본 연구는 가식부위가 20~30%로 과즙 착즙 시 주로 버려지고 있으나 석류의 부위별 추출물 중 가장 항산화성이 우수한 천연식품 소재인 석류 내피를 에탄올로 추출하여 천연항산화제로서의 활용 가능성을 조사하였다. 석류 내피 추출물을 극성이 낮은 용매에서 극성이 높은 용매로 순차적으로 계통 분획하여 항산화능을 분석하였다. 각 측정 방법 별로 항산화 활성에 있어 약간의 차이를 보였으나 전반적으로 ethyl acetate 분획의 항산화능이 높게 측정되었다. DPPH 라디칼 소거활성 측정 결과 ethyl acetate와 butanol 분획물에서 $IC_{50}$이 각각 2.40 ${\mu}g$/mL, 2.88 ${\mu}g$/mL로 기준 물질인 ascorbic acid와 유사한 항산화 활성을 나타내는 것으로 나타났다. Superoxide anion 소거활성에서 ethyl acetate과 butanol 분획물의 $IC_{50}$은 각각 58.94 ${\mu}g$/mL, 61.91 ${\mu}g$/mL로 기준물질인 tannin acid보다 항산화능이 우수하였다. $ABTS^+$ 소거활성에서 ethyl acetate와 butanol 분획물의 $IC_{50}$은 각각 39.26 ${\mu}g$/mL, 40.95 ${\mu}g$/mL로 나타났으며 환원력을 측정한 결과 ethyl acetate 분획물(0.1 mg/mL)의 흡광도가 1.404로 기준물질인 ascorbic acid보다 활성이 높게 측정되었다. SOD 유사활성과 아질산염 소거능에서는 유사한 결과를 나타냈는데 SOD 유사활성은 $42.88{\pm}0.66%$(dichloromethane), $15.43{\pm}0.85%$(butanol), $12.82{\pm}0.68%$(water)이었으며 아질산염 소거능에서 dichloromethane 분획물의 $IC_{50}$은 115.54 ${\mu}g$/mL로 기준물질인 ascorbic acid보다 높게 나타났다. 따라서 본 연구결과 석류 내피 추출물은 높은 항산화 활성을 가지고 있으며, 폐자원으로써 버려지는 석류 내피는 식품첨가물 등의 기능성 소재로의 이용가능성이 있을 것으로 여겨진다.
토종다래 순의 무기질은 Ca, K, P 순으로 많았으며, 아미노산은 glutamic acid, aspartic acid가 많이 함유되어 있었다. 지방산 함량은 ${\alpha}$-linolenic acid와 linoleic acid 등의 불포화지방산 함유량이 높았으며, 유리당은 sucrose의 함량이 상대적으로 높았다. Vitamin B 그룹에서는 vitamin $B_6$가 17.99mg/100 g으로 가장 높았고, vitamin C와 ${\beta}$-carotene 함량은 각각 42.57mg/100 g, $390.69{\mu}g/100g$이었다. Total phenolics는 40% EtOH 추출물이 198.08 mg GAE/g으로 가장 높았으며, ABTS radical 소거활성 및 DPPH radical 소거 활성에서는 농도 의존적으로 radical 소거 활성을 보였다. 지질 과산화 억제활성(MDA contents)과 세포내 산화적 스트레스 생성 억제효과에서는 지질과산화를 막아주며 신경세포 손상을 일정 수준에서 억제해 주는 것으로 확인하였다. 본 연구 결과를 종합해볼 때, 상대적으로 높은 phenolics를 함유한 토종다래순은 우수한 영양학적인 구성과 in vitro antioxidant activities를 기초로 한 고부가가치 건강지향식품 소재로서의 활용가치가 높다고 판단된다.
