• Applied Biological Chemistry
• /
• 제12권
• /
• pp.99-105
• /
• 1969

Trichoderma $(O_2-1)$의 조효소(粗酵素)를 Ethanol 및 Acetone 농도별(濃度別)에 따른 회수율(回收率)을 실험(實驗)한 결과(結果) 각(各) cellulase는 현저(顯著)한 차이(差異)가 나타났다. 즉(卽) Ethanol을 사용(使用)하였을 경우 ${\beta}-glucosidase$는 60% C.M.C분해효소(分解酵素), 여지붕괴(濾紙崩壞濾) 효소(酵素)는 80% 일때가 좋았고 Acetone을 사용(使用)하였을 경우 ${\beta}-glucosidase$는 60% 여지붕괴(濾紙崩壞濾) 효소(酵素)는 80%, C.M.C분해효소(分解酵索)는 90% 농도(濃度)일때가 좋은 결과(結果)를 나타내었다. 조정제(粗精製)한 Cellulase를 Silicagel, cellulose powder, Gauze를 사용(使用)한 column chromatography에 의(依)하여 분별(分別)란 결과(結果) 수치(數個)의 구분(區分)으로 분별(分別) 할 수 있었다. C.M.C 분해효소(分解酵索)와 Avicel 분해효소(分解酵索), ${\beta}-glucosidase$의 대부분(大部分)은 흡착(吸着)이 되지않고 유출(流出)되었으며, 대부분(大部分)의 여지붕괴효소(濾紙崩壞濾酵素)와 일부분(一部分)의 Avicel분해효소(分解酵索)는 흡착(吸着)되었다가 증류수(蒸溜水)로서 유출(流出)함으로씨 용출(溶出)되었다. 따라서 C.M.C 분해효소(分解酵索)와 여지붕괴효소(濾紙崩壞濾酵素)는 상이(相異)한 Cellulase 성분(咸分)임을 알았다. 또 C.M.C 분해효소(分解酵索)와 Avicel 분해효소(分解酵索)는 용출구분(溶出區分)에 있어 peak가 상이(相異)한 다른 구분(區分)에서 상대활성(相對活性)이 다르므로 역시 별개(別個)의 종류(種類)로 구분(區分)되었다. 또 여지붕괴효소(濾紙崩壞濾酵素)와 Cellulose powder (여지분말(濾紙粉沫)) 당화효소(糖化酵素)는 흡착구분(吸着區分)과 비흡착(非吸着) 구분(區分)으로 분별(分別)되니 사이(相異)한 Cellulase 성분(成分)이라고 생각된다. 따라서 Trichoderma viride $(O_2-1)$의 Cellulase는 적어도 3종이상(種以上)의 Cellulase 성분(成分)으로 되어 있다고 추찰(推察)된다.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제40권2호
• /
• pp.107-111
• /
• 1997

Protopectinase(PPase)는 식물 세포벽의 protopectin을 분해하는 효소로서 식품의 가공에 이용될 수 있는 효소이다. PPase의 산업적 응용을 위하여 PPase를 생산하는 미생물 Bacillus subtilis IFO 12113의 배양여액에 acetone, methanol, ethanol을 각각 처리하여 PPase를 회수하는 연구를 수행하였다. Acetone의 경우, 배양여액 대 acetone을 1:1 (v/v) 비율로 첨가했을 때 효소는 59.2%가 회수되었으며 정제도는 1.7배 이었다. Methanol의 경우, 1:2(v/v) 비율로 처리하였을 때, 효소는 100% 회수되었으며 비활성도로 본 정제도는 4.0배 증가하였다. Ethanol의 경우에 1 :0.5 (v/v) 비율로 처리한 것을 원심분리시켜 침전물을 제거하고, 그 상등액에 최종 ethanol 비율을 1:1(v/v)까지 처리했을 때, 효소의 회수율은 68%를 나타냈으며 비활성도는 13.5배 증가하였다. 세균의 배양여액으로부터 PPase의 회수에는 methanol 처리가 가장 효율적이었으나, 산업적 응용을 위하여 정제효과까지 고려하면 ethanol처리가 가장 적절하였다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제25권4호
• /
• pp.701-707
• /
• 1996

