있었을 뿐만 아니라 세포질 밖으로 분비된 과립들도 관찰할 수 있었다. 침자 결과 형성된 골격근육층의 근섬유들은 근원섬유 마디의 밝은띠가 정상군에 비하여 않게 관찰되는 것으로 보아 침자시 자극에 의하여 근육섬유들이 수축하였음이 밝혀졌다. 이상의 결과로 보아 침자에 의하여 유도되는 유효한 생체반응은 진피층에서 관찰되는 비만세포의 수와 미세구적인 변화는 침자에 의한 경혈기능과 밀접한 상관관계를 가지고 있을 것으로 사료되며, 또한 근섬유를 수축시키는 형태학적 변화가 유도되는 것으로 보아, 경혈 부위는 기계적 자극에 반응하는 특수한 수용체와 밀접한 관련이 있는 것으로 사료된다.
The role of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ in modulating the IgE receptor-mediated histamine secretion in the streptolysin-o-permeabilized human cultured mast cell was investigated. The expression of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ proteins were regulated during human cultured mast cell differentiation, and a significant correlation was observed between the levels of expression of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ proteins and IgE receptor-mediated histamine secretion capability in human cultured mast cells. Antibodies against $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ effectively inhibited the IgE receptor-induced histamine release, and the concentration of anti-$G{\alpha}12$ antibody used to inhibit histamine secretion was shown to also inhibit the IgE receptor-mediated elevation of intracellular $Ca^2+$. Therefore, the results suggest that $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ play roles in modulating IgE receptor-activated $Ca^2+$ influx, thereby regulating histamine release in cultured human mast cells. This is the first report to show that $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ are involved in the regulation of $Ca^2+$ mediated exocytosis in human cultured mast cells.
Kim, Yong-Seok;Ahn, Jae-Sung;Kim, Semi;Kim, Hyun-Jin;Kim, Shin-Hee;Kang, Ju-Seop
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제22권2호
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pp.113-125
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2018
Exosomes are membranous vesicles of 30-150 nm in diameter that are derived from the exocytosis of the intraluminal vesicles of many cell types including immune cells, stem cells, cardiovascular cells and tumor cells. Exosomes participate in intercellular communication by delivering their contents to recipient cells, with or without direct contact between cells, and thereby influence physiological and pathological processes. They are present in various body fluids and contain proteins, nucleic acids, lipids, and microRNAs that can be transported to surrounding cells. Theragnosis is a concept in next-generation medicine that simultaneously combines accurate diagnostics with therapeutic effects. Molecular components in exosomes have been found to be related to certain diseases and treatment responses, indicating that they may have applications in diagnosis via molecular imaging and biomarker detection. In addition, recent studies have reported that exosomes have immunotherapeutic applications or can act as a drug delivery system for targeted therapies with drugs and biomolecules. In this review, we describe the formation, structure, and physiological roles of exosomes. We also discuss their roles in the pathogenesis and progression of diseases including neurodegenerative diseases, cardiovascular diseases, and cancer. The potential applications of exosomes for theragnostic purposes in various diseases are also discussed. This review summarizes the current knowledge about the physiological and pathological roles of exosomes as well as their diagnostic and therapeutic uses, including emerging exosome-based therapies that could not be applied until now.
Fritillaria pallidiflora의 전분체 미세구조와 신구인경의 세포간 대사물질의 이동을 전자현미경으로 관찰하였다. 기존의 인경과 새로 형성된 인경세포내 전분체는 내부 막구조에 있어서 뚜렷한 차이를 나타내었을 뿐만 아니라 대사물질의 세포간 이동도 활발히 이루어지고 있음을 관찰할 수 있었다. 엔도사이토시스와 엑소사이토시스 현상이 세포막에서 관찰되었으며 대사물질의 세포간 이동을 위해 원형질 연락에 있어서 염류수송 경로가 형성됨을 알 수 있었다. 또한 일단의 소포체들이 원형질 연락의 말단에 위치하고 있었는데 이는 세포간 물질 이동에 이들이 관여하고 있음을 알 수 있었다. 이러한 결과는 F. pallidiflora의 신구 인경형성과 발달에 미치는 기작을 연구하는데 유용하게 이용될 수 있는 것으로 생각된다.
There are several physiological and pharmacological evidences indicating that opening of voltage dependent $Ca^{2+}$ channels play a critical role in induction of acrosome reaction in mammalian sperm. We determined the intracellular free $Ca^{2+}$ concentration in ejaculated goat sperm using a fluorescent, $Ca^{2+}$-specific probe, Fura2/AM, after the suspension of sperm in KRB medium, capable of sustaining capacitation and the acrosome reaction. We used nifedipine, D-600 and diltiazem, the $Ca^{2+}$ channel antagonists belonging to the classes of dihydropyridines, phenylalkylamines and benzothiazepines, to investigate the possibility that L-type voltage gated $Ca^{2+}$ channels play a role in the progesterone-stimulated exocytotic response. Progesterone promoted a rise in intracellular $Ca^{2+}$ in goat sperm and addition of nifedipine (100 nM) just prior to progesterone induction, significantly inhibited both intracellular $Ca^{2+}$ rise and exocytosis suggesting that $Ca^{2+}$ channels are involved in the process. However, the intracellular $Ca^{2+}$ increase during the process of capacitation was not affected with the addition of nifedipine suggesting a role of focal channel for $Ca^{2+}$ during capacitation. Studies using monensin and nigericin, two monovalent cation ionophores showed that an influx of $Na^+$ also may play a role in the opening of $Ca^{2+}$ channels. These results strongly suggests that the entry of $Ca^{2+}$ channels with characteristics similar to those of L-type, voltage-sensitive $Ca^{2+}$ channels found in cardiac and skeletal muscle, is a crucial step in the sequence of events leading to progesterone induced acrosome reaction in goat sperm.