일반적으로 많이 사용하고 있는 한약재 중 항산화효과가 있는 대상을 선발하였고 그 중 효과가 우수한 건칠을 대상으로 항산화물질을 분리, 효과를 측정하였다. 건칠(Rhus verniciflua STOKES)은 옻나무과(Anacardiaceae)에 속하는 옻나무(Rhus verniciflua STOKES)의 수액으로 한방에서는 구충, 복통, 통경, 변비의 목적으로 사용되어왔다. 옻나무 에탄올추출물은 돈지와 팜유를 기질로 Rancimat test에서 항산화효과가 인정되었으며, 용매의 극성을 각각 달리하여 분획하였을때 chloroform 층에서 항산화 활성이 가장 높았다. 이 분획물을 다시 phenolic compound를 중심으로 용매 분획한 후, 활성이 높은 free phenolic acid부분을 silica gelcolumn chromatography하여 RCF-11 분획하였으며, 이 분획물을 돈지, 팜유 및 대두유에 각각 200 ppm 수준으로 첨가 하였을 때 AI (antioxidant index: 추출물을 넣은 유지의 유도기간을 기질유지의 유도기간으로 나눈 값)는 각각 5.57, 1.53 및 1.54를 나타내었다. 이것은 같은 농도에서의 ${\delta}-tocopherol$, BHT, BHA 보다 동물성유지인 돈지에서는 4배, 식물성유인 팜유와 콩기름에서는 1.5배 정도 효과가 우수하였다. RCF-11에 항산화작용이 알려진 ascorbic acid, citric acid, ${\delta}-tocopherol$ 200 ppm을 첨가한 후 분획물의 농도를 달리해가며 동물성유지와 식물성유지에 적용해보았다. 식물성유에서는 ascorbic acid를 첨가했을 때 단독으로 사용했을 때보다 AI가 1.5배 정도 상승효과가 있었으며, 동물성유에서는 ${\delta}-tocopherol$를 첨가했을 때 단독으로 사용했을 때보다 AI가 2배 정도 상승하였다. Rancimat을 통해 항산화 활성이 확인 된 옻나무 75% ethanol 추출물의 free phenolic acid 성분은 TLC, UV spectra를 통해 본 결과 flavanone이나 flavone계 화합물로 추정되며, 앞으로 그 원인물질에 대한 구조동정이 요구된다.
대두유에 율피의 용매분획별(에테르, 부탄올, 물) 추출물과 tocopherol, BHA를 각각 0.02% 첨가한 후 자동산화 및 가열 산화시 항산화효과를 비교하였다. 1. 자동산화시 과산화물가를 통한 항산화력 비교에서 $45^{\circ}C$에서 42일간 저장한 경우 부탄올추출물 > 에테르추출물 > 무첨가구 > BHA > 토코페롤 순으로 항산화력이 있었고, $60^{\circ}C$에서 32일간 저장한 경우에도 부탄올 추출물이 강한 항산화력을 보였으며, 에테르추출물은 무첨가구와 큰 차이가 없었다. 2. 가열산화의 경우 에테르추출물이 우수한 항산화력을 나타내었다. 3. 추출물의 용매별 항산화성분의 분석결과 에테르추출물에는 ellagic acid, quercetin, morin, naringenin, flavanol로서 주요성분은 ellagic acid이었다. 이들 성분의 총량은 에테르추출물 49.09%(w/w), 부탄올추출물 76.26%(w/w)로서 부탄올 추출물에 폴리페놀성분이 다량 함유되어있어 우수한 항산화효과에 영향을 미친 것으로 판단된다. 부탄올추출물에는 ellagic acid, naringenin, gallic acid, flavanol이 있었으며, 주요성분은 naringenin, gallic acid로서 이들 성분들이 항산화 효과에 영향을 미친 것으로 사료된다.
토양으로부터 levan을 분해하여 단일종의 fructooligosaccharide를 생산하는 새로운 미생물을 분리 선별하여 본 연구의 공시균주로 선택하였다. Levanase 생산을 위한 최적 배지조성은 0.5% levan, 0.3% yeast extract 0.3% $NaNO_3$, 0.1% $K_2HPO_4$, 0.05% NaCl(pH 8.0)이었으며, 500ml용 shaking flask에 배지 50ml를 넣어 $30^{\circ}C$에서 54시간 배양시켰을 때 목적효소의 생산이 최대에 도달하였다. Levanase에 의해 생성되는 생성물은 단일종의 oligo당임이 확인되었으며 측쇄가 많은 levan으로부터는 소량의 측쇄구조를 가진 oligosaccharide로 추정되는 미지의 물질이 부산물로 생성되었다. 생성 oligo당을 순수하게 정제하여 HPLC 및 ESI-MASS로 중합도를 조사한 결과 DP가 7인 levanheptaose임이 판명되었다.
Advanced glycation end products (AGEs) such as $N^{\varepsilon}$-(carboxy-methyl)lysine (CML) have been implicated in the development of diabetic nephropathy. The aim of this study was to investigate the inhibitory effects of ethanolic extract of Aster koraiensis (AKE) on AGEs formation and AGEs-collagen cross-linking in vitro and CMLs formation in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. AKE significantly inhibited AGEs formation ($IC_{50}$ value of $18.74{\mu}g/mL$) and AGEs-collagen cross-linking ($IC_{50}$ value of 0.274 mg/mL) in vitro than the well-known glycation inhibitor aminoguanidine ($IC_{50}$ value of $72.12{\mu}g/mL$ and 1.99 mg/mL, respectively). AKE (100 mg/kg per day) was given to diabetic rats for 9 weeks. In STZ-induced diabetic rats, severe hyperglycemia was developed, and urinary CMLs and plasma CMLs were markedly increased. Immunohistochemical stain revealed that CMLs were accumulated within renal glomerulus in STZ-induced diabetic rats. However, AKE significantly reduced urinary CMLs and plasma CMLs in diabetic rats. CMLs accumulation was inhibited by AKE treatment in the renal glomerulus. These results suggest that AKE had an inhibitory effect of AGE accumulation in the glomeruli of diabetic rat and could be an inhibitor of AGE-induced protein cross-linking. The oral administration of AKE may significantly help to prevent the progression of diabetic nephropathy in patients with diabetes.