Aspergillus niger SFN-416으로 부터 생성한 xylanase I를 분리.정제하여 특성을 조사하였다. Aspergillus niger SFN-416의 배양액을 ethanol(70%) 침전, $(NH_4)_2-SO_4$(30~90%) 침전, Sephadex G-100 chromatography 및 DEAE-Sephacel ion chromatography 등의 정제과정을 거친 결과, 10.2배 정제되었고, 정제효소의 최적 활성온도는 $50^{\circ}C$ 였다.최적 pH는 3.5이었고, pH 안정성은 6.0 이상에서 활성이 급격히 감소하였다. 또한 금속이온에 대한 효소의 활성은 대부분 억제를 보였고, 특히 $Hg^{2+}$는 18.5%로 가장 낮은 상대활성을 보였지만, $Fe^{2+}$는 117.0%, $Mn^{2+}$는 129.9%로 오히려 효소활성이 증가되었다. 정제 효소의 분자량은 SDS-PAGE에 의하여 31,000 daltons이 었으며, 유기용매에 대한 활성과 안정성은 10%의 methanol, ethanol, isopropanol 및 1-butanol 대하여 모두 낮은 활성을 나타내어 유기용매에는 안정하지 않는 것으로 생각된다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제29권2호
• /
• pp.312-315
• /
• 2000

본 연구에서는 우리밀로부터 대식세포 식작용 활성화시키는 물질을 탐색하는 과정에서 고분밀의 EA 추출물이 가장 높은 식작용 활성 증강효과를 보임을 알았고, EA 추출물을 정성한 후 순수 분리 정제하여 대식세포 활성 증강효과를 나타내는 단일 물질을 찾고자 하였다. TLC 방법을 이용하여 ASW와 고분밀의 EA 추출물을 정성한 결과 약 5개 정도의 band를 확인한 후, column chromatography를 이용하여 EA 추출물을 분획하였다. 1차 column chromatography만으로는 single fractionation이 어려워 분획물을 fraction A, B, C, D로 분류하여 식작용 활성 증강효과를 측정하였다. 대분류된 각 fraction의 식작용 활성 증강효과를 측정한 결과 고분밀의 fraction b가 대부분의 활성을 가진 분획으로 사료되었다. 2차 column chromatography를 통해 fraction b만응 분리 하였으며, 구조결정 실험과 동물실험을 추가로 시행하여 fraction b의 효과를 입증할 것이다.

• 한국해양바이오학회지
• /
• 제12권2호
• /
• pp.81-90
• /
• 2020

Sialic acid, which is contained in about 60-160 mg/kg in the edible bird's nest (EBN), is known to facilitate in the proper formation of synapses and improve memory function. The objective of this study is to extract effectively the sialic acid from edible bird's nest using affinity bead technology (ABT). After preparing the non-polar polymeric bead "KJM-278-28A" having a porous network structure, and then desorbed sialic acid was concentrated and dried. The analysis of the physicochemical properties of bead "KJM-278-28A" showed that the particle size was 400-700 ㎛, the moisture holding capacity was 67-70%, the surface area (BET) was 705-900 ㎡/g, and the average pore diameter 70-87 Å. The adsorption capacity of the bead "KJM-278-28A" for sialic acid was shown a strong physical force to bind sialic acid to the bead surface of 400 mg/L. In addition, as a result of analyzing the adsorption and desorption effects of sialic acid on water, ethanol, and 10% ethanol on the bead, it was confirmed that desorption effectively occurs from the beads when only ethanol is used. As a result of HPLC measurement of the separated sialic acid solution, a total of four sialic acid peaks of N-acetyl-neuraminic acid (Neu5Ac), α,β-anomer of Neu5Ac and N-glycoly-neuraminic acid were identified. Through these results, it was confirmed that it is possible to separate sialic acid from EBN extract with efficient and high yield when using ABT.

• 한국산림과학회지
• /
• 제35권1호
• /
• pp.24-32
• /
• 1977

아염소산염법(亞鹽素酸鹽法)에 의하여 대부분(大部分) 탈(脫) lignin된 holocellulose를 얻었다. Alkali농도별(濃度別)의 추출(抽出)에서는 5% KOH로 3회추출(回抽出)하여도 일부(一部)의 xylan이 잔존(殘存)하며 타(他)의 hemicellulose와 cellulose의 분해성물질(分解生成物)이 얻어지며, 10%와 24% KOH추출(抽出)은 그와 같이 좋은 결과(結果)가 얻어졌다. Xylan의 침전단리(沈澱單離)에 다량(多量)의 ethanol을 사용(使用)하는 상법(常法)보다는 약(約) 1/10로 농축(濃縮)하여 cellophane막(膜)에 의한 투석법(透析法)으로 소량(少量)의 ethanol이라도 회수율(回收率)과 높은 순도(純度)의 xylan이 얻어졌다. Glucornannan의 단리(單離)에 있어서 5% KOH 추출잔사(抽出殘査)는 xyJan함유량(含有量)이 많고 10%와 24% KOH 추출잔사(抽出殘査)는 그의 같은 결과(結果)이며, glucose와 mannose의 비(比)는 약(約) 1 : 1이다. Fehling용액정제(溶液精製)는 비교적(比較的) 순수(純粹)한 xylan을 얻지만, 분화분해(孵化分解), 조작(操作)의 번잡(煩雜) 및 회수율(回收率)이 낫고, 그다지 좋은 방법(方法)은 아니다. Ethanol적하법(滴下法)은 1일(日)정제(精製)라도 고수율(高收率) 및 고순도(高純度)의 xylan이 얻어지고 조작(操作)의 영역(容易)등을 고려(考慮)하여 대단히 우수한 xylan 정제법(精製法)이다. 그러나 양정제법(兩精製法)으로 arabinose잔기(殘基)를 완전(完全)히 제거(除去)할 수는 없었다. 이것은 후보(後報)에 검토(檢討)를 보고(報告)한다.