인삼(Panax ginseng C. A. Meyer) 캘러스로부터 분리한 원형질체를 배양하면서 배양시간에 따른 원형질체의 미세구조 변화와 원형질막 표면을 전자현미경으로 조사하였다. 3일 동안 배양된 원형질체에서는 조면소포체, 리보좀, 골기체, 미토콘드리아, 전색소체 등의 세포기관들의 수가 증가하였고 미소관도 관찰되었다. 골기체 주변에는 많은 골기소낭들이 형성되어 세포질 전반에 존재하였고, 이들 소낭들은 원형질막 바깥으로 돌출되어 돌기를 형성하기도 하였다. 소포체에서 유래된 액포속에는 액포의 함입에 의하여 골기소낭들이 들어 있는데, 이들 액포들은 융합에 의한 exocytosis로 원형질막 근처로 이동하여 원형질막과 융합한 다음, 세포벽 물질을 원형질막 바깥으로 방출하여 원형질막에 침적하였다. 전색소체는 많은 전분립을 함유하고 있었고, 미소관들은 원형질막 근처에서 막과 평형으로 배열하고 있었다. 배양된 원형질체의 표면에는 섬유소로 구성되어 있는 원섬유들이 서로 연결되어 있는 것이 관찰되었다.
본 연구에서는 급속동결 deep etching법을 이용하여 흰쥐에서 담세관주위세포질에 있는 미세사와 용해소체 및 소포등 세포내소기관들이 어떻게 담즙분비에 관여하는지를 알아 보고자 하였다. Taurocholic acid를 투여한 군은 정상군에 있어서와 같이 미세사가 담세관 주위를 둘러싸면서 담세관 원형질막과 다른 세포내소기관에 부착되어 있었다. 이들 담세관 주위의 미세사들은 미세융모속에서 다발을 이루고 있었으며 담세관 둘레에서는 관주위직을 형성하면서 연접복합체에 결합되어 있었다. 미세사는 또한 담세관 원형질막과 소포사이에 걸쳐있는 것도 관찰되었다. 이상의 소견으로 미루어 미세사는 담세관에서의 담즙의 분비를 돕는 소기관임을 알 수 있는데 특히 담세관에 융합할 수 있도록 소포의 전위를 유도하는 기구로서 작용할 것으로 추정된다.
Porcine juvenile pustular psoriasiform dermatitis (PJPPD) is a disease of young pigs and characterized by nonpruritic round eruption of skin. The cause of this disease is yet undetermined but is presumed to be genetic predisposition. There may be few opportunities for veterinarian to detect this disease compared with actual situation in field because these lesions resolve spontaneously in two months. The authors detected spontaneous PJPPD case and performed clinical and pathological studies on three pigs from one farm. The specific skin lesions were observed in the forty-day old pigs of mixed breed, which were produced by the sows received semen from the same boar, restrictively. However, there was no skin lesion of pigs in suckling or fattening periods. Grossly, lesions were commonly found on the ventral abdominal part as a papule and were spreaded to the skin of whole body. With the spreading of lesions centrifugally, skin was showed as a umbilicated plaques or mosaic pattern with a few pustules or crusts. Microscopically, the most prominent lesion was the psoriasiform hyperplasia with acanthosis, down growth of rete ridges, exocytosis of eosinophils and neutrophils, ballooning degeneration of superficial epidermis, and koilocytic degeneration of keratinocytes. Additionally, there were moderate dermal edema and severe mixed cellular infiltration, especially eosinophils. No infectious agent which can cause the skin lesion, was detected or cultured, and no lesion caused by infectious agents was also observed, pathologically. With pathological results of this study, it is supposed that pathogenesis or severity of PJPPD may be related to the infiltration of eosinophil or hypersensitivity.
Ding, Xiangming;Yu, Wenbo;Liu, Ming;Shen, ShuQing;Chen, Fang;Cao, Lihuan;Wan, Bo;Yu, Long
Molecules and Cells
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제25권3호
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pp.385-389
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2008
Septins are a family of filament-forming GTP-binding proteins involved in a variety of cellular process such as cytokinesis, exocytosis, and membrane dynamics. Here we report the biochemical and immunocytochemical characterization of a recently identified mammalian septin, SEPT12. SEPT12 binds GTP in vitro, and a mutation (Gly56 to Asn) in the GTP-binding motif abolished binding. Immunocytochemical analysis revealed that wild-type SEPT12 formed filamentous structures when transiently expressed in Hela cells whereas $SEPT12^{G56A}$ generated large aggregates. In addition, wild-type SEPT12 failed to form filaments when coexpressed with $SEPT12^{G56A}$. We also observed that GTP-binding by SEPT12 is required for interaction with SEPT11 but not with itself.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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