Objectives : The present study investigated the anti-nociceptive and anti-inflammatory properties of the water extract of Geranii Herba (The stem and leaves of Geranium thunbergii Sieb. et Zucc.) in the animal models of pain and inflammation. Methods : We evaluated the anti-nociceptive and anti-inflammatory activities of Geranii Herba extract (GHE) using the writhing test, tail-flick test, carrageenan-induced paw edema and xylene-induced ear edema models. Two dose of GHE (100 and 1000 mg/kg) was administrated orally to the mice. Control group received normal saline and ibuprofen (50 mg/kg) was used as a positive control drug. Results : GHE 1000 mg/kg treated group showed an increased tail-flick response time in the tail-flick test and inhibitory effect on writhing syndrome induced by acetic acid. Treatment with GHE at the same dose inhibited ear edema induced by xylene and foot edema induced by carrageenan toxicity. Conclusion : The results demonstrate that GHE has anti-nociceptive and anti-inflammatory effects in the various models of nociception and inflammation.
BACKGROUND/OBJECTIVE: Centella asiatica, also known as Gotu kola, is a tropical medicinal plant native to Madagascar, Southeast Asia, and South Africa. It is well known to have biological activities, including wound healing, anti-inflammatory, antidiabetic, cytotoxic, and antioxidant effects. The purpose of this study was to determine the efficacy of extracts of C. asiatica against age-related eye degeneration and to examine their physiological activities. MATERIALS/METHODS: To determine the effects of CA-HE50 (C. asiatica 50% EtOH extract) on retinal pigment cells, we assessed the cytotoxicity of CoCl2 and oxidized-A2E in ARPE-19 cells and observed the protective effects of CA-HE50 against N-methyl-N-nitrosourea (MNU)-induced retinal damage in C57BL/6 mice. In particular, we measured factors related to apoptosis and anti-oxidation and the protein levels of rhodopsin/opsin. We also measured glucose uptake to characterize glucose metabolism, a major factor in cell protection. RESULTS: Induction of cytotoxicity with CoCl2 and oxidized-A2E inhibited decreases in the viability of ARPE-19 cells when CA-HE50 was administered, and promoted glucose uptake under normal conditions (P < 0.05). In addition, CA-HE50 inhibited degeneration/apoptosis of the retina in the context of MNU-induced toxicity (P < 0.05). In particular, CA-HE50 at 200 mg/kg inhibited the cleavage of pro-caspase-3 and pro-poly (ADP-ribose)-polymerase and maintained the expressions of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 and heme oxygenase-1 similar to normal control levels. Rhodopsin/opsin expression was maintained at a higher level than in normal controls. CONCLUSION: A series of experiments confirmed that CA-HE50 was effective for inhibiting or preventing age-related eye damage/degeneration. Based on these results, we believe it is worthwhile to develop drugs or functional foods related to age-related eye degeneration using CA-HE50.
Objectives The purpose of this study is to investigate the effects of Gleditsiae Fructus 70% EtOH extract (JS_E) on anti-inflammatory action in HaCaT cells (A spontaneously immortalized human keratinocyte cell line) and inhibiting triglyceride genesis in SEB-1 cells (Immortalized human sebocyte). Methods The anti-inflammatory effect of JS_E was analyzed by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) which measured levels of IP-10, RANTES and MDC in HaCaT cells. Also the effect on secretion of sebum of JS_E was analyzed by TG-S kit which measured the quantity of triglyceride in SEB-1 cells. Results JS_E inhibited IP-10, RANTES and MDC expression in a dose dependent manner. IP-10 expression was inhibited significantly in comparison to TNF-${\alpha}$ and IFN-${\gamma}$ recombination (TI) control group at concentration of JS_E $200{\mu}g/ml$ and RANTES and MDC expressions were inhibited significantly at concentration of JS_E 100, $200{\mu}g/ml$. JS_E also inhibited triglyceride secretion of SEB-1 cells significantly in comparison to the control group in a dose dependent manner. Conclusions This study shows that JS_E has the effects of anti-inflammatory action and inhibiting sebum secretion. According to these results, JS_E can be used for treating skin diseases such as acne and dermatitis caused by inflammation and excessive secretion of sebum by controlling the activity of the HaCaT and SEB-1 cells.
본 연구는 HRL의 3T3-L1 지방전구세포의 분화과정 중에 HRL이 지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay를 이용하여 세포 독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRL은 SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRL은 AMPKα의 활성화를 통한 지방 합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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