• 펄프종이기술
• /
• 제42권4호
• /
• pp.64-70
• /
• 2010

In this study, hemicelluloses were pre-extracted from mixed hardwood chips using sodium hydroxide solution and then they were isolated from pre-extractives by using various solvents. Isolation was conducted by precipitating hemicelluloses with isopropanol, ethanol, 1,4-dioxane, dimethylsulfoxide (DMSO) and potassium hydroxide (KOH), respectively. The precipitate yield on alkali pre-extractives was the highest when hemicelluloses were isolated by DMSO and then precipitated with ethanol. Most precipitates were yellow colored. The efficiency of isolation was evaluated by analysing the characteristics of isolated hemicelluloses. Isolation using DMSO, KOH and 1,4-dioxane ($80^{\circ}C$) showed rather high efficiency. The highest total separation efficiency was about 77% when alkali pre-extractives were reacted with KOH and precipitated with ethanol. The quantity and purity of isolated hemicelluloses were affected by the solvent type.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
• /
• 제7권6호
• /
• pp.375-379
• /
• 2002

Methyl mercaptan oxidase was successfully induced in Thiobacillus thioparus TK-m using methyl mercaptan gas, and was purified for the detection of mercaptans. The purification procedure Involved a DEAE (diethylaminoethyl) -Sephacel, or Superose 12, column chromatography with recovery yields of 47.5 and 48.5%, and specific activities of 374 and 1240.8 units/mg-protein, respectively, The molecular weight of the purified methyl mercaptan oxidase was 66.1kDa, as determined by SDS-PAGE. The extract, from gel filtration chromatography oxidizes methyl mercaptan, producing formaldehyde, which can be easily detected by the purpald-coloring method. The optimized temperature for activity was found to be at 55$\^{C}$. This enzyme was inhibited by both NH$_4$Cl and (NH$_4$)$_2$SO$_4$, but was unaffected by either KCl or NaCl at less than 200 mM. With K$_2$SO$_4$, the activity decreased at 20 mM, but recovered at 150 mM. In the presence of methanol, full activity was maintained, but decreased in the presence of glycerin, ethanol and acetone 43, 78 and 75%, respectively.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제28권4호
• /
• pp.214-218
• /
• 2000

The inulinase producing microorganism was isolated from soil and tentatively identified as Arthrobacter protophormiae/ramosus. Inulinase was pruified by ethanol precipitation, DEAE-Sephadex ion exchange chromatography and Sephadex gel filtration chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was 34 kDa. The specific activity, yield and purity were 31.5 Unit/mg, 19.5% and 18.5 fold, respectively. Optimal pH and temperature for reaction of the purified inulinase were 8.5 and $55^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at pH 7.5, below$ 55^{\circ}C$, and the activity was stimulated Mg2+.

• 한국임상수의학회지
• /
• 제11권1호
• /
• pp.389-392
• /
• 1994

To purify transforming growth factor type beta(TGF-$\beta$) in canine platelets, Sephadex G-75 gel filtration and semipreparative HPLC were carried out. The column of $2.0 {\times}120cm$ was used for gel filtration and one inch semipreparative column filled with SP-Toyopeal for HPLC. Electrophoresis and bioassay using African green monkey kidney cell were used for identification of TGF-$\beta$ Crude TGF-$\beta$ of 2.75mg was extracted from 5.2g of the platelets by the treatment of acid/ethanol. In gel filtration of crude TGF-$\beta$, 4 peaks were observed at the detection of spectrophotometer at 280nm. Electrophoresis and bioassay identified the 3rd peak TGF-$\beta$. Linear gradient elution from 0 to 3M NaCl in sornipreparative HPLC showed TGF-$\beta$ at 1.5M NaCl. Gel filtration was less expensive and useful method for the purification of TGF-$\beta$.